FlexiTube siRNA Premix

1ステップsiRNAトランスフェクション用に至適化済み試薬

製品

FlexiTube siRNA Premixは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。
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FlexiTube siRNA Premix

カタログ番号 / ID.   1027420

Optimized siRNA–reagent mix; 0.75 nmol siRNA; provided in tubes
¥41,500

特徴

  • 細胞に添加し、インキュベートするだけの簡単操作で時間を節約
  • より簡単な操作で効率的なトランスフェクション
  • 一定した条件下で多数の実験が可能

製品詳細

FlexiTube siRNA PremixはsiRNAとトランスフェクション試薬が最適な割合で配合されています。siRNAと試薬が混和済みなので試薬の混和やコンプレックス形成のための操作が不要で実験時間を短縮できます。さらにFlexiTube siRNA Premixを用いれば、siRNAと試薬の比率を決定するための至適化実験の必要がありません。FlexiTube siRNA Premixはヒト、マウスの遺伝子用があります。

パフォーマンス

FlexiTube siRNA Premix中のsiRNAと試薬との比率は、高いトランスフェクション効率とノックダウン効率を示します(図 “  迅速で効率的なノックダウン”および“  ノックダウン後の表現型解析”)。

FlexiTube siRNA Premixに入っているFlexiTube siRNA はQIAGENの高性能なHP OnGurad siRNA Designを用いてデザインされ、高い抑制効果と特異性を実現します。siRNAは膨大なRNAi 実験のデータセットを基にしたニューラルネットワークテクノロジーを用いてデザインされています。その後、適正に評価された重複のない最新の配列データベースと新しい特徴を取り入れたQIAGEN独自の相同性解析ツールを用いてsiRNAデザインとゲノムの他の配列との相同性をチェックします。

性能保証

FlexiTube siRNA Premixesには1回だけ無料で再納品する保証が付いております。同じターゲット遺伝子に対して数種類のFlexiTube siRNA Premixesを注文され、そのうち少なくとも2種類が ≥70%のターゲット遺伝子のノックダウンを実現しなかった場合、QIAGEN は追加料金無しで、2種類のsiRNAを1度だけ再納品します。再納品に際しては適切なトランスフェクション条件下でsiRNAがmRNAレベルでターゲット遺伝子を最低70%ノックダウンできなかったことを証明するデータが必要です。このデータにはトランスフェクション効率、silencingの定量データ、ポジティブコントロールで70%以上のノックダウン効果を示すデータも含まれます。このオファーは製品納入後6か月まで有効です。

原理

FlexiTube siRNA Premixは、目的遺伝子をターゲットにしたsiRNAと高効率なトランスフェクション試薬が既に混和されており、1本のチューブで供給しております。FlexiTube siRNA PremixにはsiRNA・試薬コンプレックスの安定性を高める特殊なバッファーが入っています。FlexiTube siRNA Premix中のsiRNAと試薬と の比率は至適化済みで、高いトランスフェクション効率とノックダウン効率を示します(図“  迅速で効率的なノックダウン”および“  ノックダウン後の表現型解析”)。

操作手順

FlexiTube siRNA Premixは細胞へのトランスフェクションへ即使用可能です。細胞に添加しインキュベートするだけの簡単な操作です。通常のトランスフェクション実験はsiRNAを希釈してトランスフェクション試薬と混和、これをインキュベートしてsiRNA試薬のコンプレックスを形成し、このコンプレックスを細胞に添加してインキュベーションを行なう、というステップが必要ですが、これと比較すると、FlexiTube siRNA Premixは時間と労力を大幅に節約できます。

FlexiTube siRNA Premixを用いると、siRNA と試薬の比率を至適化する必要がないのでRNAi実験をすぐに開始できます。FlexiTube siRNA PremixではsiRNA と試薬の比率が最適に混和されているため、多くのトランスフェクションを含む時間のかかる至適化実験は最小限に抑えられるか回避することができます。

