QIAGEN Plasmid Plus 96 Kits

• ADN plasmídico de grado de transfección con niveles de endotoxinas <1 UE/µg de ADN
• Pureza de ADN comparable con tecnología de intercambio aniónico
• Alto rendimiento (hasta 50 µg)
• Manipulación cómoda y procedimiento simple
• Vacío, centrifugación y opciones de procesamiento automatizado

Los QIAGEN Plasmid Plus 96 Kits proporcionan un método exclusivo para preparación de plásmidos en formato de 96 pocillos. Las muestras se pueden procesar de manera adecuada con el instrumento QIAvac 96 y/o una centrifugadora o automatizar en el BioRobot Universal System. La química de unión patentada permite que se obtengan hasta 50 µg de ADN plasmídico de grado de transfección por pocillo a partir de 5 ml de un cultivo de E. coli. Se reducen los niveles de endotoxina a volúmenes inferiores a 1 UE/µg de ADN debido a un tampón de reducción de endotoxinas especializado.
Para obtener resultados óptimos, se recomienda utilizar este producto junto con QIAvac 96.

Alto rendimiento constante de ADN plasmídico listo para usar

La tecnología QIAGEN Plasmid Plus ofrece el mismo rendimiento y calidad que la tecnología de intercambio aniónico. Se puede obtener un alto rendimiento de ADN plasmídico de grado de transfección de hasta 50 µg (véase la figura “ Alto rendimiento de ADN plasmídico”).

Niveles de endotoxinas muy bajos

Los kits incluyen un tampón de reducción de endotoxinas que disminuye eficazmente las endotoxinas bacterianas a niveles que suelen ser inferiores a 1 UE/µg de ADN, lo que ofrece una calidad de ADN plasmídico adecuada para la transfección en estirpes celulares sensibles (véanse las figuras “ Niveles de endotoxinas muy bajos” y “ Transfección muy eficaz en una estirpe celular sensible”).

Los QIAGEN Plasmid Plus 96 Kits se basan en la tecnología QIAGEN Plasmid Plus, un método exclusivo para preparación de plásmidos. El procedimiento se basa en una química de unión no caotrópica, lo que garantiza la selectividad y la calidad del ADN que es comparable a las preparaciones de intercambio aniónico. Tras el aclaramiento del lisado, un simple procedimiento de unión, lavado y dilución da como resultado un ADN plasmídico muy concentrado, listo para el uso directo en aplicaciones posteriores. La química y el diseño exclusivos del kit de las placas Plasmid Plus 96 permiten una capacidad de unión muy elevada.

Este método exclusivo para preparación de plásmidos en formato de 96 pocillos proporciona un ADN plasmídico de grado de transfección de gran pureza con un procedimiento simple de unión, lavado y dilución (véase el diagrama “ Procedimiento del QIAGEN Plasmid Plus 96”).

El protocolo del QIAGEN Plasmid Plus 96 Miniprep empieza con un procedimiento de lisis alcalina modificado. Tras la neutralización, los lisados se aclaran con una TurboFilter 96 Plate. Se añade un tampón de unión no caotrópico al lisado aclarado para optimizar la unión de ADN plasmídico a la membrana de la Plasmid Plus 96 Plate. El exclusivo tampón de unión proporciona unas condiciones de unión muy específicas que dan lugar a una calidad del ADN comparable a la de los preparados de intercambio aniónico. Un paso de lavado con un tampón de reducción de endotoxinas da como resultado ADN plasmídico de grado de transfección adecuado para la transfección en la mayoría de las estirpes celulares (véase la figura “ Transfección de alta eficacia en estirpes celulares sensibles”). La química de unión patentada permite la purificación de hasta 50 µg de ADN plasmídico por pocillo a partir de 5 ml de cultivo de E. coli (véase la figura “ Alto rendimiento de ADN plasmídico”).

Opciones de procesamiento cómodas y flexibles

El procedimiento se puede automatizar completamente con el QIAGEN Plasmid Plus 96 BioRobot Kit en el BioRobot Universal System. Como alternativa, el QIAvac 96 se utiliza para aclaramiento de lisado con la TurboFilter 96 Plate, y los pasos de unión de ADN y de lavado se llevan a cabo con la Plasmid Plus 96 Plate. Los pasos de secado y elución pueden llevarse a cabo en el QIAvac 96 o con una centrifugadora compatible. Además, el procedimiento completo puede hacerse mediante una centrifugadora compatible.

El ADN plasmídico purificado con los QIAGEN Plasmid Plus 96 Kits es muy idóneo para una amplia variedad de aplicaciones, como:

• Transfección, incluidas las estirpes celulares sensibles
• Preparación de vectores de horquilla corta (vectores-sh)
• Modificaciones enzimáticas
• Clonación
• Digestión de restricción