miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit

• Aislamiento de miARN sin fenol procedente de muestras de plasma o de suero humano, de ratón o de rata
• Procesamiento automatizado sencillo y fiable para ahorrar tiempo y dinero
• miARN de alta calidad listo para el uso en cualquier aplicación posterior
• Rendimiento uniforme de miARN a partir de pequeñas cantidades de material de partida

El miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit está diseñado para la purificación automatizada de alto rendimiento de ARN total sin células (principalmente miARN y otro ARN pequeño), a partir de pequeños volúmenes de suero y plasma en el instrumento QIAcube HT. Al usar tecnología probada de membrana de sílice RNeasy en un cómodo formato de 96 pocillos, se eliminan los contaminantes e inhibidores para obtener ARN de alta calidad listo para el análisis posterior.

El miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit es la versión de rendimiento medio a alto del miRNeasy Serum/Plasma Advanced Kit y proporciona el mismo rendimiento y calidad de ARN utilizando tecnología de aislamiento sin fenol (véanse las figuras  Rendimiento comparable con kit manual usando los mismos volúmenes) y  Rendimiento comparable con kit manual usando la misma cantidad de ARN). El miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit aísla de manera eficiente ARN total, incluido el miARN, procedente de muestras de plasma y de suero humano y animal de 50 µl a 200 µl ( Procesamiento de diferentes cantidades de plasma). El kit es compatible con la mayoría de dispositivos de recogida de sangre (véase la figura  Compatibilidad con diversos tubos de recogida de sangre). El protocolo sin fenol utiliza tecnología de columna de centrifugación fácil de automatizar en formato de 96 pocillos y minimiza el tiempo de intervención. A diferencia de los kits de otros proveedores, el miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit combina facilidad de uso y un protocolo sin fenol sin poner en riesgo la calidad ni el rendimiento del ARN (véase la figura  Rendimientos comparables o mejores).

El miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit posibilita la purificación automatizada de ARN total sin células (principalmente miARN y otro ARN pequeño), a partir de 20-200 µl de plasma humano o animal con el instrumento QIAcube HT. Las propiedades de unión selectiva de una membrana de sílice se combinan con un formato de 96 pocillos de alto rendimiento para el procesamiento simultáneo y totalmente automatizado de 24-96 muestras en el instrumento QIAcube HT. El kit combina la lisis de las muestras con guanidina, un paso de eliminación de inhibidores y la purificación del ARN total con membrana de sílice.

El sistema proporciona dos protocolos, un protocolo de transferencia para trasladar el lisado del paso de precipitación de proteínas a la placa RNeasy 96 y el protocolo de aislamiento de ARN libre de células para extraer miARN del lisado. Los procedimientos producen ARN de alta calidad que funciona bien en aplicaciones posteriores.

La lisis se realiza manualmente en condiciones altamente desnaturalizantes con tiocianato de guanidina para inactivar inmediatamente las RNasas y garantizar la purificación del ARN intacto (véase la figura  Procedimiento del miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit).

Una vez iniciada la serie, se añade isopropanol al sobrenadante que contiene ARN para proporcionar las condiciones de unión adecuadas para todas las moléculas de ARN a partir de aproximadamente 18 nucleótidos (nt). Posteriormente, las muestras se transfieren (manual o automáticamente) a los pocillos de la placa RNeasy 96. El ARN total se une y los contaminantes se lavan de manera eficaz. A continuación, el ARN de alta calidad se eluye en agua sin RNasa, listo para su uso en cualquier aplicación posterior.

El miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit aísla ARN total sin células y exosomas a partir de plasma o suero. Las aplicaciones posteriores incluyen:

• Descubrimiento de biomarcadores
• Creación de perfiles de expresión
• Secuenciación de última generación
• Real-time RT-PCR cuantitativa
• Análisis de micromatrices