比類ない高い感度・再現性を実現したリアルタイムPCRシステム
- 遠心エアコントロール方式でサンプル間の高い温度均一性を実現(±0.02℃)
- UVから赤外線領域までをカバーする広範囲にわたる光学システムに対応
- 使いやすいソフトウェアで最新の解析をサポート
- 適応性の高いデザインにより最高の簡便性と最低限のメンテナンス
- QIAGENアッセイと併用し各種アプリケーションで良好な結果を実現
QIAGEN のリアルタイムPCR 装置Rotor-Gene Qは、最高のパフォーマンスを実現するために数多くの工夫がなされており、研究ニーズにマッチした最適な結果を実現します。また、リアルタイムPCR用に至適化済みのQIAGENキットと組み合わせることにより、Rotor-Gene Q は様々なアプリケーションに効率よく対応することができます。
ja-JP
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製品名
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Cat. no.
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List price:
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Rotor-Gene Q 2plex HRM Platform
Real-time PCR cycler and High Resolution Melt analyzer with 2 channels (green, yellow) plus HRM channel, laptop computer, software, accessories: includes 1-year warranty on parts and labor, installation and training not included
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9001560
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Rotor-Gene Q 2plex HRM System
Real-time PCR cycler and High Resolution Melt analyzer with 2 channels (green, yellow) plus HRM channel, laptop computer, software, accessories: includes 1-year warranty on parts and labor, installation and training
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9001630
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Rotor-Gene Q 2plex HRM Priority Package
Real-time PCR cycler and High Resolution Melt analyzer with 2 channels (green, yellow) plus HRM channel, laptop computer, software, accessories: includes Priority Package with software, installation, training, 2-year warranty on parts and labor, and 2 preventive maintenance visits
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9001863
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Rotor-Gene Q 2plex HRM Priority Package Plus
Real-time PCR cycler and High Resolution Melt analyzer with 2 channels (green, yellow) plus HRM channel, laptop computer, software, accessories: includes includes Priority Package with software, installation, training, 3-year warranty on parts and labor, and 3 preventive maintenance visits
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9001864
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Rotor-Gene Q 2plex Platform
Real-time PCR cycler with 2 channels (green, yellow), laptop computer, software, accessories: includes 1-year warranty on parts and labor, installation and training not included
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9001550
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Rotor-Gene Q 2plex System
Real-time PCR cycler with 2 channels (green, yellow), laptop computer, software, accessories: includes 1-year warranty on parts and labor, installation and training
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9001620
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Rotor-Gene Q 2plex Priority Package
Real-time PCR cycler with 2 channels (green, yellow), laptop computer, software, accessories: includes Priority Package with software, installation, training, 2-year warranty on parts and labor, and 2 preventive maintenance visits
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9001861
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Rotor-Gene Q 2plex Priority Package Plus
Real-time PCR cycler with 2 channels (green, yellow), laptop computer, software, accessories: includes Priority Package with software, installation, training, 3-year warranty on parts and labor, and 3 preventive maintenance visits
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9001862
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Rotor-Gene Q 5plex HRM Platform
Real-time PCR cycler and High Resolution Melt analyzer with 5 channels (green, yellow, orange, red, crimson) plus HRM channel, laptop computer, software, accessories: includes 1-year warranty on parts and labor, installation and training not included
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9001580
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Rotor-Gene Q 5plex HRM System
Real-time PCR cycler and High Resolution Melt analyzer with 5 channels (green, yellow, orange, red, crimson) plus HRM channel, laptop computer, software, accessories: includes 1-year warranty on parts and labor, installation and training
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9001650
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Rotor-Gene Q 5plex HRM Priority Package
Real-time PCR cycler and High Resolution Melt analyzer with 5 channels (green, yellow, orange, red, crimson) plus HRM channel, laptop computer, software, accessories: includes Priority Package with software, installation, training, 2-year warranty on parts and labor, and 2 preventive maintenance visits
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9001867
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Rotor-Gene Q 5plex HRM Priority Package Plus
Real-time PCR cycler and High Resolution Melt analyzer with 5 channels (green, yellow, orange, red, crimson) plus HRM channel, laptop computer, software, accessories: includes Priority Package with software, installation, training, 3-year warranty on parts and labor, and 3 preventive maintenance visits
