QIAamp Fast DNA Tissue Kit

En procesos como el genotipado y otros análisis de ADN con PCR o secuenciación de última generación (NGS), se requiere una cantidad adecuada de ADN genómico de alta calidad como material inicial. El cuello de botella más habitual en los procesos de obtención de ADN de alta calidad es la lisis de los tejidos. En los tejidos fibrosos o difíciles de lisar, se deben aplicar protocolos largos y tediosos que, a menudo, dan lugar a bajos rendimientos de ADN de baja calidad. El QIAamp Fast DNA Tissue Kit, basado en las tecnologías de QIAGEN de probada eficacia, consigue superar este cuello de botella gracias al uso de tubos de disrupción innovadores que mejoran significativamente el rendimiento y reducen el tiempo necesario hasta la obtención del resultado. El procedimiento se puede automatizar por completo en el instrumento QIAcube Connect.

¿Le interesa probar esta solución por primera vez? Solicite un presupuesto para un kit de prueba.

El QIAamp Fast DNA Tissue Kit utiliza una novedosa combinación de lisis enzimática, química y mecánica. Cada kit incluye una serie de tubos de disrupción que contienen microesferas especiales de acero inoxidable, diseñadas con una forma exclusiva que ayuda a una disrupción del tejido más exhaustiva en comparación con otros métodos. En primer lugar, la muestra de tejido y la mezcla de reactivo se añaden a los tubos y se homogenizan con un agitador vórtex de mesa normal (con los adaptadores adecuados) o un molinillo con microesferas, como TissueLyser II o LT. A continuación, se aplica una lisis breve en el mismo tubo. Posteriormente, el ADN se extrae del lisado gracias a la tecnología de QIAamp de eficacia demostrada. El tratamiento previo reduce el tiempo de extracción de ADN total de varias horas a solo 30 minutos.
Además de reducir el tiempo total que se necesita para extraer el ADN, el paso de disrupción mecánica y el protocolo de lisis exhaustiva aumentan el rendimiento del ADN. Se han evaluado las mejoras en el rendimiento de distintos tipos de tejido con QIAxpert y un ensayo fluorométrico. Los resultados demuestran que el QIAamp Fast DNA Tissue Kit es capaz de extraer hasta 10 veces más ADN en comparación con los métodos estándar, al mismo tiempo que ofrece uno de los protocolos más rápidos.
La mayoría de las aplicaciones de NGS requieren un ADN de alto peso molecular (>10 kb) para permitir la secuenciación de tramos más largos y el montaje de estos mediante herramientas bioinformáticas. Determinados métodos de disrupción pueden fragmentar el ADN mediante cizallamiento. Esto podría afectar a los análisis anterógrados. En comparación con otros kits que muestran una alta fragmentación hasta un valor bajo de kb, el QIAamp Fast DNA Tissue Kit le permite obtener ADN de entre 25 y 50 kb, por lo que resulta idóneo para las aplicaciones de PCR y NGS.

Las técnicas moleculares, como PCR y NGS, han desvelado detalles desconocidos hasta ahora a partir de complejas muestras experimentales. Para conseguir resultados fiables gracias a estas técnicas, es fundamental obtener una cantidad suficiente de ADN de alta calidad. Esto puede resultar complejo cuando se trabaja con tejidos fibrosos o duros, ya que el proceso de lisis es difícil, lo que afecta directamente a la cantidad de ADN que se libera. Para abordar esta dificultad, el nuevo QIAamp Fast DNA Tissue Kit combina la lisis de tejido mecánica, química y enzimática, lo que genera un rendimiento del ADN entre 5 y 10 veces mejor en comparación con los métodos estándar. El tratamiento previo reduce el tiempo de extracción de ADN total de varias horas a solo 30 minutos, por lo que, además de obtener un ADN de alta integridad, idóneo para aplicaciones de PCR y NGS, también reduce significativamente el tiempo de trabajo.

El QIAamp Fast DNA Tissue Kit utiliza una combinación de lisis enzimática, química y mecánica para homogeneizar las muestras. Los Tissue Disruption Tubes incluidos contienen una microesfera diseñada con una forma especial que consigue una disrupción eficaz del tejido mediante agitación. Para homogeneizar el tejido, bastará con 5 minutos en un agitador vórtex de mesa o 30 segundos en un molinillo de microesferas de alta potencia. La química optimizada permite la homogeneización del tejido y la estabilización simultánea del ADN que se libera del tejido obtenido mediante disrupción. La mezcla de tampón de digestión contiene proteinasa K, lo que permite lisar por completo el material de la muestra mediante una breve incubación e impide que la homogeneización mecánica afecte al proceso. A continuación, el ADN genómico se purifica mediante la tecnología QIAamp de probada eficacia, dando lugar a un ADN puro que puede utilizarse para cualquier aplicación anterógrada, como PCR o secuenciación. Además, el QIAamp Fast DNA Tissue Kit puede utilizarse con QIAcube para la preparación automatizada de las muestras.

El QIAamp Fast DNA Tissue Kit proporciona ADN puro de alto rendimiento a partir de cualquier tipo de tejido y es apto para aplicaciones de PCR y NGS.