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therascreen MGMT Pyro Kit

Pour la mesure quantitative de l’état de méthylation de l’exon 1 du gène MGMT humain
  • Conforme à la directive européenne IVD 98/79/CE
  • Détection quantitative de la méthylation
  • Résultats en temps réel
  • Analyse post-test complète
Le kit therascreen MGMT Pyro est utilisé pour la mesure quantitative de la méthylation de quatre sites CpG de l’exon 1 du gène MGMT humain. Le kit contient les amorces et les réactifs pour l’amplification des gènes, plus les tampons, amorces et réactifs pour la détection quantitative de la méthylation en temps réel à l’aide de la technologie Pyrosequencing (Pyroséquençage) sur le système PyroMark Q24. (1)
Cat No./ID: 971061
therascreen MGMT Pyro Kit (48)
Pour 48 réactions : amorces Séq, amorces de PCR, ADN de contrôle méthylé, Master Mix PCR PyroMark, CoralLoad concentré, tampons et réactifs

Le therascreen MGMT Pyro Kit est destiné à un usage de diagnostic in vitro.


Le site web n’est pas disponible en français dans son intégralité. Son contenu est international et peut aller à l’encontre des règlementations locales.
Principle
Le kit therascreen MGMT Pyro est utilisé pour la mesure quantitative de la méthylation dans quatre sites CpG de l’exon 1 du gène MGMT humain (séquence génomique sur le chromosome 10 de 131 265 519 à 131 265 537 : CGACGCCCGCAGGTCCTCG). Le gène MGMT (O(6)-méthylguanine-ADN-méthyltransférase) encode une enzyme qui facilite la réparation de l’ADN alkylé en supprimant les groupes alkyles de la position O6 de la guanine. La méthylation du gène MGMT est associée à une diminution de l’expression génétique et de l’activité de réparation de l’ADN. La méthylation du MGMT est comprise entre 25 et 50 % pour de nombreux cancers comme le cancer du cerveau, du colon, du poumon et du sein. (1)
Procedure
L’ADN génomique converti par traitement au bisulfite est amplifié par PCR et séquencé dans la région définie (voir figure « Illustration du test therascreen MGMT »). Les séquences entourant les positions définies servent de valeurs de normalisation et pics de référence pour l’évaluation quantitative et qualitative de l’analyse. Après la PCR à l’aide des amorces ciblant la région définie de l’exon 1, les amplicons sont immobilisés sur des billes de sépharose recouvertes de streptavidine (Streptavidin Sepharose High Performance). L’ADN simple brin est préparé et les amorces de séquence s’hybrident avec l’ADN. Les échantillons sont ensuite analysés sur le système PyroMark Q24. (1)
Applications
Le kit therascreen MGMT Pyro permet une mesure quantitative de la méthylation dans quatre sites CpG de l’exon 1 du gène MGMT humain (voir figures « Tracé de pyrogramme obtenu après analyse d’ADN non méthylé converti au bisulfite, provenant d’un échantillon de glioblastome humain », « Tracé de pyrogramme obtenu après analyse d’ADN méthylé converti au bisulfite, provenant d’un échantillon de glioblastome humain » et « Tracé de pyrogramme obtenu après analyse d’ADN de contrôle fortement méthylé converti au bisulfite ») et peut être utilisé dans plusieurs domaines d’applications cliniques, comme l’évaluation diagnostique, la recherche clinique et les tests pharmaceutiques ou biopharmaceutiques. (1)
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