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9001868
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Rotor-Gene Q 5plex Platform
Real-time PCR cycler with 5 channels (green, yellow, orange, red, crimson), laptop computer, software, accessories: includes 1-year warranty on parts and labor, installation and training not included
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9001570
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Rotor-Gene Q 5plex System
Real-time PCR cycler with 5 channels (green, yellow, orange, red, crimson), laptop computer, software, accessories: includes 1-year warranty on parts and labor, installation and training
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9001640
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Rotor-Gene Q 5plex Priority Package
Real-time PCR cycler with 5 channels (green, yellow, orange, red, crimson), laptop computer, software, accessories: includes Priority Package with software, installation, training, 2-year warranty on parts and labor, and 2 preventive maintenance visits
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9001865
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Rotor-Gene Q 5plex Priority Package Plus
Real-time PCR cycler with 5 channels (green, yellow, orange, red, crimson), laptop computer, software, accessories: includes Priority Package with software, installation, training, 3-year warranty on parts and labor, and 3 preventive maintenance visits
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9001866
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Rotor-Gene Q 6plex Platform
Real-time PCR instrument with 6 channels (blue, green, yellow, orange, red, crimson), including laptop computer, software, accessories: includes 1-year warranty on parts and labor, installation and training not included
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9001590
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Rotor-Gene Q 6plex System
Real-time PCR instrument with 6 channels (blue, green, yellow, orange, red, crimson), including laptop computer, software, accessories: includes 1-year warranty on parts and labor, installation and training
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9001660
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Rotor-Gene Q 6plex Priority Package
Real-time PCR instrument with 6 channels (blue, green, yellow, orange, red, crimson), including laptop computer, software, accessories: includes Priority Package with software, installation, training, 2-year warranty on parts and labor, and 2 preventive maintenance visits
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9001869
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Rotor-Gene Q 6plex Priority Package Plus
Real-time PCR instrument with 6 channels (blue, green, yellow, orange, red, crimson), including laptop computer, software, accessories: includes Priority Package with software, installation, training, 3-year warranty on parts and labor, and 3 preventive maintenance visits
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9001870
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Rotor-Gene ScreenClust HRM Software
Software CD, user guide
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9020147
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RGQ, Full Agreement, no PM
Instrument repair service for the Rotor-Gene Q at regional repair center. Shipping, labor and parts costs included during the Full Agreement period. Loaner instrument provided within 2–3 business days. Instrument repair turnaround time of 7–10 business days.
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9241781
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RGQ, Full Agreement
Instrument repair service for the Rotor-Gene Q at regional repair center. Shipping, labor and parts included during the Full Agreement period. Loaner instrument provided within 2–3 business days. Instrument repair turnaround time of 7–10 business days. Includes one on-site Preventive Maintenance or Inspection Service during the Full Agreement period.
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9242698
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RGQ, Core Agreement
One-time Rotor-Gene Q instrument repair performed at a regional repair center including shipping, labor, and spare parts for a period of one year. Instrument repair turnaround time of 7–10 business days. Includes one on-site Preventive Maintenance or Inspection Service and a 10% discount on additional repair service during the Core Agreement period.
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9245253
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The Rotor-Gene Q, if used in combination with QIAGEN kits indicated for use with the Rotor-Gene Q instrument, is intended for the applications described in the respective QIAGEN kit handbooks. If the Rotor-Gene Q instrument is used with kits other than QIAGEN kits, it is the user’s responsibility to validate the performance of such product combination for any particular application. See trademarks.
