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QIAGEN Genomic-tip 20/G
N.º de cat. / ID. 10223
25 columnas
Tipo de columna
20/G
100/G
500/G
QIAGEN Genomic-tips están concebidos para su uso en aplicaciones de biología molecular. Estos productos no están concebidos para el diagnóstico, la prevención ni el tratamiento de enfermedades.
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Características
- Cizallamiento mecánico mínimo que permite el aislamiento del ADN de alto peso molecular de hasta 150 kb
- Sin extracciones con fenol o cloroformo
- Procesamiento cómodo y en paralelo de varias muestras
Detalles del producto
Las QIAGEN Genomic-tips son puntas de intercambio aniónico de flujo por gravedad que permiten la purificación de ADN genómico procedente de una amplia gama de muestras biológicas. El ADN purificado tiene un tamaño de 150 kb, con un tamaño medio de entre 50 y 100 kb.
Rendimiento
El procedimiento con QIAGEN Genomic-tip es muy suave, por lo que genera un ADN con el mínimo cizallamiento. El ADN purificado con QIAGEN Genomic-tips tiene un tamaño de 150 kb, con un tamaño medio de entre 50 y 100 kb (consulte la figura “ADN genómico de hasta 150 kb”). El ADN no contiene ningún tipo de contaminante, como ARN, proteínas o metabolitos, y ofrece una relación A260/A280 de entre 1,7 y 1,9.
Las QIAGEN Genomic-tips se ofrecen en distintos tamaños para adaptarse a las distintas necesidades de preparación e incluyen un completo manual de uso que contiene protocolos detallados para la preparación de ADN genómico de cada tipo de muestra. El Genomic DNA Buffer Set, que se vende por separado, incluye tampones de lisis específicos para sangre, células cultivadas, levadura y bacteria, así como el resto de los tampones necesarios.
El ADN purificado se ha empleado en procesos de secuenciación de genoma bacteriano (consulte la figura “ Secuenciación directa de ADN genómico bacteriano”).
Especificaciones de las QIAGEN Genomic-tips
| Origen de la muestra | Cantidad | Levadura (µg) | ||||
| Genomic-tip 20/G | Genomic-tip 100/G | Genomic-tip 500/G | Genomic-tip 20/G | Genomic-tip 100/G | Genomic-tip 500/G | |
| Sangre total (humano) | 1 ml | 5 ml | 20 ml | 15-20 | 80-100 | 350-400 |
| Células cultivadas (HeLa) | 5 × 106 | 2 × 107 | 1 × 108 | 15-20 | 80-100 | 350-450 |
| Tejido (hígado) | 15 mg | 80 mg | 350 mg | 15-20 | 80-100 | 350-450 |
| Levadura (S. cerevisiae) | 1 ml | 5 ml | 20 ml | 18-20 | 85-95 | 350-450 |
| Bacteria gramnegativa (E. coli) | 0,6-1,2 ml | 3-6 ml | 15-30 ml | 16-20 | 85-95 | 300-400 |
| Bacteria grampositiva (B. subtilis) | 1,2-1,8 ml | 6-9 ml | 30-45 ml | 16-20 | 85-95 | 300-400 |
Principio
Las QIAGEN Genomic-tips utilizan una tecnología de intercambio aniónico exclusiva de QIAGEN para el aislamiento de ADN de alto peso molecular desde una amplia gama de muestras biológicas sin aplicar fenol ni cloroformo. Los tampones de lisis están optimizados para distintos tipos de muestras y proporcionan una desnaturalización inmediata de proteínas, como nucleasas, histonas y proteínas de unión al ADN, así como partículas víricas potencialmente infecciosas. En las condiciones de pH y baja salinidad que proporciona el tampón, el ADN se une a la resina de QIAGEN en la columna. Al mismo tiempo, otros constituyentes celulares, como proteínas, carbohidratos y metabolitos, fluyen libremente. El ADN purificado se diluye en un tampón de salinidad alta. Las puntas genómicas funcionan por efecto de la gravedad. Además, no necesitan supervisión y no se secan. Esto reduce el tiempo de manipulación al mínimo y hace que el procedimiento sea idóneo para procesar varias muestras en paralelo.
