For standard and specialized PCR applications
- QIAGEN PCR Buffer for minimal optimization
- Additional ready-to-load PCR buffer for faster handling
- Q-Solution for amplification of GC-rich templates
- Choice of formats for convenience and ease of handling
Taq DNA Polymerase is supplied with the unique QIAGEN PCR Buffer that minimizes the need for optimization of PCR parameters, as well as Q-Solution, a novel additive that enables efficient amplification of "difficult" (e.g., GC rich) templates. In addition, CoralLoad PCR Buffer (containing two gel-tracking dyes) is also provided, enabling immediate loading of PCR products.
ja-JP
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製品名
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Cat. no.
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List price:
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Taq DNA Polymerase (250 U)
250 units Taq DNA Polymerase, 10x PCR Buffer, 10x CoralLoad PCR Buffer, 5x Q-Solution, 25 mM MgCl2
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201203
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Taq DNA Polymerase (1000 U)
4 x 250 units Taq DNA Polymerase, 10x PCR Buffer, 10x CoralLoad PCR Buffer, 5x Q-Solution, 25 mM MgCl2
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201205
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Taq DNA Polymerase (5000 U)
20 x 250 units Taq DNA Polymerase, 10x PCR Buffer, 10x CoralLoad PCR Buffer, 5x Q-Solution, 25 mM MgCl2
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201207
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Taq DNA Polymerase Kit (25000 U)
100 x 250 units Taq DNA Polymerase, 10x PCR Buffer, 10x CoralLoad PCR Buffer, 5x Q-Solution, 25 mM MgCl2
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201209
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Taq DNA Polymerase は分子生物学実験用です。疾病の診断、治療または予防の目的には使用することはできません。
CoralLoad PCR Buffer.|異なったマグネシウム濃度への適応|増幅困難なテンプレートを増幅|Tm値の異なるプライマーへの適応性|ロット間での再現性|長いPCR産物の特異的増幅|プライマーのアニーリングにおける特異性が増加|
CoralLoad PCR Buffer ( [A] ) は、は2種類のゲルマーカー色素を含んでおり ( [B ]) 、PCR産物を即ゲルにアプライでき、DNAの泳動を簡単に可視化できる。|記載のMg2+濃度で、QIAGEN PCR BufferとTaq DNA Polymerase(QIAGEN)を用いてPCR反応を行なった。同じ条件のPCR反応を他社(Supplier AII)のPCRバッファーとTaq DNA ポリメラーゼを用いて起こした。シングルコピーのヒトプリオンタンパク遺伝子が増幅された。M:マーカー。|2種類のプライマー/テンプレートシステムにおいて1x Q-Solutionの非存在下(-)、あるいは存在下(+)でQIAGEN PCR BufferとTaq DNA Polymeraseを用いて増幅した。Q-Solutionを使用すれば、難しいテンプレートを特異的に増幅することができまる。[A] ヒトアンジオテンシンレセプターII遺伝子、[B] マウスプロテインキナーゼC遺伝子、M:マーカー。|ヒト嚢胞性線維症のシングルコピー遺伝子を図に示したアニーリング温度でQIAGEN TaqDNA PolymeraseとPCR Bufferを用いて増幅した。使用したプライマーは、Tm が57.5℃ (GC 含有率:54.5%)のとき22 mer、Tm が85.2℃ (GC 含有率:78%)のとき32 merだった。反応液100 μl の10%をアガロースゲルにロードした。M:マーカー。|ターゲットテンプレート、それぞれ104、103、102 コピーに相当するヒトゲノムDNA、30 ng、3 ng、300 pgから嚢胞性線維症のシングルコピー遺伝子のフラグメントを増幅した。Taq DNA Polymeraseの3つの異なるロットを使用し、それぞれのPCR産物は1 %アガロースゲルで電気泳動を行なった。M:マーカー|Taq DNA PolymeraseとQIAGEN PCR Buffer(QIAGEN)、または他社(Supplier AII)の TaqDNA ポリメラーゼとバッファーを用いて、ヒトゲノムDNAから異なる長さの3種類のフラグメントを増幅した。分析のため、各反応液の10%をゲルにロードした。同じPCR増幅の結果を示す。M:マーカー。|QIAGEN PCR Buffer中のアンモニウムイオンとカリウムイオンにより、プライマーのアニーリングにおける特異性が増加。K+ はDNA バックボーンのリン酸基(P-)に結合し、テンプレートへのプライマーアニーリングを安定化する。サーマルサイクリング条件下では、アンモニウムイオンおよびアンモニアの両方として存在するNH4+は、塩基(B)間の水素結合に相互作用するため、ミスマッチの塩基間の水素結合を不安定にする。これら2 種類の陽イオンの組み合わせ効果により、幅広い温度範囲において非特異的なプライマーテンプレート結合に対する特異的な結合の比率が高く保たれる。|
パフォーマンス