1本のFlexiTube siRNA Premixで複数のトランスフェクションが行なえます。これは実験間におけるばらつきを抑え、一定した信頼できる実験結果を実現します。

アプリケーション

FlexiTube siRNA Premixは、少数の標的遺伝子を用いた機能ゲノミクスあるいはパスウェイ解析に最適です。

裏付けデータと数値

仕様

特徴仕様
DesignHP OnGuard design
Target sequence providedYes
ModificationNo
siRNA per target genevariable
FormatTube
Number of transfections50 standard transfections in 24-well format
Guarantee/validationfor validated siRNAs
SpeciesHuman, mouse
Scale or yield0.75 nmol

リソース

ファイルをダウンロード (1)
安全データシート (1)
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)

よくある質問

Is it possible to use lower siRNA concentrations with FlexiTube siRNA Premix?
FlexiTube siRNA Premix works with minimal siRNA concentrations. To decrease the final siRNA concentration, simply use smaller volumes of FlexiTube siRNA Premix for transfection. For example, using only half of the volume given in the protocol will lead to a final siRNA concentration of 12.5 nM. Depending on the cell type, final siRNA concentrations of down to 1 nM can lead to sufficient gene silencing.
FAQ-2264
If I am working with a difficult-to-transfect cell type or if I obtain only weak silencing effects what can I do?
In the case of difficult cell types or weak silencing effects, it may be helpful to increase the final siRNA concentration during transfection. This can be achieved simply by using larger amounts of FlexiTube siRNA Premix for transfection.
FAQ-2265
Do I have to order at least 4 FlexiTube siRNA Premixes?
No, there is no minimal order number for FlexiTube siRNA Premix. You can order one single FlexiTube siRNA Premix if desired.
FAQ-2266
Does the atypical look of the lyophilized FlexiTube siRNA Premix have a negative impact on performance?
The pellet of the lyophilized FlexiTube siRNA Premix does not look like a typical nucleic acid pellet.   The lyophilized FlexiTube siRNA Premix has a gel-like appearance.  This is the typical appearance of this product and has no impact on the quality of the material or its performance in downstream assays.
FAQ-2267
Is one able to use FlexiTube siRNA Premix for transfection of primary adherent cell types?
QIAGEN's experience using FlexiTube siRNA PreMix and transfection of primary adherent cell types is limited, but we do know that researchers have achieved excellent results with some primary cell types, for example, HUVEC cells.
FAQ-2268
Is one able to use FlexiTube siRNA Premix for transfection of primary suspension cell types?
Similar to other chemical transfection technologies, FlexiTube siRNA Premix is not recommended for the transfection of primary suspension cell types.
FAQ-2269
How do I store my FlexiTube siRNA Premix?
Reconstituted FlexiTube siRNA Premix can be stored at 4°C for one month.  For storage longer than one month, it is recommended to store the reconstituted mix at -20°C.  We found that after 5 freeze-thaw cycles, the potency of FlexiTube siRNA Premixes was not affected. However, although it is not recommended, we found that storage of reconstituted FlexiTube siRNA Premix for 6 months at 4°C did not reduce the gene silencing potency compared to reference transfections.
FAQ-2270
How do I submit a siRNA order by telephone or online?

FlexiTube siRNA, FlexiTube GeneSolution, FlexiTube siRNA Premix, FlexiPlate siRNA, and GeneFamily Lists siRNAs can be ordered by catalog number over the telephone.

However, to ensure accuracy, Custom siRNA Synthesis orders should be submitted in writing. Therefore you can use the HP Custom siRNA Order Form https://www.qiagen.com/products/genesilencing/customsirna/customsirnaorder.aspx?EmailOrdering=1.

Visit the RNAi Solutions page http://www.qiagen.com/products/rnai/default.aspx?r=2714 on our homepage for access to the Online Ordering Tool, and choose the order link for your product of interest.

FAQ-399
Has RNAi been successful using siRNA in Zebrafish and Xenopus?

Here are examples of references that describe the inhibition of gene expression by siRNA in Xenopus and Zebrafish:

FAQ-400