miRCURY LNA miRNA Power Target Site Blockers

Los miRCURY LNA miRNA Power Target Site Blockers son oligonucleótidos antisentido que se unen al sitio de corte de miARN de una ARNm, lo que impide que los miARN obtengan acceso a ese sitio. Esto le permite estudiar los efectos de un miARN en una sola diana. Los miRCURY LNA miRNA Power Target Site Blockers son eficientes en concentraciones muy bajas y debido a su alta afinidad a causa de la mejora con LNA, los bloqueadores del sitio de corte superan a los miARN en sus sitios de corte.

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Descubra la función del miARN con los bloqueadores del sitio de corte

Los miARN suelen regular la expresión génica de varias dianas y la inhibición de un miARN resultará en la depresión de todas estas dianas. Por lo tanto, un fenotipo observado tras la inhibición de miARN es un resultado compuesto de la depresión de varias dianas (consulte la figura  Inhibidores de miARN frente a los bloqueadores del sitio de corte). Sin embargo, a menudo, la desregulación de algunas de estas dianas contribuirá significativamente al fenotipo. Es importante identificar estas dianas para comprender la función del miARN.
Los miRCURY LNA miRNA Power Target Site Blockers se pueden usar para:

• Determinar qué vía participa en un fenotipo observado tras la inhibición del miARN
• Determinar cuáles son las interacciones de miARN/mARN más importantes en una vía que contiene varias dianas previstas

En las figuras se describen ejemplos de aplicaciones de bloqueadores del sitio de corte  Ejemplos de aplicaciones de bloqueadores del sitio de corte: vías X e Y y  Ejemplos de aplicaciones del sitio de corte: vía Z.
La figura  El bloqueador del sitio de corte de la diana CAV1 crea una fenocopia del inhibidor de miR-199a-5p en muchos aspectos importantes muestra un ejemplo del uso de un bloqueador del sitio de corte para demostrar cómo funciona miR-199a-5p como un efector clave de la señalización de TGFβ en los fibroblastos pulmonares.

¿Qué son los bloqueadores del sitio de corte?

Los miRCURY LNA miRNA Target Site Blockers son oligonucleótidos antisentido  mejorados con LNA que se unen al sitio de corte de miARN de un ARNm, lo que impide que los miARN obtengan acceso a ese sitio. Esto permite a los investigadores estudiar los efectos de un miARN en una sola diana. En contraste, el fenotipo observado al inhibir un miARN refleja los efectos combinados de ese miARN en todas las dianas.

Bloqueadores del sitio de corte mejorados con LNA

La incorporación de LNA en el miRCURY LNA miRNA Power Target Site Blocker significa que competirán con mayor eficacia con el complejo de miARN/RISC por el sitio de corte de miARN. Además, la distribución de LNA a lo largo del mixmer de LNA/ADN garantiza que el oligonucleótido antisentido no catalice la degradación del ARNm que depende del RNasa H. Como resultado, el TSB causará un aumento en la expresión de la proteína codificada por el ARNm dirigido al impedir la atenuación traslacional mediada por miARN (consulte la figura  Los bloqueadores del sitio de corte mejorados con LNA compiten eficazmente con RISC por el sitio de unión de miARN).

Tras la resuspensión, los miRCURY LNA miRNA Target Site Blockers se transfectan en células con un reactivo de transfección o a través de electroporación. Los efectos fenotípicos del bloqueador del sitio de corte normalmente se evalúan entre 24 y 72 horas después de la transfección. Para algunas aplicaciones, como los ensayos de diferenciación celular, la lectura fenotípica puede tardar entre 7 y 10 días tras la transfección.

Los miRCURY LNA miRNA Power Target Site Blockers se pueden usar para:

• Determinar qué vía participa en un fenotipo observado tras la inhibición del miARN
• Determinar cuáles son las interacciones de miARN/ARNm más importantes en una vía que contiene varias dianas previstas