Blood & Cell Culture DNA Kits

Pour un isolement jusqu’à 20 µg, 100 µg ou 500 µg d’ADN de poids moléculaire élevé à partir de sang et de cellules de culture

✓ Traitement automatique des commandes en ligne 24 h/24 7 j/7

✓ Assistance technique et produits pertinente et professionnelle

✓ Commande (ou réapprovisionnement) rapide et fiable

Blood & Cell Culture DNA Mini Kit (25)

N° de réf. / ID. 13323

25 QIAGEN Genomic-tip 20/G, QIAGEN Protease, tampons

KitTampon

Blood & Cell Culture DNA Kit

Genomic DNA Buffer Set

Type de colonne

20/G

100/G

500/G

Sur demande

Les Blood & Cell Culture DNA Kits sont destinés aux applications de biologie moléculaire. Ces produits ne sont pas conçus pour le diagnostic, la prévention ou le traitement des maladies.

✓ Traitement automatique des commandes en ligne 24 h/24 7 j/7

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✓ Commande (ou réapprovisionnement) rapide et fiable

Caractéristiques

Isolement fiable d’ADN de poids moléculaire élevé jusqu’à 150 kb en taille
Pas d’extraction au phénol ou au chloroforme
Traitement pratique en parallèle de plusieurs échantillons

Détails produit

Les Blood & Cell Culture DNA Kits fournissent un écoulement par gravité, des embouts et des tampons échangeurs d’anions pour un isolement efficace de l’ADN génomique pour une large gamme d’échantillons biologiques. La taille de l’ADN purifié peut monter jusqu’à 150 kb, avec une taille moyenne de 50 à 100 kb.

L’achat du Genomic DNA Buffer Set (n° de réf. 19060) est requis pour les échantillons de levures et de bactéries.

Performances

La procédure QIAGEN Genomic-tip est très délicate, et le cisaillement de l’ADN qui en résulte est négligeable. La taille de l’ADN purifié avec les QIAGEN Genomic-tips peut monter jusqu’à 150 kb avec une longueur moyenne de 50 à 100 kb (voir la figure « ADN génomique jusqu’à 150 kb »). L’ADN ne présente aucun contaminant tel que de l’ARN, des protéines ou des métabolites, et possède des ratios A₂₆₀/A₂₈₀ entre 1,7 et 1,9.

La taille exceptionnelle de l’ADN obtenu le rend particulièrement adapté à la préparation de bibliothèques de haute qualité pour le séquençage à haut débit (NGS) sur d’autres plateformes et est recommandée par plusieurs installations centrales.

Principe

Les QIAGEN Genomic-tips, inclus dans les Blood & Cell Culture DNA Kits, utilisent technologie unique d’échange d’anions de QIAGEN pour purifier l’ADN de poids moléculaire élevé à partir d’une grande variété d’échantillons biologiques sans nécessiter de phénol ou de chloroforme. Les tampons de lyse sont optimisés pour différents types d’échantillons et assurent une dénaturation immédiate des protéines, telles que les nucléases, les histones et les protéines de liaison à l’ADN ainsi que des particules virales potentiellement infectieuses. Grâce au pH et aux conditions de faible salinité garantis par le tampon, l’ADN se lie à la résine QIAGEN dans la colonne. Dans le même temps, d’autres composants cellulaires, tels que les protéines, les glucides et les métabolites s’écoulent. L’ADN purifié est élué dans un tampon à haute salinité. Les Genomic-tips fonctionnent par écoulement par gravité et peuvent donc être laissés sans surveillance sans qu’ils ne s’assèchent. Cela réduit au minimum la durée de manipulation et rend la procédure idéale pour un traitement simultané de plusieurs échantillons.

Procédure

Les échantillons sont d’abord lysés (les échantillons de tissus sont mécaniquement désagrégés) et les protéines simultanément dénaturées dans le tampon de lyse approprié (voir le schéma « Procédure QIAGEN Genomic-tip »). La QIAGEN Protease ou Proteinase K est ensuite ajoutée et, après un temps d’incubation approprié, les lysats sont chargés sur le QIAGEN Genomic-tip. L’ADN se lie à la colonne pendant que les autres composants cellulaires s’écoulent. À la suite d’une étape de lavage pour éliminer tout contaminant résiduel, l’ADN pur de poids moléculaire élevé est élué et précipité avec de l’isopropanol. La durée complète de manipulation pour la procédure est de seulement 30 minutes pour le sang et les cellules de culture.

Les Blood & Cell Culture DNA Kits sont des kits prêts à l’emploi contenant tous les composants nécessaires pour la purification d’ADN de poids moléculaire élevé à partir de sang et de cellules de culture.

