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QIAamp DSP DNA Blood Mini kit

Pour la purification d'ADN génomique à partir de sang total humain dans le cadre du diagnostic in vitro
  • Système universel de purification de l’ADN compatible avec d’autres produits IVD
  • Prélèvement flexible des échantillons (1)
  • Compatible avec différents anticoagulants et tubes
  • Choix entre protocole de centrifugation et protocole sous vide (1)


Le kit QIAamp DSP DNA Blood Mini permet de purifier les ADN par membrane de silice. Le kit QIAamp DSP DNA Blood Mini est conçu pour les laboratoires traitant le sang dans le cadre du diagnostic in vitro.

Cat No./ID: 61104
QIAamp DSP DNA Blood Mini Kit
203,00 €
Order Product
Pour 50 préparations : colonnes QIAamp Mini Spin, tampons, réactifs, tubes, VacConnectors

Le QIAamp DSP DNA Blood Mini kit est destiné à un usage de diagnostic in vitro.


Le site web n’est pas disponible en français dans son intégralité. Son contenu est international et peut aller à l’encontre des règlementations locales.
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ADN provenant de sang congelé et décongelé.

Les échantillons de sang traités à l’EDTA ont été congelés et décongelés 3 fois maximum. L’ADN a été purifié à la fin de chaque cycle de congélation/décongélation. L’ADN a été purifié à partir d’échantillons de 200 μl de sang à l’aide du kit QIAamp DSP DNA Blood Mini et élué dans 200 µl de tampon d’élution. Les rendements d’ADN ont été normalisés par rapport au rendement d’échantillons frais (100 %). Chaque barre représente les résultats de 32 réplicats (moyenne ± écart-type).

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Procédure du kit QIAamp DSP DNA Blood Mini.

L’ADN génomique est purifié à l’aide d’une procédure de centrifugation (avec centrifugeuse) ou une procédure d’aspiration sous vide (avec un collecteur de vide et une centrifugation).

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Déroulement des opérations pour le kit QIAamp DSP DNA Blood Mini.

Le système universel de purification de l’ADN s’adapte facilement au déroulement des opérations du diagnostic.

Performance

L’ADN génomique purifié à l’aide du kit QIAamp DSP DNA Blood Mini est prêt à être utilisé dans des applications en aval telles que celles reposant sur l’amplification enzymatique ou d’autres modifications telles que la PCR.

Les échantillons de sang total peuvent être prélevés à l’aide de plusieurs types de tubes contenant de l’anticoagulant (EDTA ou citrate), y compris les tubes BD Vacutainer, Monovette et Vacuette (voir tableau). Les échantillons de sang peuvent être congelés et décongelés au moins 3 fois et rester une source fiable pour la purification de l’ADN (voir figure « ADN provenant de sang congelé et décongelé »).

Prélèvement sanguin à l’aide de différents tubes
Tube primaire Fabricant Référence Volume nominal Rendement moyen à partir de 200 µl
BD Vacutainer 9NC BD 366007    9 ml 6,4 µg
BD Vacutainer K3E BD 368457  10 ml 6,6 µg
BD Vacutainer K2E BD 367864    6 ml 6,4 µg
S-Monovette EDTA Sarstedt 02.1066.001    9 ml 6,5 µg
S-Monovette CPDA1 Sarstedt 01.1610.001 8,5 ml 6,3 µg
Vacuette K3E Greiner Bio-One 455036    9 ml 6,5 µg
Vacuette 9NC Greiner Bio-One 454382    2 ml 6,3 µg
Pour chaque type de tube primaire, le sang a été prélevé sur 11 donneurs. Pour chaque donneur, l’ADN a été purifié à partir d’échantillons de 200 μl de sang en triple à l’aide du kit QIAamp DSP DNA Blood Mini et élué dans 200 µl de tampon d’élution. Le tableau indique le rendement d’ADN moyen dans 33 procédures de purification.

Principle

Le kit QIAamp DSP DNA Blood Mini utilise la technologie QIAamp pour la purification de l’ADN génomique. La membrane de silice de QIAamp lie spécifiquement l’ADN dans l’échantillon lysé, tandis que le reste du lysat est rapidement retiré par centrifugation ou aspiration sous vide. L’ADN lié est lavé de manière efficace afin d’éliminer les contaminants puis élué dans un volume de 50 à 200 µl.

Procedure

L’ADN génomique est purifié à partir du sang grâce à l’une des deux procédures alternatives, à savoir une centrifugation ou une chambre à vide et une centrifugation (voir schéma « Procédure »). Le système universel de purification d’ADN permet la compatibilité avec d’autres produits de diagnostic in vitro (voir « Déroulement des opérations »).

L’échantillon de sang contenant l’EDTA ou le citrate (200 µl) est lysé en présence de la protéase QIAGEN et du tampon de lyse à 56 °C pendant 10 minutes. L’éthanol est ensuite ajouté au lysat pour optimiser la liaison de l’ADN à la membrane QIAamp. Le lysat est appliqué sur une colonne de centrifugation QIAamp Mini puis il est passé à la centrifugeuse ou soumis à une pression sous vide. L’ADN se lie à la membrane QIAamp dans la colonne de centrifugation et le reste du lysat passe à travers. L’ADN lié est lavé de manière efficace par deux tampons de lavage différents qui traversent aussi la membrane QIAamp par centrifugation ou pression sous vide. La membrane QIAamp est ensuite séchée par centrifugation. Le tampon d’élution (50 à 200 µl) est appliqué à la membrane QIAamp et, après une minute d’incubation, la colonne de centrifugation est centrifugée pour éluer l’ADN pur.

La purification de l’ADN à l’aide du kit QIAamp DSP DNA Blood Mini peut être entièrement automatisée sur le QIAcube. En cas d’automatisation du kit QIAamp DSP DNA Blood Mini sur l’instrument QIAcube, l’instrument peut traiter moins de 50 échantillons en raison des volumes morts, de l’évaporation et de la consommation supplémentaire de réactif par pipetage automatisé. QIAGEN ne garantit que 50 préparations d’échantillons en cas d’utilisation manuelle du kit QIAamp DSP DNA Blood Mini.

Applications

Le kit QIAamp DSP DNA Blood Mini utilise la technologie QIAamp pour une purification de l’ADN à partir de sang total frais ou congelé et de sang traité au citrate ou à l’EDTA.

Features
Specifications
Applications PCR, qPCR, RT-PCR en temps réel, microarrays
CE/FDA/IVD compatible CE-IVD
Elution volume 50–200 µl
Format Colonnes de centrifugation
Main sample type Sang total
Processing Manuelle (par centrifugation ou aspiration sous vide)
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein ADN génomique
Sample amount 200 µl
Technology Technologie de silice
Time per run or per prep 20 minutes
Yield 6.3–6.5 µg
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