Blood & Cell Culture DNA Kits

Para el aislamiento de hasta 20 µg, 100 µg o 500 µg de ADN de alto peso molecular a partir de sangre y células cultivadas

✓ Procesamiento automático sin interrupción de pedidos en línea

✓ Servicio técnico y para productos experto y profesional

✓ Realización y repetición de pedidos rápidas y fiables

Blood & Cell Culture DNA Mini Kit (25)

N.º de cat. / ID. 13323

25 QIAGEN Genomic-tip 20/G, QIAGEN Protease y Buffers

KitSolución tampón

Blood & Cell Culture DNA Kit

Genomic DNA Buffer Set

Tipo de columna

20/G

100/G

500/G

Consultar al respecto

Blood & Cell Culture DNA Kits están concebidos para su uso en aplicaciones de biología molecular. Estos productos no están concebidos para el diagnóstico, la prevención ni el tratamiento de enfermedades.

✓ Procesamiento automático sin interrupción de pedidos en línea

✓ Servicio técnico y para productos experto y profesional

✓ Realización y repetición de pedidos rápidas y fiables

Características

Aislamiento fiable de ADN de alto peso molecular de hasta 150 kb
Sin extracciones con fenol o cloroformo
Procesamiento cómodo y en paralelo de varias muestras

Detalles del producto

Los Blood & Cell Culture DNA Kits proporcionan tampones y puntas de intercambio aniónico de flujo por gravedad para el aislamiento eficaz de ADN genómico a partir de una amplia gama de muestras biológicas. El ADN purificado tiene un tamaño de 150 kb, con un tamaño medio de entre 50 y 100 kb.

Es necesario adquirir el Genomic DNA Buffer Set (número de catálogo 19060) para las muestras de levaduras y bacterias.

Rendimiento

El procedimiento con QIAGEN Genomic-tip es muy suave, por lo que genera un ADN con el mínimo cizallamiento. El ADN purificado con QIAGEN Genomic-tips tiene un tamaño de 150 kb, con un tamaño medio de entre 50 y 100 kb (consulte la figura “ADN genómico de hasta 150 kb”). El ADN no contiene ningún tipo de contaminante, como ARN, proteínas o metabolitos, y ofrece una relación A₂₆₀/A₂₈₀ de entre 1,7 y 1,9.

El tamaño excepcionalmente grande del ADN obtenido lo hace especialmente adecuado para preparar genotecas de alta calidad para la secuenciación de última generación (NGS) en distintas plataformas y está recomendado por varias instalaciones centrales.

Principio

Las QIAGEN Genomic-tips, que se incluyen en los Blood & Cell Culture DNA Kits, utilizan una tecnología de intercambio aniónico exclusiva de QIAGEN para purificar el ADN de alto peso molecular desde una amplia gama de muestras biológicas sin aplicar fenol ni cloroformo. Los tampones de lisis están optimizados para distintos tipos de muestras y proporcionan una desnaturalización inmediata de proteínas, como nucleasas, histonas y proteínas de unión al ADN, así como partículas víricas potencialmente infecciosas. En las condiciones de pH y baja salinidad que proporciona el tampón, el ADN se une a la resina de QIAGEN en la columna. Al mismo tiempo, otros constituyentes celulares, como proteínas, carbohidratos y metabolitos, fluyen libremente. El ADN purificado se eluye en un tampón de salinidad alta. Las puntas genómicas funcionan por efecto de la gravedad. Además, no necesitan supervisión y no se secan. Esto reduce el tiempo de manipulación al mínimo y hace que el procedimiento sea idóneo para procesar varias muestras en paralelo.

Procedimiento

En primer lugar, las muestras se lisan (se aplica disrupción mecánica a las muestras de tejido) y las proteínas se desnaturalizan simultáneamente en el tampón de lisis adecuado (consulte el gráfico de flujo “Procedimiento con las QIAGEN Genomic-tips”). A continuación, se añade QIAGEN Protease o Proteinase K y, tras un periodo de incubación adecuado, los lisados se cargan en QIAGEN Genomic-tip. El ADN se une a la columna mientras que otros constituyentes celulares fluyen libremente. A continuación, se lleva a cabo un paso de lavado para eliminar cualquier contaminante que haya quedado. Después, el ADN puro de alto peso molecular se eluye y precipita con isopropanol. El tiempo de manipulación para el procedimiento completo es de solo 30 minutos para sangre y células cultivadas.

Los Blood & Cell Culture DNA Kits son kits listos para usarse que contienen todos los componentes necesarios para la purificación de ADN de alto peso molecular de sangre y células cultivadas.

