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QIAGEN LongRange PCR Kit

高感度で正確なロングレンジPCR
  • 非常に長いPCR 産物の増幅(最高40 kb DNA)
  • ハイフィデリティ酵素により低いエラー率
  • ユニークなバッファーシステムによりPCR 至適化が最小限
  • 低コピー数のターゲットおよびGCリッチなテンプレートの増幅が可能

QIAGEN LongRange PCR Kitは、非常に少量のテンプレートでもゲノムDNAおよびcDNAから長鎖増幅が可能な信頼性の高い専用製品です。斬新なハイフィデリティ酵素ミックスを用いることで低いエラー率を実現します。ヌクレオチドを含む本キットは、難しいジェノタイピング実験に最適です。

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Cat No./ID: 206402
QIAGEN LongRange PCR Kit (100)
¥32,000
For 100 x 50 µl reactions: LongRange PCR Enzyme Mix (200 U), LongRange PCR Buffer, 5x Q-Solution, RNase-Free Water, 10 mM dNTPs
Please note: product QIAGEN LongRange PCR Kit (100) (Cat No. 206402) will be discontinued as of October 15, 2020. For more information, please contact QIAGEN Technical Services.
Cat No./ID: 206403
QIAGEN LongRange PCR Kit (250)
¥72,000
For 250 x 50 µl reactions: LongRange PCR Enzyme Mix (500 U), LongRange PCR Buffer, 5x Q-Solution, RNase-Free Water, 10 mM dNTPs
Please note: product QIAGEN LongRange PCR Kit (250) (Cat No. 206403) will be discontinued as of October 15, 2020. For more information, please contact QIAGEN Technical Services.

QIAGEN LongRange PCR Kit  は分子生物学実験用です。疾病の診断、治療または予防の目的には使用することはできません。


Product Details

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Protection of DNA from excessive damage.
Genomic DNA from leukocytes was pretreated in water (Water), long-range PCR buffer from Supplier A (Standard buffer), or QIAGEN LongRange PCR Buffer (LongRange Buffer), and then directly used for PCR () or incubated at 95°C (+) before PCR. Amplification reactions (50 μl) were performed using the QIAGEN LongRange PCR Kit. M: marker. Pretreatment of DNA in QIAGEN LongRange PCR Buffer provided protection from damage, resulting in increased yield. Reduced product yields were achieved due to greater DNA damage when DNA was pretreated in water or standard long-range PCR buffers.
9
High yields of very long PCR products.

Long PCR products (27 kb and 24 kb) were amplified from human genomic DNA using the QIAGEN LongRange PCR Kit and 2 additional long-range PCR kits from the indicated suppliers, according to the manufacturer's instructions. The QIAGEN LongRange PCR Kit provided much higher yields of specific product than the other kits that were tested.

Performance

QIAGEN LongRange PCR Kit には最高40 kb までの長いPCRフラグメントを増幅するために必要な試薬が全て入っています。伸長性の優れた熱安定性DNAポリメラーゼのユニークなブレンドにより、非常に少量のテンプレートでも完全長PCR産物の増幅が可能です。この酵素ミックスはエクステンション速度が速く、プルーフリーディング能力が高いため、正確性が高まります(Taq DNA polymeraseに比べ正確性が最高5倍増加)。斬新なバッファーシステムは、複雑なゲノムDNAからでさえも高い特異性でロングレンジPCRを実現します(図 "非常に長いPCR産物を高収量で増幅")。さらに、本製品のバッファーは脱プリン化を防ぐため、確実に完全長の増幅可能であり(図 "ゲノムDNAを損傷から防御")、他社の製品よりも優れています。PCRを開始する前にLongRange PCR Buffer 中でインキュベートしたDNAは、損傷のないコントロールDNA由来のPCR 産物と同等の収量があり、このバッファーシステムの防御機能がロングPCR産物の増幅に最適な反応環境を提供していることを証明しています。またキットに付属のQ-SolutionはGCリッチなテンプレートの増幅効率を向上し、不適切なPCR条件を改善します。

