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QIAamp Fast DNA Tissue Kit icon_0368_ls_gen_eco_friendly-s
カタログ番号 / ID. 51404
プレップ50回分：QIAamp Spin Columns、QIAGEN Proteinase K、RNase A、組織破壊用チューブ、バッファー
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QIAamp Fast DNA Tissue Kitは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。
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特徴
- 標準法と比較して5～10倍収量が改善
- 溶解時間が数時間からわずか15分に短縮
- PCRやNGSアプリケーションに適した完全性の高いDNA
- 阻害物質の完全な除去
- QIAcubeで抽出を自動化
製品詳細
PCRまたは次世代シークエンシング（NGS）を使った遺伝子型決定やその他のDNA解析には、出発物質として適切な量の高品質ゲノムDNAが必要です。高品質DNAの取得に最もよく課題となるのが組織の溶解です。繊維性組織やその他の溶解しにくい組織は、時間がかかる面倒なプロトコールが必要であるにもかかわらず、少量で低品質のDNAしか回収できないこともよくあります。QIAamp Fast DNA Tissue Kitは、高い実績を誇るQIAGEN技術を基に、収量を大幅に向上させ、全体のプロセス時間を短縮できる革新的な破砕チューブを導入して、この問題をクリアしています。プロセスはQIAcube Connectを使えば完全な自動化が可能です。
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パフォーマンス
QIAamp Fast DNA Tissue Kitは機械的破砕、化学的溶解、酵素的溶解を斬新に組み合わせています。各キットには独特な形状をした特殊なステンレス製ビーズが組み込まれた破砕チューブが付属しており、他の方法より徹底した破砕が可能となっています。最初に組織サンプルと試薬の混合液をチューブに注入し、一般的なベンチトップの撹拌装置またはTissueLyser IIまたはLTなどのビーズ式ホモジナイザーで均質化します（適切なアダプターを使用のこと）。その後、同じチューブで短時間溶解し、続いて高い実績を誇るQIAamp技術を使ってDNAを溶解物から抽出します。この前処理で全DNAの抽出時間が数時間から30分へと短縮されます。
DNA抽出時間を短縮するのと同時に、機械的破砕と徹底した溶解プロトコールを行うことによってDNAの収量が増加します。さまざまな組織タイプにおける収量の改善度をQIAxpertと蛍光分析アッセイを使って評価したところ、 QIAamp Fast DNA Tissue Kitは標準方法の10倍ものDNAを抽出する能力があり、最速のプロトコールを提供している結果となりました。
大部分のNGSアプリケーションは、より長いDNA断片をシークエンスし、バイオインフォマティクスツールを使ってアセンブルを行うために、高分子量DNA（>10 kb）が必要となります。破砕方法には、剪断によってDNAを断片化するものもありますが、これはダウンストリームの解析に影響を及ぼします。わずか数kbまで高度に断片化される他のキットと比較して、QIAamp Fast DNA Tissue Kitは、PCRやNGSアプリケーションに最適な25～50 kbのDNAを回収できます。
DNA抽出時間を短縮するのと同時に、機械的破砕と徹底した溶解プロトコールを行うことによってDNAの収量が増加します。さまざまな組織タイプにおける収量の改善度をQIAxpertと蛍光分析アッセイを使って評価したところ、 QIAamp Fast DNA Tissue Kitは標準方法の10倍ものDNAを抽出する能力があり、最速のプロトコールを提供している結果となりました。
大部分のNGSアプリケーションは、より長いDNA断片をシークエンスし、バイオインフォマティクスツールを使ってアセンブルを行うために、高分子量DNA（>10 kb）が必要となります。破砕方法には、剪断によってDNAを断片化するものもありますが、これはダウンストリームの解析に影響を及ぼします。わずか数kbまで高度に断片化される他のキットと比較して、QIAamp Fast DNA Tissue Kitは、PCRやNGSアプリケーションに最適な25～50 kbのDNAを回収できます。
原理
PCRやNGSなどの分子技術は、これまで不明だったことを複雑な実験サンプルから明らかにしてくれます。これらの技術で信頼性の高い結果を得るためには、高品質なDNAを十分な量で回収することが不可欠です。しかし、繊維組織や硬い組織は溶解が難しく、このため回収されるDNAの量に直接的な影響を与えます。この問題に対処するため、QIAGENの新しいQIAamp Fast DNA Tissue Kitは、組織の機械的破砕、化学的溶解、酵素的溶解を組み合わせ、標準的な方法と比較して5～10倍のDNA収量を得ることができます。前処理によって、DNAの抽出時間が数時間からわずか30分に短縮され、PCRやNGSアプリケーションに適した高品質なDNAを得るとともに、時間の大幅な短縮も実現できます。
操作手順
QIAamp Fast DNA Tissue Kitは、機械的破砕、化学的溶解、酵素的溶解を組み合わせてサンプルを均質化します。付属するTissue Disruption Tubesには、撹拌時に効果的に組織を破砕する特殊な形状のビーズが入っており、デスクトップ型の撹拌装置ではわずか5分、高性能なビーズ式ホモジナイザーでは30秒で組織の均質化が完了します。最適化された化学成分により、組織が均質化されると同時に、破砕された組織から放出されたDNAが安定化されます。消化バッファーにはプロテイナーゼKが含まれており、続く短時間のインキュベーションでサンプルは完全に溶解され、機械的均質化による影響を受けません。次に、ゲノムDNAは実績のあるQIAamp技術を用いて精製され、PCRやシークエンシングなどのダウンストリームアプリケーションに適した高純度のDNAが回収されます。さらに、QIAamp Fast DNA Tissue KitはQIAcubeを使用することで、サンプル準備の自動化が可能となります。
アプリケーション
QIAamp Fast DNA Tissue Kitは、あらゆる組織タイプから高収量の純粋なDNAを得ることができ、PCRやNGSアプリケーションに最適です。
裏付けデータと数値
阻害物質を効果的に除去
QIAamp Fast DNA Tissue KitまたはQIAamp DNA Mini Kitを用いて10 mgのブタの耳小片から抽出したDNAを用いて内部コントロールを増幅しました。溶出液として1 μlまたは6 μlを加えた場合でも、インターナルコントロールの増幅に影響はなく、溶出液中には阻害物質が存在しないことが確認されました。IC: インターナルコントロール。
リソース
パンフレットとガイド (4)
安全データシート (1)
キットハンドブック (1)
技術情報と重要メモ (1)
クイックスタートプロトコール (1)
科学ポスター (1)
補足的プロトコール (1)
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)
よくある質問
Can I use blood, cells or bacteria with the QIAamp Fast DNA Tissue Kit?