Applications

L’ADN purifié à l’aide des Blood & Cell Culture DNA Kits est adapté pour les applications suivantes :

Séquençage Sanger et séquençage à haut débit
Séquençage à lecture longue
Analyse par RFLP
Analyse de ciblage de gène
Criblage d’animaux transgéniques
Études de profilage génétique
Amplification par PCR

Fonctionnalités	Blood & Cell Culture DNA Mini Kit	Blood & Cell Culture DNA Midi Kit	Blood & Cell Culture DNA Maxi Kit
Applications	PCR, RFLP, transfert, dépistage	PCR, RFLP, transfert, dépistage	PCR, RFLP, transfert, dépistage
Volume d’élution	0,1 à 2 ml	0,1 à 2 ml	0,1 à 2 ml
Format	Genomic-tip	Genomic-tip	Genomic-tip
Type d’échantillon principal	Sang, cellules	Sang, cellules	Sang, cellules
Traitement	Manuel	Manuel	Manuel
Purification de l’ARN total, du miARN, de l’ARNm poly A+, de l’ADN ou des protéines	ADN	ADN	ADN
Quantité d’échantillon	1 ml/5 x 10⁶	5 ml/2 x 10⁷	20 ml/1 x 10⁸
Technologie	Technologie d’échange d’anions	Technologie d’échange d’anions	Technologie d’échange d’anions
Rendement	15 à 20 µg	80 à 100 µg	350 à 400 µg

Données et illustrations utiles

ADN génomique jusqu’à 150 kb.

Électrophorèse sur gel en champ pulsé d’ADN (2 µg) purifié à l’aide des QIAGEN Genomic-tips. M : marqueurs.

Ressources

Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.

Publications

Lack of telomerase RNA gene hTERC expression in alternative lengthening of telomeres cells is associated with methylation of the hTERC promoter.

Hoare SF; Bryce LA; Wisman GB; Burns S; Going JJ; van der Zee AG; Keith WN;

Cancer Res; 2001; 61 (1):27-32 2001 Jan 1 PMID:11196173

GATA-3 is an important transcription factor for regulating human NKG2A gene expression.

Marusina AI; Kim DK; Lieto LD; Borrego F; Coligan JE;

J Immunol; 2005; 174 (4):2152-9 2005 Feb 15 PMID:15699146

FAQ

Always dispose of potentially biohazardous solutions according to your institution’s waste-disposal guidelines. Although the lysis and binding buffers in QIAamp, DNeasy, and RNeasy kits contain chaotropic agents that can inactivate some biohazardous material, local regulations dictate the proper way to dispose of biohazards. DO NOT add bleach or acidic solutions directly to the sample-preparation waste. Guanidine hydrochloride in the sample-preparation waste can form highly reactive compounds when combined with bleach.
Please access our Material Safety Data Sheets (MSDS) online for detailed information on the reagents for each respective kit.

FAQ-12

Bisulfite conversion of unmethylated cytosines into uracils with the EpiTect Bisulfite Kit works on DNA irrespective of the source organism. The DNA template needs to be of high purity for efficient conversion. We recommend to use genomic DNA extracted with our DNA isolation kits for clinical or animal and plant samples as a template for the EpiTect Bisulfite Kit.

FAQ-1209

Genomic DNA purified using QIAGEN Genomic-tips ranges in size from 20–150 kb, with an average length of 50–100 kb. Vortexing the lysate for about 20 seconds may reduce the size of the genomic DNA slightly to 20–130 kb, but can help to improve flow rates.

FAQ-142

Using Gentra Puregene Cell kit:

• Purification of archive-quality DNA from up to 30 Drosophila melanogaster using the Gentra Puregene Cell Kit (PG20)

• Purification of archive-quality DNA from 100 Drosophila melanogaster using the Gentra Puregene Cell Kit (PG21)

• Purification of archive-quality DNA from 300–700 Drosophila melanogaster using the Gentra Puregene Cell Kit (PG22)

Using the QIAGEN Genomic tips:

• Isolation of genomic DNA from flies using the QIAGEN Genomic-tip 100/G (QG05)

FAQ-1970

Buffer G2 is a component of QIAGEN Blood & Cell Culture DNA Kits, but is also provided with several other kits (e.g., for automation on the EZ1 Advanced instrument). Usually Buffer G2 is used in combination with Proteinase K or QIAGEN Protease for efficient lysis.

Buffer G2 (General Lysis Buffer ) consists of: 800 mM guanidine hydrochloride; 30 mM Tris•Cl, pH 8.0; 30 mM EDTA, pH 8.0; 5% Tween 20; 0.5% Triton X-100.

How to prepare Buffer G2: Dissolve 76.42 g guanidine hydrochloride, 11.17g Na2EDTA•2H2O, and 3.63 g Tris base in 600 ml distilled water. Add 250 ml 20% Tween 20 solution and 50 ml 10% Triton X-100 solution. Adjust the pH to 8.0 with NaOH. Adjust the volume to 1 liter with distilled water.

FAQ-2943

Buffer B1 is used in combination with lysozyme or lysostaphin and proteinase K for the efficient lysis of bacteria prior to DNA purification using QIAGEN Genomic-tips. Please note this buffer is not recommended for any purification procedures using QIAGEN’s silica-membrane-based spin columns.

