QuickLyse Miniprep Kit

超快速纯化至多15 μg测序级别纯的质粒DNA

  • 快速的一步裂解
  • 减少手动操作时间和实验步骤
  • 1.5–3 ml菌液至多可获得15 μg DNA
  • 9分钟可获得即用型质粒DNA

QuickLyse Miniprep Kit为提取测序级别的质粒DNA提供了一个以快速离心柱为基础的方法。在单一的缓冲液中,细菌细胞重悬、溶解,同时与DNA结合,使得在较短的操作时间内快速纯化DNA。

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QuickLyse Miniprep Kit (100)
100 QuickLyse Spin Columns, Reagents, Buffers, Lysis and Collection Tubes (2 ml)
27405
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QuickLyse Miniprep Kit (250)
250 QuickLyse Spin Columns, Reagents, Buffers, Lysis and Collection Tubes (2 ml)
27406
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QuickLyse Miniprep Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


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高品质质粒DNA的产量高。|QuickLyse实验流程。|产量具有可重复性。|自动测序中的读取片段长。|
不同细胞和载体的1.5 ml细菌培养物(LB培养基)中DNA的常规产量和纯度。|QuickLyse采用简单的结合-洗涤-洗脱步骤。|使用QuickLyse Miniprep Kit (QL) 及其他三种商品化的试剂盒(1–3)纯化质粒DNA (pSV-β-半乳糖苷酶)。使用NdeI和EcoRI限制性酶对纯化的质粒DNA进行酶切。反应重复两次。M:分子量标准。Ø:未经酶切的质粒。|使用QuickLyse Miniprep Kit纯化的质粒DNA的一般测序结果。从TOP10细胞中分离pSV-β-半乳糖苷酶质粒,并使用BigDye终止子测序试剂测序。|
性能

QIAGEN QuickLyse Miniprep Kit采用一步裂解技术,可以超速制备至多15 µg质粒DNA。DNA的质量确保了其在下游应用中的良好表现,如测序、限制性分析和克隆(参见"Reproducible yields")。

QuickLyse Miniprep Kit纯化的足量质粒DNA,可以用于任何的下游应用,包括测序(参见 "Long read-lengths in automated sequencing")。从1.5 ml的细菌培养液中至多获得15 µg的高拷贝质粒DNA(参见 "High yields of high-quality plasmid DNA")。纯化得到的质粒DNA有1.7–1.9的OD260/280 比率,表明其质量和纯度适合多种敏感应用。而且很容易获得超过700个单位的读取长度。

原理

不同于大多数方案需要3步裂解程序,QuickLyse Miniprep Kit将细菌细胞裂解的酶和渗透压处理步骤融合到一个3分钟步骤中。此外,QuickLyse技术使用很少量的缓冲溶液、简化操作并且节约大量时间:可以在22分钟内获得24份小量纯化的质粒DNA。

操作流程
重悬浮和裂解的细菌细胞和DNA结合在单一的缓冲溶液中,使得DNA在短时间内得到快速纯化。在3分钟的裂解步骤后,澄清的裂解产物直接加入到QuickLyse Spin Column中。质粒DNA结合在离心柱膜上,然后用简单的清洗步骤洗脱。(参见"QuickLyse procedure")。得到的DNA可以直接运用在标准的应用中,包括自动测序、PCR、限制性分析和克隆。
应用

QuickLyse Miniprep Kit产生足量的质粒DNA用于多种的下游应用,包括自动测序。

特点
参数
应用 Automated sequencing, PCR, restriction analysis, cloning etc.
起始样本体积 1.5 ml culture volume
洗脱体积 50 µl
质粒类型 High-copy, cosmid DNA
处理 Manual (centrifugation)
每次处理样本量;通量 1–24 samples per run
技术 QuickLyse technology
每次运行时间或处理样本数 9 min
产量 3–7 µg

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试剂盒操作手册
1
For purification of sequencing grade plasmid DNA
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High Yields of High-Quality Plasmid DNA.
高品质质粒DNA的产量高。
不同细胞和载体的1.5 ml细菌培养物(LB培养基)中DNA的常规产量和纯度。
QuickLyse Purification Procedure.
QuickLyse实验流程。
QuickLyse采用简单的结合-洗涤-洗脱步骤。
Reproducible Yields.
产量具有可重复性。
使用QuickLyse Miniprep Kit (QL) 及其他三种商品化的试剂盒(1–3)纯化质粒DNA (pSV-β-半乳糖苷酶)。使用NdeI和EcoRI限制性酶对纯化的质粒DNA进行酶切。反应重复两次。M:分子量标准。Ø:未经酶切的质粒。
Long Read-Lengths in Automated Sequencing.
自动测序中的读取片段长。
使用QuickLyse Miniprep Kit纯化的质粒DNA的一般测序结果。从TOP10细胞中分离pSV-β-半乳糖苷酶质粒,并使用BigDye终止子测序试剂测序。