QIAGEN LongRange Kitに関する詳細情報
仕様 LongRange PCR LongRange 2Step RT-PCR
アプリケーション クローニング、シークエンシング 40 kb までのスタンダードPCR クローニング、遺伝子発現解析 12.5 kb までのスタンダード2ステップRT-PCR
酵素成分 DNAポリメラーゼ、ハイフィデリティ酵素 逆転写酵素、DNAポリメラーゼ、ハイフィデリティ酵素
最小限の至適化 ユニークなバッファーシステムおよび至適化済みのプロトコール ユニークなバッファーシステムおよび至適化済みのプロトコール
トータルRNA量 トータルRNA 50 ng ~ 4 μg
トータルDNA量 50~500 ng
GCリッチなテンプレートの増幅 Q-Solution 添付 Q-Solution 添付
Principle

QIAGEN LongRange PCR Kit は、40 kbまでの長いターゲットを効率的に増幅するためにデザインされた画期的なバッファーシステムと強力なポリメラーゼミックスを組み合わせています。本キットにはPCR添加剤であるQ-SolutionとdNTP Mixが入っています。Q-Solutionは、GCリッチなテンプレートの増幅を促進します。 

LongRange PCR Enzyme Mix

LongRange PCR Enzyme Mix は、E. coliでクローニングした高純度の組換え耐熱性DNAポリメラーゼと処理能力を高める因子の混合液です。この特殊な酵素配合により、伸長性が非常に高くなるとともに正確さが向上し、非常に長いフラグメントの増幅が可能になります。 

非常に長いPCR産物の増幅用に至適化されたバッファーシステム

4 kb 以上のPCR産物の増幅は失敗することが多く、通常は時間のかかる至適化が必要になります。失敗の原因には非特異的なプライマーのアニーリングあるいは不適切なサイクリング条件などが考えられます。テンプレート内に1箇所のDNA損傷があるとポリメラーゼ酵素が停止するため、長いPCR産物の増幅にはDNAの脱プリン化のようなDNA損傷を防ぐことが非常に重要です。増幅反応のpHを安定化する特殊なバッファーによりPCRサイクリング中のDNA損傷は最小限に抑えられます。QIAGEN LongRange PCR Bufferは40 kbまでのPCR産物の増幅に至適化され、脱プリン化を防ぎます(図 "ゲノムDNAを損傷から防御")。

希少で増幅困難なテンプレートの増幅

LongRange PCR Buffer中のユニークな両性イオン性バッファーにより、高温(72〜94℃)でのpH緩衝効果を改善し、pHによるテンプレート分解を最小限に抑えます。添付のQ-Solutionを用いると、GCリッチなテンプレートや増幅困難なテンプレートの増幅が容易になります。

Procedure

QIAGEN LongRange PCR Kit には、40 kbまでのロングレンジPCRフラグメントを確実かつ正確に増幅するためにあらかじめ最適化されたプロトコールが入っています。本キットは、長いターゲット(0.1~10 kbの範囲の全ターゲット)、非常に長いターゲット(10 kbより長いゲノムDNA、10~40 kbのエピソームDNA)、逆転写反応による長いcDNAテンプレート、GCリッチなテンプレートやその他の「増幅困難」なテンプレートの増幅に使用できます。

Applications

QIAGEN LongRange PCR Kitは、一般的なテンプレートや複雑なテンプレート(低発現量のターゲットやGCリッチなテンプレート)の正確なロングレンジ増幅を実現します。 これらのキットはシークエンシングやリシークエンシング、低コピー数多型(CNVs)の確認、染色体転座切断点やその他の構造異常を確認するためのマッピング、クローニングを含む全てのPCRアプリケーションに最適です。

Product Resources

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パンフレット (3)
キットハンドブック (2)
For reliable and accurate long-range PCR up to 40 kb
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正確で信頼できるロングレンジPCR
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クイックスタートプロトコール (1)
fragment fix placeholder

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