Taq DNA Polymerase outperformed kits tested from other suppliers and delivers robust PCR performance in a wide range of PCR conditions, without the need for time-consuming optimization (see figures "Tolerance of different primer Tm Values" and "Specific amplification of long PCR products"). Every lot of Taq DNA Polymerase is subjected to a comprehensive range of quality control tests, including a stringent PCR specificity and reproducibility assay in which low-copy targets are amplified from human genomic DNA (see figure "Lot-to-lot reproducibility"). The unique formulation of QIAGEN PCR Buffer and CoralLoad PCR Buffer, also provided with the kit, enable highly specific PCR in a variety of PCR conditions with minimal optimization requirements (see figures "Wide annealing-temperature window" and "Tolerance to variable magnesium concentration"). In addition, CoralLoad PCR Buffer enables immediate loading of PCR products onto an agarose gel for even easier handling and faster results. Suboptimal PCR can be improved using Q-Solution, a PCR additive, also provided with the kit (see figure "Amplification of difficult templates").
Taq DNA Polymerase specifications
Concentration: 5 units/µl Recombinant enzyme: Yes Substrate analogs: dNTP, ddNTP, dUTP, biotin-11-dUTP, DIG-11-dUTP, fluorescent-dNTP/ddNTP Extension rate: 2–4 kb/min at 72°C Half-life: 10 min at 97°C; 60 min at 94°C Amplification efficiency: ≥105 fold 5'–>3' exonuclease activity: Yes Extra A addition: Yes 3'–>5' exonuclease activity: No Contaminating nucleases: No Contaminating RNases: No Contaminating proteases: No Self-priming activity: No
原理
Taq DNA Polymerase is a high-quality recombinant enzyme that is suitable for general and specialized PCR applications (see figures "Tolerance of different primer Tm Values" and "Specific amplification of long PCR products").
QIAGEN PCR Buffer
Innovative QIAGEN PCR Buffer has been developed to save time and effort by reducing the need for PCR optimization. QIAGEN PCR Buffer contains both KCl and (NH4)2SO4(see figure "Increased specificity of primer annealing"). This unique buffer facilitates the amplification of specific PCR products. During the annealing step of every PCR cycle, the buffer allows a high ratio of specific-to-nonspecific primer binding. Owing to a uniquely balanced combination of KCl and (NH4)2SO4, the PCR buffer provides stringent primer-annealing conditions over a wider range of annealing temperatures and Mg2+ concentrations than conventional PCR buffers. Optimization of PCR by varying the annealing temperature or the Mg2+ concentration is dramatically reduced and often not required (see figures "Wide annealing temperature window" and "Tolerance to variable magnesium concentration").
CoralLoad PCR Buffer
CoralLoad PCR Buffer has all the advantages of QIAGEN PCR Buffer. In addition, it can also be used to directly load the PCR reaction onto an agarose gel — separate addition of a gel loading buffer is not required. CoralLoad PCR Buffer provides the same high PCR specificity and minimal reaction optimization as the conventional QIAGEN PCR Buffer. Additionally, it contains two marker dyes — an orange dye and a red dye — that facilitate estimation of DNA migration distance and optimization of agarose gel run time (see figure "CoralLoad PCR Buffer"). The buffer ensures improved pipetting visibility and enables direct loading of PCR products onto a gel, for enhanced convenience.
Q-Solution
Q-Solution facilitates amplification of GC-rich templates or templates with a high degree of secondary structure by modifying the melting behavior of DNA. Use of this unique reagent often enables or improves suboptimal PCR (see figure "Amplification of difficult templates"). Unlike DMSO and other PCR additives, Q-Solution is used at a defined working concentration with any primer–template system and is not toxic.