Aplicaciones

El ADN purificado con Blood & Cell Culture DNA Kits es idóneo para su uso en las siguientes aplicaciones:

Secuenciación de Sanger y secuenciación de última generación
Secuenciación de lectura larga
Análisis de RFLP
Análisis genético dirigido
Cribado de animales transgénicos
Estudios de identificación del ADN
Amplificación por PCR

Características	Blood & Cell Culture DNA Mini Kit	Blood & Cell Culture DNA Midi Kit	Blood & Cell Culture DNA Maxi Kit
Aplicaciones	PCR, RFLP, blotting, cribado	PCR, RFLP, blotting, cribado	PCR, RFLP, blotting, cribado
Volumen de elución	0,1-2 ml	0,1-2 ml	0,1-2 ml
Formato	Punta genómica	Punta genómica	Punta genómica
Tipo de muestra principal	Sangre, células	Sangre, células	Sangre, células
Procesamiento	Manual	Manual	Manual
Purificación de ARN total, miARN, ARNm poli A+, ADN o proteína	ADN	ADN	ADN
Cantidad de muestra	1 ml/5 × 10⁶	5 ml/2 × 10⁷	20 ml/1 × 10⁸
Tecnología	Tecnología de intercambio aniónico	Tecnología de intercambio aniónico	Tecnología de intercambio aniónico
Rendimiento	15-20 µg	80-100 µg	350-400 µg

Datos y cifras de respaldo

ADN genómico de hasta 150 kb.

Electroforesis en gel de campo pulsado (PFGE) de ADN (2 µg) purificado con QIAGEN Genomic-tips. M: marcadores.

Procedimiento con las QIAGEN Genomic-tips.

Recursos

Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.

Publicaciones

Lack of telomerase RNA gene hTERC expression in alternative lengthening of telomeres cells is associated with methylation of the hTERC promoter.

Hoare SF; Bryce LA; Wisman GB; Burns S; Going JJ; van der Zee AG; Keith WN;

Cancer Res; 2001; 61 (1):27-32 2001 Jan 1 PMID:11196173

GATA-3 is an important transcription factor for regulating human NKG2A gene expression.

Marusina AI; Kim DK; Lieto LD; Borrego F; Coligan JE;

J Immunol; 2005; 174 (4):2152-9 2005 Feb 15 PMID:15699146

Preguntas frecuentes

Always dispose of potentially biohazardous solutions according to your institution’s waste-disposal guidelines. Although the lysis and binding buffers in QIAamp, DNeasy, and RNeasy kits contain chaotropic agents that can inactivate some biohazardous material, local regulations dictate the proper way to dispose of biohazards. DO NOT add bleach or acidic solutions directly to the sample-preparation waste. Guanidine hydrochloride in the sample-preparation waste can form highly reactive compounds when combined with bleach.
Please access our Material Safety Data Sheets (MSDS) online for detailed information on the reagents for each respective kit.

FAQ-12

Bisulfite conversion of unmethylated cytosines into uracils with the EpiTect Bisulfite Kit works on DNA irrespective of the source organism. The DNA template needs to be of high purity for efficient conversion. We recommend to use genomic DNA extracted with our DNA isolation kits for clinical or animal and plant samples as a template for the EpiTect Bisulfite Kit.

FAQ-1209

Genomic DNA purified using QIAGEN Genomic-tips ranges in size from 20–150 kb, with an average length of 50–100 kb. Vortexing the lysate for about 20 seconds may reduce the size of the genomic DNA slightly to 20–130 kb, but can help to improve flow rates.

FAQ-142

Using Gentra Puregene Cell kit:

• Purification of archive-quality DNA from up to 30 Drosophila melanogaster using the Gentra Puregene Cell Kit (PG20)

• Purification of archive-quality DNA from 100 Drosophila melanogaster using the Gentra Puregene Cell Kit (PG21)

• Purification of archive-quality DNA from 300–700 Drosophila melanogaster using the Gentra Puregene Cell Kit (PG22)

Using the QIAGEN Genomic tips:

• Isolation of genomic DNA from flies using the QIAGEN Genomic-tip 100/G (QG05)

FAQ-1970

Buffer G2 is a component of QIAGEN Blood & Cell Culture DNA Kits, but is also provided with several other kits (e.g., for automation on the EZ1 Advanced instrument). Usually Buffer G2 is used in combination with Proteinase K or QIAGEN Protease for efficient lysis.

Buffer G2 (General Lysis Buffer ) consists of: 800 mM guanidine hydrochloride; 30 mM Tris•Cl, pH 8.0; 30 mM EDTA, pH 8.0; 5% Tween 20; 0.5% Triton X-100.

How to prepare Buffer G2: Dissolve 76.42 g guanidine hydrochloride, 11.17g Na2EDTA•2H2O, and 3.63 g Tris base in 600 ml distilled water. Add 250 ml 20% Tween 20 solution and 50 ml 10% Triton X-100 solution. Adjust the pH to 8.0 with NaOH. Adjust the volume to 1 liter with distilled water.

FAQ-2943

Buffer B1 is used in combination with lysozyme or lysostaphin and proteinase K for the efficient lysis of bacteria prior to DNA purification using QIAGEN Genomic-tips. Please note this buffer is not recommended for any purification procedures using QIAGEN’s silica-membrane-based spin columns.

