QIAamp DSP DNA Blood Mini Kit

Pour la purification d'ADN génomique à partir de sang total humain dans le cadre du diagnostic in vitro

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QIAamp DSP DNA Blood Mini Kit

Cat. No. / ID:  61104

Pour 50 préparations : colonnes QIAamp Mini Spin, tampons, réactifs, tubes, VacConnectors
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219,00 €
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Le QIAamp DSP DNA Blood Mini Kit est destiné à un usage de diagnostic in vitro.
1. Manuel du kit QIAamp DSP DNA Mini © QIAGEN France S.A.S. 2013 Les informations relatives aux dispositifs médicaux in vivo et in vitro contenues dans ce site sont à destination des professionnels de santé. Pour plus d'informations, nous vous invitons à consulter le manuel d'utilisation de l'équipement et/ou la notice d'utilisation du réactif.
Le QIAamp DSP DNA Blood Mini Kit est destiné à un usage de diagnostic in vitro.

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Features

  • Système universel de purification de l’ADN compatible avec d’autres produits IVD
  • Prélèvement flexible des échantillons (1)
  • Compatible avec différents anticoagulants et tubes
  • Choix entre protocole de centrifugation et protocole sous vide (1)

Product Details


Le kit QIAamp DSP DNA Blood Mini permet de purifier les ADN par membrane de silice. Le kit QIAamp DSP DNA Blood Mini est conçu pour les laboratoires traitant le sang dans le cadre du diagnostic in vitro.

Performance

L’ADN génomique purifié à l’aide du kit QIAamp DSP DNA Blood Mini est prêt à être utilisé dans des applications en aval telles que celles reposant sur l’amplification enzymatique ou d’autres modifications telles que la PCR.

Les échantillons de sang total peuvent être prélevés à l’aide de plusieurs types de tubes contenant de l’anticoagulant (EDTA ou citrate), y compris les tubes BD Vacutainer, Monovette et Vacuette (voir tableau). Les échantillons de sang peuvent être congelés et décongelés au moins 3 fois et rester une source fiable pour la purification de l’ADN (voir figure « ADN provenant de sang congelé et décongelé »).

Prélèvement sanguin à l’aide de différents tubes
Tube primaire Fabricant Référence Volume nominal Rendement moyen à partir de 200 µl
BD Vacutainer 9NC BD 366007    9 ml 6,4 µg
BD Vacutainer K3E BD 368457  10 ml 6,6 µg
BD Vacutainer K2E BD 367864    6 ml 6,4 µg
S-Monovette EDTA Sarstedt 02.1066.001    9 ml 6,5 µg
S-Monovette CPDA1 Sarstedt 01.1610.001 8,5 ml 6,3 µg
Vacuette K3E Greiner Bio-One 455036    9 ml 6,5 µg
Vacuette 9NC Greiner Bio-One 454382    2 ml 6,3 µg
Pour chaque type de tube primaire, le sang a été prélevé sur 11 donneurs. Pour chaque donneur, l’ADN a été purifié à partir d’échantillons de 200 μl de sang en triple à l’aide du kit QIAamp DSP DNA Blood Mini et élué dans 200 µl de tampon d’élution. Le tableau indique le rendement d’ADN moyen dans 33 procédures de purification.

Principle

Le kit QIAamp DSP DNA Blood Mini utilise la technologie QIAamp pour la purification de l’ADN génomique. La membrane de silice de QIAamp lie spécifiquement l’ADN dans l’échantillon lysé, tandis que le reste du lysat est rapidement retiré par centrifugation ou aspiration sous vide. L’ADN lié est lavé de manière efficace afin d’éliminer les contaminants puis élué dans un volume de 50 à 200 µl.

Procedure

L’ADN génomique est purifié à partir du sang grâce à l’une des deux procédures alternatives, à savoir une centrifugation ou une chambre à vide et une centrifugation (voir schéma « Procédure »). Le système universel de purification d’ADN permet la compatibilité avec d’autres produits de diagnostic in vitro (voir « Déroulement des opérations »).

L’échantillon de sang contenant l’EDTA ou le citrate (200 µl) est lysé en présence de la protéase QIAGEN et du tampon de lyse à 56 °C pendant 10 minutes. L’éthanol est ensuite ajouté au lysat pour optimiser la liaison de l’ADN à la membrane QIAamp. Le lysat est appliqué sur une colonne de centrifugation QIAamp Mini puis il est passé à la centrifugeuse ou soumis à une pression sous vide. L’ADN se lie à la membrane QIAamp dans la colonne de centrifugation et le reste du lysat passe à travers. L’ADN lié est lavé de manière efficace par deux tampons de lavage différents qui traversent aussi la membrane QIAamp par centrifugation ou pression sous vide. La membrane QIAamp est ensuite séchée par centrifugation. Le tampon d’élution (50 à 200 µl) est appliqué à la membrane QIAamp et, après une minute d’incubation, la colonne de centrifugation est centrifugée pour éluer l’ADN pur.