操作手順
Taq DNA Polymerase ensures highly specific PCR for a range of applications — with minimal optimization of PCR parameters. The streamlined, easy-to-follow protocol provided with the kit simplifies PCR setup. For added convenience and easier handling, CoralLoad PCR Buffer is provided. PCR products can be directly loaded onto a gel without the addition of a loading dye. To ensure success with GC-rich templates, the PCR enhancer Q-Solution is included.
アプリケーション
Taq DNA Polymerase is used for standard and specialized applications, including:
- General PCR
- RT-PCR
- Screening
- PCR-based DNA fingerprinting (VNTR, STR, and RAPD)
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Second edition — innovative tools
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Addressing critical factors and new solutions
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PCR 実験における重要項目と新技術
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FAQ ID -74
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FAQ ID -75
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FAQ ID -87
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FAQ ID -165
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FAQ ID -1047
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FAQ ID -1644
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FAQ ID -1739
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FAQ ID -1745
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FAQ ID -204
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FAQ ID -288
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FAQ ID -380
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FAQ ID -523
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FAQ ID -544
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FAQ ID -552
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FAQ ID -566
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FAQ ID -606
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FAQ ID -741
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FAQ ID -750
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FAQ ID -818
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For standard and specialized PCR applications with minimal optimization
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Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
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画像
CoralLoad PCR Buffer.
CoralLoad PCR Buffer ( [A] ) は、は2種類のゲルマーカー色素を含んでおり ( [B ]) 、PCR産物を即ゲルにアプライでき、DNAの泳動を簡単に可視化できる。
異なったマグネシウム濃度への適応
記載のMg2+濃度で、QIAGEN PCR BufferとTaq DNA Polymerase(QIAGEN)を用いてPCR反応を行なった。同じ条件のPCR反応を他社(Supplier AII)のPCRバッファーとTaq DNA ポリメラーゼを用いて起こした。シングルコピーのヒトプリオンタンパク遺伝子が増幅された。M:マーカー。
増幅困難なテンプレートを増幅
2種類のプライマー/テンプレートシステムにおいて1x Q-Solutionの非存在下(-)、あるいは存在下(+)でQIAGEN PCR BufferとTaq DNA Polymeraseを用いて増幅した。Q-Solutionを使用すれば、難しいテンプレートを特異的に増幅することができまる。[A] ヒトアンジオテンシンレセプターII遺伝子、[B] マウスプロテインキナーゼC遺伝子、M:マーカー。
Tm値の異なるプライマーへの適応性
ヒト嚢胞性線維症のシングルコピー遺伝子を図に示したアニーリング温度でQIAGEN TaqDNA PolymeraseとPCR Bufferを用いて増幅した。使用したプライマーは、Tm が57.5℃ (GC 含有率:54.5%)のとき22 mer、Tm が85.2℃ (GC 含有率:78%)のとき32 merだった。反応液100 μl の10%をアガロースゲルにロードした。M:マーカー。
ロット間での再現性
ターゲットテンプレート、それぞれ104、103、102 コピーに相当するヒトゲノムDNA、30 ng、3 ng、300 pgから嚢胞性線維症のシングルコピー遺伝子のフラグメントを増幅した。Taq DNA Polymeraseの3つの異なるロットを使用し、それぞれのPCR産物は1 %アガロースゲルで電気泳動を行なった。M:マーカー
長いPCR産物の特異的増幅
Taq DNA PolymeraseとQIAGEN PCR Buffer(QIAGEN)、または他社(Supplier AII)の TaqDNA ポリメラーゼとバッファーを用いて、ヒトゲノムDNAから異なる長さの3種類のフラグメントを増幅した。分析のため、各反応液の10%をゲルにロードした。同じPCR増幅の結果を示す。M:マーカー。
プライマーのアニーリングにおける特異性が増加
QIAGEN PCR Buffer中のアンモニウムイオンとカリウムイオンにより、プライマーのアニーリングにおける特異性が増加。K+ はDNA バックボーンのリン酸基(P-)に結合し、テンプレートへのプライマーアニーリングを安定化する。サーマルサイクリング条件下では、アンモニウムイオンおよびアンモニアの両方として存在するNH4+は、塩基(B)間の水素結合に相互作用するため、ミスマッチの塩基間の水素結合を不安定にする。これら2 種類の陽イオンの組み合わせ効果により、幅広い温度範囲において非特異的なプライマーテンプレート結合に対する特異的な結合の比率が高く保たれる。
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