Buffer B1 (Bacterial Lysis Buffer 1) consists of 50 mM Tris•Cl pH 8.0; 50 mM EDTA pH 8.0; 0.5% Tween 20; 0.5% Triton-X100.

How to prepare Buffer B1: Dissolve 18.61 g Na2EDTA•2H2O and 6.06 g Tris base in 800 ml distilled water. Add 50 ml 10% Tween 20 solution and 50 ml 10% Triton X-100 solution. Adjust the pH to 8.0 with HCl. Adjust the volume to 1 liter with distilled water.

FAQ-2944

Buffer B2 is used in combination with Buffer B1, lysozyme or lysostaphin and Proteinase K for efficient lysis of bacteria prior to DNA purification using QIAGEN Genomic-tips. Genomic-tips are gravity-flow, anion-exchange columns. Please note this buffer is not recommended for any purification procedures using QIAGEN’s silica-membrane-based spin columns.

Buffer B2 (Bacterial Lysis Buffer 2) consists of 3 M guanidine hydrochloride, 20% Tween 20.

How to prepare Buffer B2: Dissolve 286.59 g guanidine hydrochloride in 700 ml distilled water. Add 200 ml 100% Tween 20. Adjust the volume to 1 liter with distilled water. pH does not need to be adjusted.

FAQ-2945

Add 1/10 volume of 3 M Na-Acetate pH 5.2, and 2 to 2.5 volumes of ice-cold 100% ethanol to the DNA sample
Mix, and store at –20°C for at least 1 h to precipitate the DNA
Recover the precipitated DNA by centrifugation at full speed in a microcentrifuge for 15–20 min
Pour off the ethanol and wash the pellet twice with room-temperature 70% ethanol
Allow the DNA pellet to air-dry
resuspend the DNA in a suitable volume of sterile TE buffer or distilled water

FAQ-305

Using QIAGEN Genomic-tips

Protocol for DNA cleanup using Genomic-tips can be found in the 'Special Applications' section of the QIAGEN Genomic DNA Handbook.

Using QIAamp DNA Micro kit

Up to 10ug of gDNA can be cleaned using the cleanup protocol in the QIAamp DNA Micro Handbook.

Using Gentra Puregene Reagents

Gentra Puregene Handbook has protocols for removal of proteins and RNA from purified gDNA in Appendix C and Appendix D respectively.

FAQ-618

Small amounts of RNA and DNA may be difficult to measure spectrophotometrically. Fluorometric measurements, or quantitative RT-PCR and PCR are more sensitive and accurate methods to quantify low amounts of RNA or DNA.

Fluorometric measurements are carried out using nucleic acid binding dyes, such as RiboGreen® RNA Quantitation Reagent for RNA, and PicoGreen® DNA Quantitation Reagent for DNA (Molecular Probes, Inc.).

FAQ-728

Yes, we have the following protocols:

Isolation of genomic DNA from frozen clotted whole blood using the QIAGEN Genomic-tip 100/G (QG02). TEST

You will need to prepare the required buffers according to the recipes in Appendix A of the QIAGEN Genomic DNA Handbook, or you can purchase the Genomic DNA Buffer Set containing pre-made solutions. Alternatively, the QIAGEN Blood & Cell Culture Midi Kit, containing Genomic-tips 100/G and buffers, can be used.

Purification of archive-quality DNA from clotted whole blood using Clotspin Baskets and the Gentra Puregene Blood Kit (PG03).
Purification of archive-quality DNA from clotted whole blood using the Gentra Puregene Tissue Kit or Gentra Puregene Mouse Tail Kit (PG04).
Purification of DNA from clotted blood using the FlexiGene DNA Kit (FG01).

FAQ-900

Yes, we have the following protocols:

Isolation of genomic DNA from mosquitoes or other insects using the QIAGEN Genomic tip (QG06).
Purification of total DNA from insects using the DNeasy Blood & Tissue Kit (DY14).

FAQ-904

Yes, we have the following protocols:

Isolation of genomic DNA from fungi (culture and blood) using the QIAamp DNA Mini Kit (QA09).
Isolation of genomic DNA from plants and filamentous fungi using the QIAGEN Genomic-tip (QG08).

FAQ-911

TB Management

Transplant

Infectious Disease

Oncology

Sexual & Reproductive Health

Sample Processing

Solutions for Laboratory-Developed Tests

Blood & Cell Culture DNA Kits

Para el aislamiento de hasta 20 µg, 100 µg o 500 µg de ADN de alto peso molecular a partir de sangre y células cultivadas

Blood & Cell Culture DNA Mini Kit (25)

Características

Detalles del producto

Rendimiento

Principio

Procedimiento

Aplicaciones

Datos y cifras de respaldo

ADN genómico de hasta 150 kb.

Recursos

Publicaciones

Lack of telomerase RNA gene hTERC expression in alternative lengthening of telomeres cells is associated with methylation of the hTERC promoter.

GATA-3 is an important transcription factor for regulating human NKG2A gene expression.

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