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QIAGEN Genomic-tip 20/G
N° de réf. / ID. 10223
25 colonnes
Type de colonne
20/G
100/G
500/G
Les QIAGEN Genomic-tips sont destinés aux applications de biologie moléculaire. Ces produits ne sont pas conçus pour le diagnostic, la prévention ou le traitement des maladies.
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Caractéristiques
- Un cisaillement mécanique minimal permet un isolement d’ADN de poids moléculaire élevé d’une taille pouvant atteindre 150 kb
- Pas d’extraction au phénol ou au chloroforme
- Traitement pratique en parallèle de plusieurs échantillons
Détails produit
Les QIAGEN Genomic-tips sont des embouts échangeurs d’anions qui fournissent un écoulement par gravité pour une purification efficace de l’ADN génomique pour une large gamme d’échantillons biologiques. La taille de l’ADN purifié peut monter jusqu’à 150 kb, avec une taille moyenne de 50 à 100 kb
Performances
La procédure QIAGEN Genomic-tip est très délicate, et le cisaillement de l’ADN qui en résulte est négligeable. La taille de l’ADN purifié avec les QIAGEN Genomic-tips peut monter jusqu’à 150 kb avec une longueur moyenne de 50 à 100 kb (voir la figure « ADN génomique jusqu’à 150 kb »). L’ADN ne présente aucun contaminant tel que de l’ARN, des protéines ou des métabolites, et possède des ratios A260/A280 entre 1,7 et 1,9.
Les QIAGEN Genomic-tips sont disponibles en différentes tailles afin de remplir les exigences spécifiques de toute préparation et sont accompagnés d’un manuel complet contenant les protocoles détaillés de la préparation d’ADN génomique à partir de chaque type d’échantillon. Des tampons de lyse spécifiques pour le sang, les tissus, les cellules de culture, les levures et les bactéries ainsi que tous les autres tampons nécessaires sont fournis dans le Genomic DNA Buffer Set vendu séparément.
L’ADN purifié a été utilisé dans le séquençage direct de génome bactérien (voir la figure « Séquençage direct d’ADN génomique bactérien »).
Caractéristiques du QIAGEN Genomic-tip
| Source d’échantillon | Quantité | Rendement (µg) | ||||
| Genomic-tip 20/G | Genomic-tip 100/G | Genomic-tip 500/G | Genomic-tip 20/G | Genomic-tip 100/G | Genomic-tip 500/G | |
| Sang total (humain) | 1 ml | 5 ml | 20 ml | 15 à 20 | 80 à 100 | 350 à 400 |
| Cellules de culture (HeLa) | 5 x 106 | 2 x 107 | 1 x 108 | 15 à 20 | 80 à 100 | 350 à 450 |
| Tissus (foie) | 15 mg | 80 mg | 350 mg | 15 à 20 | 80 à 100 | 350 à 450 |
| Levures (S. cerevisiae) | 1 ml | 5 ml | 20 ml | 18 à 20 | 85 à 95 | 350 à 450 |
| Bactérie à Gram négatif (E. coli) | 0,6 à 1,2 ml | 3 à 6 ml | 15 à 30 ml | 16 à 20 | 85 à 95 | 300 à 400 |
| Bactérie à Gram positif (B. subtilis) | 1,2 à 1,8 ml | 6 à 9 ml | 30 à 45 ml | 16 à 20 | 85 à 95 | 300 à 400 |
Principe
Les QIAGEN Genomic-tips utilisent la technologie unique d’échange d’anions de QIAGEN pour isoler l’ADN de poids moléculaire élevé à partir d’une grande variété d’échantillons biologiques sans nécessiter de phénol ou de chloroforme. Les tampons de lyse sont optimisés pour différents types d’échantillons et assurent une dénaturation immédiate des protéines, telles que les nucléases, les histones et les protéines de liaison à l’ADN ainsi que des particules virales potentiellement infectieuses. Grâce au pH et aux conditions de faible salinité garantis par le tampon, l’ADN se lie à la résine QIAGEN dans la colonne. Dans le même temps, d’autres composants cellulaires, tels que les protéines, les glucides et les métabolites s’écoulent. L’ADN purifié est élué dans un tampon à haute salinité. Les Genomic-tips fonctionnent par écoulement par gravité et peuvent donc être laissés sans surveillance sans qu’ils ne s’assèchent. Cela réduit au minimum la durée de manipulation et rend la procédure idéale pour un traitement simultané de plusieurs échantillons.