La purification de l’ADN à l’aide du kit QIAamp DSP DNA Blood Mini peut être entièrement automatisée sur le QIAcube. En cas d’automatisation du kit QIAamp DSP DNA Blood Mini sur l’instrument QIAcube, l’instrument peut traiter moins de 50 échantillons en raison des volumes morts, de l’évaporation et de la consommation supplémentaire de réactif par pipetage automatisé. QIAGEN ne garantit que 50 préparations d’échantillons en cas d’utilisation manuelle du kit QIAamp DSP DNA Blood Mini.

Applications

Le kit QIAamp DSP DNA Blood Mini utilise la technologie QIAamp pour une purification de l’ADN à partir de sang total frais ou congelé et de sang traité au citrate ou à l’EDTA.

Supporting data and figures

Specifications

FeaturesSpecifications
ApplicationsDownstream detection procedures in molecular diagnostics, such as PCR
Main sample typeWhole blood
Elution volume50–200 µl
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or proteinGenomic DNA
CE/FDA/IVD compatibleCE/IVD
FormatSpin columns
Sample amount200 µl
ProcessingManual (centrifugation or vacuum); automated (on QIAcube Connect MDx)
TechnologySilica technology

Resources

Performance Data (1)
QIAamp DSP DNA Blood Mini Performance Characteristics_V3_In Vitro Diagnostic use according to the Regulation (EU) 2017/746 on in vitro diagnostics medical devices
 
Safety Data Sheets (1)
Kit Handbooks (1)
QIAamp DSP DNA Blood Mini Handbook_V3_In Vitro Diagnostic use according to the Regulation (EU) 2017/746 on in vitro diagnostics medical devices
 
Certificates of Analysis (1)

FAQ

Does the QIAamp DSP Virus Kit require the QIAvac 24 Plus, or can I use it with my own laboratory vacuum system?
It is possible to use a general laboratory vacuum system with the QIAamp DSP Virus Kit. However, this will require validation in-house. The CE-marked QIAamp Kits have been developed, field-tested and validated with the QIAvac 24 Plus vacuum system (QIAvac 24 Plus, QIAvac Connecting System and Vacuum Pump). Using this system with the QIAamp DSP Virus Kit will avoid lengthy validation procedures for the enduser.
FAQ ID -789
What vacuum pressure should be applied using the QIAvac 24 Plus for the QIAamp DSP Virus Kit and Blood Mini Kit Protocols?

When processing samples with the QIAamp DSP DNA Blood Mini Kit and the QIAamp DSP Virus Kit, the vacuum pressure should be below -800 mbar. The QIAvac 24 Plus and the QIAvac Connecting System should be tested according to Appendix B of the QIAvac 24 Plus Handbook before performing a nucleic acid purification procedure.

If you would like to use an equivalent general laboratory vacuum system, make sure that the minimum vacuum pressure is reached. Performance of the QIAamp DSP DNA Blood Mini or Virus Kits in combination with a house-vacuum system has to be validated by the researcher.

FAQ ID -1033
What is the difference between QIAGEN Protease and QIAGEN Proteinase K provided in various QIAamp Kits?

QIAGEN Proteinase K is a subtilisin-type protease, which cleaves at the carboxyl side of hydrophobic, aliphatic and aromatic amino acids. It is particularly suitable for short digestion times. It possesses a high specific activity over a wide range of temperatures and pH values with substantially increased activity at higher temperature. Soluble calcium is not essential for enzymatic activity. This means that EDTA, which is used to inhibit Mg2+-dependent enzymes such as nucleases, will not inhibit Proteinase K activity.

QIAGEN Protease is a broad-specificity Serine protease with high activity, cleaving preferentially at neutral and acidic residues. It is an economical alternative to Proteinase K for isolation of native DNA and RNA from a variety of samples.

FAQ ID -761
What can be used as an alternative to the A260 measurement for quantification of small amounts of RNA and DNA?

Small amounts of RNA and DNA may be difficult to measure spectrophotometrically. Fluorometric measurements, or quantitative RT-PCR and PCR are more sensitive and accurate methods to quantify low amounts of RNA or DNA.

Fluorometric measurements are carried out using nucleic acid binding dyes, such as RiboGreen® RNA Quantitation Reagent for RNA, and PicoGreen® DNA Quantitation Reagent for DNA (Molecular Probes, Inc.).

FAQ ID -728
How do I safely inactivate biohazardous flow-through material?

Always dispose of potentially biohazardous solutions according to your institution’s waste-disposal guidelines. Although the lysis and binding buffers in QIAamp, DNeasy, and RNeasy kits contain chaotropic agents that can inactivate some biohazardous material, local regulations dictate the proper way to dispose of biohazards. DO NOT add bleach or acidic solutions directly to the sample-preparation waste. Guanidine hydrochloride in the sample-preparation waste can form highly reactive compounds when combined with bleach.
Please access our Material Safety Data Sheets (MSDS) online for detailed information on the reagents for each respective kit.

FAQ ID -12