Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit

配列特異的なプローブを用いたRotor-Gene サイクラーでの超高速1ステップqRT-PCR

  • Rotor-Gene サイクラーでの信頼できる結果を超高速で実現するために最適化済み
  • 低コピー数の標的遺伝子でも高感度な検出
  • 幅広いテンプレート量で正確に検出
  • 高速サイクリング用に特別に調製された即使用可能なマスターミックス

Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit はRotor-Gene Qおよびその他のRotor-Gene サイクラーでの使用を目的としてデザインされ、配列特異的プローブを用いた1ステップリアルタイムRT-PCRでRNAターゲットを超高速かつ高感度で定量できます。特別に至適化されたマスターミックスとRotor-Geneサイクラーの遠心エアコントロール方式の組み合わせにより、最高の性能を実現します。マスターミックスは2～8 ℃で保存でき、簡便に取り扱えます。

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製品名 Cat. no. List price:
Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit (400)
For 400 x 25 µl reactions: 3 x 1.7 ml 2x Rotor-Gene Probe RT-PCR Master Mix, 100 µl Rotor-Gene RT Mix, 2 x 2 ml RNase-Free Water
 204574
¥87,500
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Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit  は分子生物学実験用です。疾病の診断、治療または予防の目的には使用することはできません。


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配列特異的プローブを用いた高感度検出|プライマーの特異的なアニーリング|プライマーの高速なアニーリング|
ヒト白血球RNA の10 倍段階希釈液（100 ng～1 ng）をテンプレートとして、1 ステップリアルタイムRT-PCR で使用した。IL12RB1（interleukin 12 receptor, beta 1）用TaqMan Gene Expression Assay を用いてtriplicate で反応を行なった。Rotor-Gene Q とRotor-Gene Probe RT-PCR Kit を用いた場合[A] 、AII社の装置とキットを用いた場合[B] よりも、非常に感度の高い結果（CT値が低い）が得られた。|Rotor-Gene Q PCRバッファー中の陽イオンによりプライマーのアニーリングにおける特異性が増加。K+は二本鎖DNAのリン酸基に結合し、プライマーのアニーリングを安定化する。NH4+は、ミスマッチな塩基対間の水素結合を不安定化する。|[A] Rotor-Gene Probe RT-PCR Master Mix 中のQ-Bondは、短い一本鎖DNAへのDNAポリメラーゼの結合アフィニティーを大幅に増大させるため、プライマーのアニーリング時間を数秒間に短縮できる。さらにDNAの融解をサポートするユニークなバッファー組成が、変性およびエクステンション時間を短縮する。[B] Q-Bondが存在しないと、プライマーとポリメラーゼが段階的にテンプレートに結合するのでプライマーのアニーリングに時間がかかる。|
パフォーマンス
Rotor-Gene Probe RT-PCR Kitを用いて発現量の少ない転写物を確実に定量できます（図“配列特異的プローブを用いた高感度検出”)。
原理

Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit は Rotor-Gene Q において信頼できるリアルタイムRT-PCR定量を実現します。 反応条件やサイクリング条件の至適化は不要です。本キットは加水分解プローブ（例、TaqManプローブ）を使用するようにデザインされています。逆転写反応と増幅を同一チューブ中で行なう1ステップリアルタイムRT-PCRのテンプレートとしてRNAを使用します。逆転写反応の完了したRT反応液を他のPCR用チューブに移し替える必要がないのでリアルタイムRT-PCR操作を効率的に行なえ、ハイスループット解析が可能です。

特異的なプライマーアニーリングを促進するK+とNH4+イオンのバランスの取れた配合により、特異性の高い増幅が確保され、PCRの高い特異性と感度を実現します (図 “プライマーの特異的なアニーリング”)。画期的なPCR 添加物であるQ-Bond により性能を損なうことなく高速サイクリングが行なえ、サイクラーのランニング時間は大幅に短縮されます（図“プライマーの高速なアニーリング”)。

2x Rotor-Gene Probe RT-PCR Master Mixの成分*
成分特長利点
HotStarTaq Plus DNA Polymerase95℃、5分の活性化室温でのqPCRのセットアップ
Rotor-Gene Probe RT-PCR BufferNH4+とK+イオンの配合バランス特異性の高いプライマーのアニーリングで信頼性の高いｑPCR結果
ユニークな添加剤Q-Bond より迅速なPCRランタイムでより早く結果が得られ、一日あたりの反応数も増大
Rotor-Gene RT Mix  RNA親和性の高い逆転写酵素を特別に配合    複雑な二次構造を持つRNAでもわずか10分で逆転写可能
* dNTP Mix（dATP、dCTP、dGTP、dTTP）も含む。
操作手順

即使用可能なRotor-Gene Probe RT-PCR Master Mixにより、反応条件やサイクリング条件の至適化が不要です。RNAテンプレート、プライマー、プローブ、添付の逆転写酵素ミックスをマスターミックスに添加し、サイクラーをプログラミングします。キットに添付のハンドブックに詳細な説明が記載されています。

加水分解プローブ（例、TaqManプローブ）は、Rotor-Gene Probe RT-PCR Kitと一緒にRotor-Gene Qで使用でき、マスターミックスにプライマー/プローブミックスとテンプレートを添加するだけの迅速で高感度な定量を実現します。

アプリケーション

Rotor-Gene Probe RT-PCR KitはRotor-Gene Q上で配列特異的なプローブを用いたRNAターゲットの迅速な1ステップリアルタイムRT-PCR解析に最適です。本キットはRotor-Gene 3000およびRotor-Gene 6000サイクラーにも対応しています。

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Feature
Specifications
Applications Real-time quantification of RNA targets
Description For ultrafast quantitative real-time one-step RT-PCR using sequence-specific probes
Reaction type Real-time one-step RT-PCR
Real-time or endpoint Real-time
Sample/target type RNA
Single or multiplex Single
SYBR Green I or sequence-specific probes Sequence-specific probes
Thermal cycler Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000
With or without ROX Without ROX dye

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パンフレット
2
(EN) - Rotor-Gene Q - Pure Detection
Now with even more applications!
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(JA) - Rotor-Gene Q
優れた温度均一性を実現するリアルタイムPCR 装置
詳細を表示
キットハンドブック
2
(EN) - Rotor-gene Probe Handbook
For fast real-time PCR, two-step RT-PCR, and one-step RT-PCR using sequence-specific probes on Rotor-gene cyclers.
詳細を表示
(JA) - Rotor-Gene Probe プロトコールとトラブルシューティング
Rotor-Gene Probe PCR Kit
Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit

配列特異的なプローブとRotor-Gene サイクラーを用いた迅速なリアルタイムPCR、2ステップRT-PCR、1ステップRT-PCR
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MSDS
1
Safety Data Sheets
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安全データシート
1
MSDS Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit (400)

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