Procédure
Les échantillons sont d’abord lysés (les échantillons de tissus sont mécaniquement désagrégés) et les protéines simultanément dénaturées dans le tampon de lyse approprié (voir le schéma « Procédure QIAGEN Genomic-tip »). La QIAGEN Protease ou Proteinase K est ensuite ajoutée et, après un temps d’incubation approprié, les lysats sont chargés sur le QIAGEN Genomic-tip. L’ADN se lie à la colonne pendant que les autres composants cellulaires s’écoulent. À la suite d’une étape de lavage pour éliminer tout contaminant résiduel, l’ADN pur de poids moléculaire élevé est élué et précipité avec de l’isopropanol. La durée complète de manipulation pour la procédure est de seulement 20 minutes pour les bactéries, 30 minutes pour le sang et les cellules de culture, et 40 minutes pour les tissus et les levures.
Applications
L’ADN purifié à l’aide des QIAGEN Genomic-tips est adapté pour les applications suivantes :
- Séquençage à haut débit et séquençage à lecture longue
- Analyse par RFLP
- Analyse de ciblage de gène
- Criblage d’animaux transgéniques
- Études de profilage génétique
- Transfert de Southern
Données et illustrations utiles
ADN génomique jusqu’à 150 kb.
Électrophorèse sur gel en champ pulsé d’ADN (2 µg) purifié à l’aide des QIAGEN Genomic-tips. M : marqueurs.
Ressources
Protocoles élaborés par l’utilisateur (7)
Protocoles de démarrage rapide (2)
Protocoles complémentaires (1)
Documents techniques sur les instruments (1)
Manuels de kit (1)
Fiches de données de sécurité (1)
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)
Publications
Similarity and differences in the Lactobacillus acidophilus group identified by polyphasic analysis and comparative genomics.
J Bacteriol; 2006; 189 (4):1311-21 2006 Dec 1 PMID:17142402
A genome-wide map of diversity in Plasmodium falciparum.
Nat Genet; 2006; 39 (1):113-9 2006 Dec 10 PMID:17159979
Development and evaluation of a loop-mediated isothermal amplification method for rapid diagnosis of Bordetella pertussis infection.
J Clin Microbiol; 2006; 44 (5):1899-902 2006 May PMID:16672435
Arsenic detoxification and evolution of trimethylarsine gas by a microbial arsenite S-adenosylmethionine methyltransferase.
Proc Natl Acad Sci U S A; 2006; 103 (7):2075-80 2006 Feb 1 PMID:16452170
Validation of a 21-locus autosomal SNP multiplex for forensic identification purposes.
Forensic Sci Int; 2005; 154 (1):62-77 2005 Jan 20 PMID:16182950
FAQ
What is the size of genomic DNA that is obtained with QIAGEN Genomic-tips?
Do you have a protocol for the purification of DNA from fruit flies?
What do you recommend for the cleanup of genomic DNA (gDNA)?
Do you have a protocol for the isolation of genomic DNA from frozen clotted blood?
Do you have a protocol for isolation of genomic and viral DNA from lymphocytes using QIAGEN Genomic-tips?
Do you have a protocol for isolation of genomic and plasmid DNA from cell cultures using QIAGEN Genomic-tips?
Do you have a protocol for isolation of genomic DNA from flies using QIAGEN Genomic-tips?
Do you have a protocol for isolation of genomic DNA from insects?
Do you have a protocol for isolation of genomic DNA from plants and filamentous fungi using QIAGEN Genomic-tips?
Do you have protocols for the isolation of genomic DNA from tissue using QIAGEN-tips 2500 (Mega) and 10000 (Giga)?
Do you have a protocol for the isolation of genomic DNA from fungi?