Procedimiento
En primer lugar, las muestras se lisan (se aplica disrupción mecánica a las muestras de tejido) y las proteínas se desnaturalizan simultáneamente en el tampón de lisis adecuado (consulte el gráfico de flujo “Procedimiento con las QIAGEN Genomic-tips”). A continuación, se añade QIAGEN Protease o Proteinase K y, tras un periodo de incubación adecuado, los lisados se cargan en QIAGEN Genomic-tip. El ADN se une a la columna mientras que otros constituyentes celulares fluyen libremente. A continuación, se lleva a cabo un paso de lavado para eliminar cualquier contaminante que haya quedado. Después, el ADN puro de alto peso molecular se eluye y precipita con isopropanol. El tiempo de manipulación para el procedimiento completo es de solo 20 minutos para bacterias, 30 minutos para sangre y células cultivadas, y 40 minutos para tejido y levadura.
Aplicaciones
El ADN purificado con QIAGEN Genomic-tips es idóneo para su uso en las siguientes aplicaciones:
- Secuenciación de última generación (NGS) y secuenciación de lectura larga
- Análisis de RFLP
- Análisis genético dirigido
- Cribado de animales transgénicos
- Estudios de identificación del ADN
- Southern blotting
Datos y cifras de respaldo
ADN genómico de hasta 150 kb.
Electroforesis en gel de campo pulsado (PFGE) de ADN (2 µg) purificado con QIAGEN Genomic-tips. M: marcadores.
Recursos
Protocolos desarrollados por el usuario (7)
Protocolos de inicio rápido (2)
Protocolos complementarios (1)
Documentos técnicos de instrumentos (1)
Manuales de uso de kits (1)
Hojas de datos sobre seguridad (1)
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)
Publicaciones
Similarity and differences in the Lactobacillus acidophilus group identified by polyphasic analysis and comparative genomics.
J Bacteriol; 2006; 189 (4):1311-21 2006 Dec 1 PMID:17142402
A genome-wide map of diversity in Plasmodium falciparum.
Nat Genet; 2006; 39 (1):113-9 2006 Dec 10 PMID:17159979
Development and evaluation of a loop-mediated isothermal amplification method for rapid diagnosis of Bordetella pertussis infection.
J Clin Microbiol; 2006; 44 (5):1899-902 2006 May PMID:16672435
Arsenic detoxification and evolution of trimethylarsine gas by a microbial arsenite S-adenosylmethionine methyltransferase.
Proc Natl Acad Sci U S A; 2006; 103 (7):2075-80 2006 Feb 1 PMID:16452170
Validation of a 21-locus autosomal SNP multiplex for forensic identification purposes.
Forensic Sci Int; 2005; 154 (1):62-77 2005 Jan 20 PMID:16182950
Preguntas frecuentes
What is the size of genomic DNA that is obtained with QIAGEN Genomic-tips?
Do you have a protocol for the purification of DNA from fruit flies?
What do you recommend for the cleanup of genomic DNA (gDNA)?
Do you have a protocol for the isolation of genomic DNA from frozen clotted blood?
Do you have a protocol for isolation of genomic and viral DNA from lymphocytes using QIAGEN Genomic-tips?
Do you have a protocol for isolation of genomic and plasmid DNA from cell cultures using QIAGEN Genomic-tips?
Do you have a protocol for isolation of genomic DNA from flies using QIAGEN Genomic-tips?
Do you have a protocol for isolation of genomic DNA from insects?
Do you have a protocol for isolation of genomic DNA from plants and filamentous fungi using QIAGEN Genomic-tips?
Do you have protocols for the isolation of genomic DNA from tissue using QIAGEN-tips 2500 (Mega) and 10000 (Giga)?
Do you have a protocol for the isolation of genomic DNA from fungi?