QuickLyse Miniprep Kit para extracción de ADN plásmido

Para purificación rápida de hasta 15 μg de ADN plásmido de grado de secuenciación

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✓ Procesamiento automático sin interrupción de pedidos en línea

✓ Servicio técnico y para productos experto y profesional

✓ Realización y repetición de pedidos rápidas y fiables

QuickLyse Miniprep Kit (250)

N.º de cat. / ID.   27406

250 QuickLyse Spin Columns, reactivos, tampones, Lysis and Collection Tubes (2 ml)
El QuickLyse Miniprep Kit está concebido para su uso en aplicaciones de biología molecular. Este producto no está concebido para el diagnóstico, la prevención ni el tratamiento de enfermedades.

✓ Procesamiento automático sin interrupción de pedidos en línea

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✓ Realización y repetición de pedidos rápidas y fiables

Características

  • Procedimiento rápido de lisis de un paso
  • Reducción de pasos del protocolo y tiempo de manipulación
  • Hasta 15 µg de ADN a partir de 1,5 volúmenes de cultivo obtenidos
  • ADN plasmídico listo para su uso en tan solo 9 minutos

Detalles del producto

El QuickLyse Miniprep Kit proporciona un método rápido de columna de centrifugación para ADN plasmídico de grado de secuenciación aislante. Se consigue la resuspensión celular bacteriana, la lisis y la unión de ADN en un tampón único, lo que facilita una purificación de ADN rápida con un tiempo de manipulación mínimo.

Rendimiento

El QIAGEN QuickLyse Miniprep Kit emplea tecnología de lisis de un paso para preparación ultrarrápida de hasta 15 µg de aDN plásmido. La calidad del ADN garantiza un rendimiento sólido en aplicaciones como la secuenciación, los análisis de restricción y la clonación (véase la figura “ Rendimientos reproducibles”).

El QuickLyse Miniprep Kit produce suficiente ADN plasmídico para cualquier aplicación posterior, incluida la secuenciación (véase la figura “ Longitudes de lectura largas en secuenciación automatizada”). A partir de 1,5 ml de cultivo bacteriano pueden obtenerse hasta 15 µg de ADN plasmídico de alto número de copias (véase la figura “ Alto rendimiento de ADN plasmídico de alta calidad”). El ADN plasmídico aislado tiene unas relaciones de DO de 260/280 de 1,7-1,9, lo que indica que la calidad y la pureza son adecuadas para todas las aplicaciones sensibles. Se alcanzan con facilidad las longitudes de lectura de secuenciación de más de 700 bases.

Principio

A diferencia de la mayoría de los protocolos que utilizan un procedimiento de lisis en 3 pasos, el QuickLyse Miniprep Kit combina procesos enzimáticos y osmóticos para lisar las células bacterianas en un único paso de 3 minutos. Además, la tecnología QuickLyse emplea menos tampones, lo que simplifica la manipulación y ahorra tiempo: se pueden preparar 24 minpreparaciones de ADN plasmídico en menos de 22 minutos.

Procedimiento

Las células bacterianas se resuspenden y se lisan y el ADN se une en un único tampón, lo que permite una purificación rápida del ADN con un tiempo de manipulación mínimo. Después de un paso de lisis de 3 minutos, el lisado aclarado se aplica directamente a una QuickLyse Spin Column. El ADN plasmídico se une a la membrana de la columna y se eluye después de un único paso de lavado (véase el diagrama “ Procedimiento de QuickLyse”). El ADN aislado puede utilizarse directamente en aplicaciones estándar, como secuenciación automatizada, PCR, análisis de restricción y clonación.

Aplicaciones

El QuickLyse Miniprep Kit produce suficiente ADN plasmídico para cualquier aplicación anterógrada, incluida la secuenciación automatizada.

Datos y cifras de respaldo

Especificaciones

CaracterísticasEspecificaciones
ApplicationsSecuenciación automatizada, PCR, análisis de restricción, clonación etc.
Time per run or prep per run9 min
Culture volume/starting material1,5 ml de volumen de cultivo
Plasmid typeADN cósmido de número alto de copias
Elution volume50 µl
Samples per run (throughput)1-24 muestras por serie
TechnologyTecnología QuickLyse
YieldHasta 15 µg
ProcessingManual (centrifugación)

Recursos

Manuales de uso de kits (2)
Hojas de datos sobre seguridad (1)
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)

Preguntas frecuentes

Can the bacterial pellet in the QuickLyse Miniprep procedure be resuspended by pipetting up and down or shortening the vortexing time?

No. Vortexing for 30 seconds as described in the QuickLyse Miniprep Handbook is absolutely critical to resuspend and lyse the bacterial cells. Failure to follow this step will result in greatly reduced DNA yields.

 

FAQ-1352
How can I increase the DNA yield from low-copy plasmids using the QuickLyse Miniprep Kit?

When using the QuickLyse Miniprep Kit, the addition of 125 µl isopropanol to the lysate, prior to transferring it to the QuickLyse Spin Column, may increase plasmid DNA yield in some cases.

 

FAQ-1354
Is it possible to elute plasmid DNA obtained with the QuickLyse Miniprep Kit in nuclease-free water?

Yes, nuclease-free water may be used for the elution of plasmid DNA purified with the QuickLyse Miniprep Kit. However, for higher DNA stability and optimal yields, it is recommend to elute using the provided elution buffer (Buffer QLE).

 

FAQ-1355
What is the composition of elution buffer QLE in the QuickLyse Miniprep Kit?

Elution Buffer QLE of the QuickLyse Miniprep Kit contains 10 mM Tris-Cl and 0.1 mM EDTA (pH 8.5). Due to the very low concentration of EDTA, enzymatic downstream reactions such as PCR and cycle sequencing are not inhibited.

 

FAQ-1356
What volume of bacterial culture can be processed using the QuickLyse Miniprep Kit?

Normally, 1.5 ml bacterial culture is used with the QuickLyse Miniprep Kit. Only if the OD600 is < 2.0, up to 3 ml culture may be used. Growth in LB medium is strongly recommended. Growth in nutrient-rich media, such as 2xYT, is not recommended.

 

FAQ-1357
What is the largest plasmid size that can be purified using the QuickLyse Miniprep Kit?

The QuickLyse Miniprep Kit can be used for plasmids up to 9 kb in size. It is not recommended for Large-Construct purifications.

Please find an overview of additional kit options for small-scale Plasmid Purification on the QIAGEN website, or use our ProductFinder to select the right kit for your needs.

 

 

FAQ-1752
3311 - Can QuickLyse miniprep kits be used with QIAVac 24 Plus?
No, this is not possible since the columns do not fit properly on the QIAVac 24 Plus manifold and the vacuum is not strong enough.
FAQ-3311