Buffer B1 (Bacterial Lysis Buffer 1) consists of 50 mM Tris•Cl pH 8.0; 50 mM EDTA pH 8.0; 0.5% Tween 20; 0.5% Triton-X100.

How to prepare Buffer B1: Dissolve 18.61 g Na2EDTA•2H2O and 6.06 g Tris base in 800 ml distilled water. Add 50 ml 10% Tween 20 solution and 50 ml 10% Triton X-100 solution. Adjust the pH to 8.0 with HCl. Adjust the volume to 1 liter with distilled water.

FAQ-2944

Buffer B2 is used in combination with Buffer B1, lysozyme or lysostaphin and Proteinase K for efficient lysis of bacteria prior to DNA purification using QIAGEN Genomic-tips. Genomic-tips are gravity-flow, anion-exchange columns. Please note this buffer is not recommended for any purification procedures using QIAGEN’s silica-membrane-based spin columns.

Buffer B2 (Bacterial Lysis Buffer 2) consists of 3 M guanidine hydrochloride, 20% Tween 20.

How to prepare Buffer B2: Dissolve 286.59 g guanidine hydrochloride in 700 ml distilled water. Add 200 ml 100% Tween 20. Adjust the volume to 1 liter with distilled water. pH does not need to be adjusted.

FAQ-2945

Add 1/10 volume of 3 M Na-Acetate pH 5.2, and 2 to 2.5 volumes of ice-cold 100% ethanol to the DNA sample
Mix, and store at –20°C for at least 1 h to precipitate the DNA
Recover the precipitated DNA by centrifugation at full speed in a microcentrifuge for 15–20 min
Pour off the ethanol and wash the pellet twice with room-temperature 70% ethanol
Allow the DNA pellet to air-dry
resuspend the DNA in a suitable volume of sterile TE buffer or distilled water

FAQ-305

Using QIAGEN Genomic-tips

Protocol for DNA cleanup using Genomic-tips can be found in the 'Special Applications' section of the QIAGEN Genomic DNA Handbook.

Using QIAamp DNA Micro kit

Up to 10ug of gDNA can be cleaned using the cleanup protocol in the QIAamp DNA Micro Handbook.

Using Gentra Puregene Reagents

Gentra Puregene Handbook has protocols for removal of proteins and RNA from purified gDNA in Appendix C and Appendix D respectively.

FAQ-618

Small amounts of RNA and DNA may be difficult to measure spectrophotometrically. Fluorometric measurements, or quantitative RT-PCR and PCR are more sensitive and accurate methods to quantify low amounts of RNA or DNA.

Fluorometric measurements are carried out using nucleic acid binding dyes, such as RiboGreen® RNA Quantitation Reagent for RNA, and PicoGreen® DNA Quantitation Reagent for DNA (Molecular Probes, Inc.).

FAQ-728

Yes, we have the following protocols:

Isolation of genomic DNA from frozen clotted whole blood using the QIAGEN Genomic-tip 100/G (QG02). TEST

You will need to prepare the required buffers according to the recipes in Appendix A of the QIAGEN Genomic DNA Handbook, or you can purchase the Genomic DNA Buffer Set containing pre-made solutions. Alternatively, the QIAGEN Blood & Cell Culture Midi Kit, containing Genomic-tips 100/G and buffers, can be used.

Purification of archive-quality DNA from clotted whole blood using Clotspin Baskets and the Gentra Puregene Blood Kit (PG03).
Purification of archive-quality DNA from clotted whole blood using the Gentra Puregene Tissue Kit or Gentra Puregene Mouse Tail Kit (PG04).
Purification of DNA from clotted blood using the FlexiGene DNA Kit (FG01).

FAQ-900

Yes, we have the following protocols:

Isolation of genomic DNA from mosquitoes or other insects using the QIAGEN Genomic tip (QG06).
Purification of total DNA from insects using the DNeasy Blood & Tissue Kit (DY14).

FAQ-904

Yes, we have the following protocols:

Isolation of genomic DNA from fungi (culture and blood) using the QIAamp DNA Mini Kit (QA09).
Isolation of genomic DNA from plants and filamentous fungi using the QIAGEN Genomic-tip (QG08).

FAQ-911

TB Management

Transplant

Infectious Disease

Oncology

Sexual & Reproductive Health

Sample Processing

Solutions for Laboratory-Developed Tests

Blood & Cell Culture DNA Kits

Pour un isolement jusqu’à 20 µg, 100 µg ou 500 µg d’ADN de poids moléculaire élevé à partir de sang et de cellules de culture

Blood & Cell Culture DNA Mini Kit (25)

Caractéristiques

Détails produit

Performances

Principe

Procédure

Applications

Données et illustrations utiles

ADN génomique jusqu’à 150 kb.

Ressources

Publications

Lack of telomerase RNA gene hTERC expression in alternative lengthening of telomeres cells is associated with methylation of the hTERC promoter.

GATA-3 is an important transcription factor for regulating human NKG2A gene expression.

FAQ