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Kit therascreen KRAS RGQ PCR

pour la détection de 7 mutations somatiques de l’oncogène KRAS.

  • Respect de la directive européenne IVD 98/79/CE
  • Test sensible et robuste pouvant détecter de faibles niveaux d’ADN mutant
  • Système prêt à l’emploi et procédure simple
  • Sélectivité et sensibilité élevées grâce aux technologies de PCR ARMS et Scorpions
Le kit therascreen BRAF RGQ PCR est un kit de diagnostic moléculaire destiné à la détection de 7 mutations somatiques du gène KRAS en PCR en temps réel, sur l’instrument Rotor-Gene Q 5plex HRM. Ce kit inclut tous les réactifs nécessaires, optimisés pour la détection rapide et sensible d’un faible pourcentage d’ADN mutant dans un bruit de fond d’ADN génomique de type sauvage. La technologie de PCR ARMS (système de mutation réfractaire par amplification) combinée à la technologie de détection Scorpions permettent des niveaux de sensibilité et de spécificité exceptionnels pour la détection de mutations spécifiques.
Cat No./ID: 874011
therascreen KRAS RGQ PCR Kit (24) CE
For 24 reactions: 1 Control Assay, 7 Mutation Assays, Positive Control, and Taq DNA Polymerase
Cat No./ID: 9023675
therascreen KRAS Assay Package CD
Package de protocole logiciel destiné à une utilisation avec le kit therascreen KRAS RGQ PCR et l'instrument Rotor-Gene Q 5plex HRM ou MDx de QIAGEN avec un rotor à 72 puits

Le Kit therascreen KRAS RGQ PCR est destiné à un usage de diagnostic in vitro.


Le site web n’est pas disponible en français dans son intégralité. Son contenu est international et peut aller à l’encontre des règlementations locales.
Principle

Le kit therascreen KRAS RGQ PCR est conçu pour détecter 7 mutations dans les codons 12 et 13 du gène KRAS. Le gène KRAS encode une protéine qui joue un rôle essentiel dans la cascade de signaux EGFR. Les mutations du gène KRAS peuvent affecter la manière dont les protéines stimulent ces voies en aval. Le gène KRAS est muté dans près de 30 % de l’ensemble des types de cancer. Parmi les cancers qui présentent une haute fréquence de la mutation du gène KRAS se trouvent le cancer colorectal (35 %) et le cancer du poumon (18 %).

Les mutations du gène KRAS détectées par le kit therascreen KRAS RGQ PCR incluent les suivantes :

12ALA
12ASP
12ARG
12CYS
12SER
12VAL
13 ASP

Le kit utilise deux technologies, ARMS (système de mutation réfractaire par amplification) et Scorpions, pour détecter les mutations en PCR en temps réel.

ARMS

L’amplification spécifique d’allèle ou de mutation s’effectue par le biais du système ARMS. La Taq ADN polymérase permet d’établir une distinction efficace entre un appariement et un mésappariement à l’extrémité 3' d’une amorce de PCR. Des séquences aux mutations spécifiques sont sélectionnées pour être amplifiées, même dans des échantillons où la majorité des séquences ne porte pas la mutation. Lorsque l’amorce est entièrement appariée, l’efficacité de l’amplification est maximale. Lorsque la base 3' est mésappariée, seule une amplification de faible bruit de fond se produit.

Scorpions

La détection de l’amplification s’effectue par le biais de la technologie Scorpions. Les Scorpions sont des molécules bi-fonctionnelles contenant une amorce de PCR qui comporte une liaison covalente avec une sonde. Le fluorophore de cette sonde interagit avec un quencher, lui aussi intégré à la sonde, qui diminue la fluorescence. Au cours d’une PCR, lorsque la sonde s’hybride à l’amplicon, le fluorophore et le quencher se séparent. La fluorescence du tube de réaction augmente.

Procedure

Le kit therascreen KRAS RGQ PCR fonctionne selon une procédure à deux étapes. La première étape consiste à effectuer un test de contrôle pour évaluer l’ADN total présent dans un échantillon. La seconde consiste à effectuer le test de mutation pour détecter la présence ou non d’ADN ayant subi une mutation.

Applications

Le kit therascreen KRAS RGQ PCR est conçu pour détecter 7 mutations dans les codons 12 et 13 du gène KRAS. Des études prouvent que le test de la mutation de KRAS est plus à même de déterminer quels patients atteints du cancer colorectal métastatique peuvent bénéficier d’un traitement avec récepteur de facteur de croissance épidermique (EGFR) qui inhibe les anticorps monoclonaux, tel que le panitumumab ou le cétuximab.

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Kit Handbooks (2)
For use with therascreen KRAS RGQ PCR Kit with catalog no. 874011 only. Please check your kit box label.
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Important Note for use with therascreen KRAS RGQ PCR Kit with catalog no. 874011 only. Please check your kit box label.


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Supplementary Protocols (1)
Software assay package for use with the therascreen KRAS RGQ PCR Kit and Rotor-Gene Q 5plex HRM or Rotor-Gene Q MDx 5plex HRM in combination with Rotor-Gene Q Software version 2.3 and 72-well rotor.
Installation of the therascreen KRAS Assay Package is described in the therascreen KRAS RGQ PCR Kit Handbook.  
Note: Previous versions of the assay package, including the version listed in the current kit handbook, are not compatible with Rotor-Gene Q Software version 2.3. If your Rotor-Gene Q 5plex HRM or Rotor-Gene Q MDx 5plex HRM has an earlier software version installed, you can upgrade to Rotor-Gene Q Software version 2.3 by downloading the software from the Rotor-Gene Q or Rotor-Gene Q MDx product webpages.

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