QuickLyse Miniprep Kit pour l’extraction de l’ADN plasmidique

Pour la purification rapide d’un maximum de 15 µg de plasmide de qualité de séquençage

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✓ Traitement automatique des commandes en ligne 24 h/24 7 j/7

✓ Assistance technique et produits pertinente et professionnelle

✓ Commande (ou réapprovisionnement) rapide et fiable

QuickLyse Miniprep Kit (250)

N° de réf. / ID.   27406

250 QuickLyse Spin Columns, réactifs, tampons, Lysis and Collection Tubes (2 ml)
Le QuickLyse Miniprep Kit est destiné aux applications de biologie moléculaire. Ce produit n’est pas conçu pour le diagnostic, la prévention ou le traitement des maladies.

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Caractéristiques

  • Procédure de lyse rapide en une étape
  • Diminution des étapes du protocole et du temps de manipulation
  • Rendements d’ADN de 15 µg maximum à partir de volumes de culture de 1,5
  • ADN plasmidique prêt à l’emploi en seulement 9 minutes

Détails produit

Le QuickLyse Miniprep Kit fournit une méthode rapide avec colonnes de centrifugation pour isoler l’ADN plasmidique de qualité de séquençage. La remise en suspension des cellules bactériennes, la lyse et la liaison de l’ADN sont réalisées dans un seul tampon, ce qui permet une purification rapide de l’ADN avec un temps de manipulation minime.

Performances

Le QIAGEN QuickLyse Miniprep Kit emploie une technologie de lyse en une étape pour une préparation ultrarapide d’un maximum de 15 µg d’ADN plasmidique. La qualité de l’ADN garantit des performances robustes dans les applications, telles que le séquençage, les analyses de restriction et le clonage (voir la figure «  Rendements reproductibles »).

Le QuickLyse Miniprep Kit produit suffisamment d’ADN plasmidique pour toute application en aval, y compris le séquençage (voir la figure «  Grandes longueurs de lecture dans le séquençage automatisé »). Un maximum de 15 µg d’ADN plasmidique à nombre de copies élevé peut être obtenu à partir d’une culture bactérienne de 1,5 ml (voir la figure «  Hauts rendements d’ADN plasmidique de haute qualité »). L’ADN plasmidique isolé possède des rapports OD260/280 de 1,7 à 1,9, ce qui indique que la qualité et la pureté conviennent à toutes les applications sensibles. Des longueurs de lecture de séquençage de plus de 700 bases sont facilement obtenues.

Principe

Contrairement à la plupart des protocoles qui utilisent une procédure de lyse en trois étapes, le QuickLyse Miniprep Kit associe des procédés enzymatiques et osmotiques afin de lyser les cellules bactériennes en une seule étape de trois minutes. De plus, la technologie QuickLyse utilise moins de tampons, ce qui simplifie la manipulation et permet de gagner du temps : 24 minipréparations d’ADN plasmidique peuvent être préparées en moins de 22 minutes.

Procédure

Les cellules bactériennes sont remises en suspension et lysées, et l’ADN se lie dans un seul tampon, ce qui permet une purification rapide de l’ADN avec un temps de manipulation minime. Après une étape de lyse de trois minutes, le lysat nettoyé est directement appliqué à une QuickLyse Spin Column. L’ADN plasmidique se lie à la membrane de colonne et est élué après une seule étape de lavage (voir le schéma «  Procédure QuickLyse »). L’ADN isolé peut être utilisé directement dans les applications standard, y compris le séquençage automatisé, la PCR, l’analyse de restriction et le clonage.

Applications

Le QuickLyse Miniprep Kit produit suffisamment d’ADN plasmidique pour toute application en aval, y compris le séquençage automatisé.

Données et illustrations utiles

Spécifications

CaractéristiquesSpécifications
ApplicationsSéquençage automatisé, PCR, analyse de restriction, clonage, etc.
Time per run or prep per run9 min
Culture volume/starting materialVolume de culture de 1,5 ml
Plasmid typeADN plasmidique à nombre de copies élevé
Elution volume50 µl
Samples per run (throughput)1 à 24 échantillons par cycle d’exécution
TechnologyTechnologie QuickLyse
Yieldjusqu’à 15 µg
ProcessingManuel (centrifugation)

Ressources

Manuels de kit (1)
For purification of sequencing grade plasmid DNA
Fiches de données de sécurité (1)
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)

FAQ

Can the bacterial pellet in the QuickLyse Miniprep procedure be resuspended by pipetting up and down or shortening the vortexing time?

No. Vortexing for 30 seconds as described in the QuickLyse Miniprep Handbook is absolutely critical to resuspend and lyse the bacterial cells. Failure to follow this step will result in greatly reduced DNA yields.

 

FAQ-1352
How can I increase the DNA yield from low-copy plasmids using the QuickLyse Miniprep Kit?

When using the QuickLyse Miniprep Kit, the addition of 125 µl isopropanol to the lysate, prior to transferring it to the QuickLyse Spin Column, may increase plasmid DNA yield in some cases.

 

FAQ-1354
Is it possible to elute plasmid DNA obtained with the QuickLyse Miniprep Kit in nuclease-free water?

Yes, nuclease-free water may be used for the elution of plasmid DNA purified with the QuickLyse Miniprep Kit. However, for higher DNA stability and optimal yields, it is recommend to elute using the provided elution buffer (Buffer QLE).

 

FAQ-1355
What is the composition of elution buffer QLE in the QuickLyse Miniprep Kit?

Elution Buffer QLE of the QuickLyse Miniprep Kit contains 10 mM Tris-Cl and 0.1 mM EDTA (pH 8.5). Due to the very low concentration of EDTA, enzymatic downstream reactions such as PCR and cycle sequencing are not inhibited.

 

FAQ-1356
What volume of bacterial culture can be processed using the QuickLyse Miniprep Kit?

Normally, 1.5 ml bacterial culture is used with the QuickLyse Miniprep Kit. Only if the OD600 is < 2.0, up to 3 ml culture may be used. Growth in LB medium is strongly recommended. Growth in nutrient-rich media, such as 2xYT, is not recommended.

 

FAQ-1357
What is the largest plasmid size that can be purified using the QuickLyse Miniprep Kit?

The QuickLyse Miniprep Kit can be used for plasmids up to 9 kb in size. It is not recommended for Large-Construct purifications.

Please find an overview of additional kit options for small-scale Plasmid Purification on the QIAGEN website, or use our ProductFinder to select the right kit for your needs.

 

 

FAQ-1752
3311 - Can QuickLyse miniprep kits be used with QIAVac 24 Plus?
No, this is not possible since the columns do not fit properly on the QIAVac 24 Plus manifold and the vacuum is not strong enough.
FAQ-3311