クラス IV SNPの検出|正確なリアルタイムPCR解析|メチル化DNAの高感度な検出|Rotor-Gene Qの断面図|多様なフォーマット|
野生型(青)、ホモ変異体(緑)、ヘテロ接合体(赤)サンプル由来のゲノムDNAを用いてヒトAHRR7遺伝子のA/T SNPを解析した。Type-it HRM PCR Kit とHRMチャンネル搭載のRotor-Gene Q サイクラーを用いて実験を行なった。データ解析はRotor-Gene ScreenClust HRM Software のカスタマイズモードで行なった。AA とTT の多型(クラス IV SNP)はホモ接合体間の融解温度の差異が非常に少ないため(本実験では0.1℃以下)、識別が最も困難である。[A] HRMの生データ、 [B] cluster plot。全サンプルとも遺伝子型に従って正確にクラスタリングされた。|[A] ヒトゲノムDNAの2 倍段階希釈液(30 ng ~ 0.060 ng、10,000 コピー~ 20 コピー)をテンプレートとしてリアルタイムPCRを行なった。各希釈液について5反応(replicate)をIL1R2について自己設計TaqManアッセイおよび Rotor-Gene Probe PCR Kit を用いてRotor-Gene Q上で行なった。全希釈液サンプル間のCT 値の差の平均は、1.07 サイクルであった。[B] BCL2用にデザインしたTaqManアッセイ、Rotor-Gene Probe PCR Kit、Rotor-Gene Qを用いて、ROX 補正なしにヒトゲノムDNA のリアルタイムPCRを72 replicate で行なった。平均CT 値は24.94 で、標準偏差は0.05、CV 値は0.2 %であった。|メチル化DNA と非メチル化DNA を異なる割合で混合した溶液(EpiTect Control DNA)をテンプレートとして用いた。APC 遺伝子のプロモーター領域にあるCpG アイランドを増幅し、メチル化の程度をEpiTect HRM PCR Kit を用いてRotor-Gene QでのHRM メチル化解析により測定した。[A] HRM 解析融解曲線、および[B] 50 %メチル化サンプルを基準として表示したDifference Plot。|遠心エアコントロールによりエアチャンバー内の迅速な加熱/冷却を実現する。チューブは遠心により150 ミリ秒ごとに励起/検出の光路を通過するため、高速なデータ収集が可能である。6 種類のLED 光源は、6 種類の異なる検出フィルターおよび高感度な光電子倍増管検出器(PMT)と組み合わせて使用できる。||
パフォーマンス
Rotor-Gene Q は、最も困難とされているclass IV SNP (AT 置換) のHRMによる判別が可能な唯一のリアルタイムPCR 装置です。専用のQIAGEN HRM Kit を使用したHRMはジェノタイピング (Type-it HRM PCR Kitのデータの図 " Class IV SNP のタイピング" )、メチル化解析(EpiTect HRM PCR Kitのデータの図 " 高感度なメチル化DNAの検出")、遺伝子スキャニング、sequence matching などのアプリケーションにご利用いただけます。Type-it HRM PCR Kit は遺伝子変異やSNPを迅速かつ正確に検出します。EpiTect HRM PCR Kit はBisulfite変換DNAのCpG メチル化状態の変化について迅速なスクリーニングと正確な検出を実現します。
原理
遠心エアコントロール方式による卓越した性能遠心エアコントロール方式を採用した Rotor-Gene Q は、市販されているこれまでのリアルタイムPCR装置の中で、最も精密性と機能性に富んでいます(図 "Rotor-Gene Q の断面図")。遠心エアコントロール方式では、サンプルローターが常に遠心されていることにより、反応サンプル間の温度均一性を高く保持します(±0.02 ℃)。どのサンプルも同様に均一に検出全てのサンプルは回転しながら光源/検出器間の光路上を通過し、光源/サンプル/検出器の一定した短い光学的距離でその蛍光シグナルを迅速に得ることができます。このように温度および光学的に均一であるため、感度の高い正確かつ迅速なリアルタイムPCR解析結果が得られ(図 "正確なリアルタイムPCR 解析")、またサンプル間のばらつきやエッジ効果をなくします。これらは、従来のブロックベースの機器では、ブロック全体の温度勾配や複数の複雑な光経路のため避けられない問題でした。 遠心エアコントロール方式の特長: チューブ間のばらつきは ±0.02℃ 均一な検出により、ROX のようなリファレンス色素が不要 高速な加熱・冷却機構によるランニング時間の短縮 高い感度と再現性 広い光源領域で様々なアプリケーションを実現Rotor-Gene Q は、SYBR® Green のようなインターカレーター色素や、加水分解プローブ(TaqMan プローブ)、ハイブリダイゼーションプローブ(FRET プローブ)、Scorpion プローブ、その他幅広い蛍光波長の検出に最適です。搭載波長は、UVから赤外波長まで、最高6 チャンネルを搭載しています。さらに、ソフトウェア上での簡単な設定により、それぞれの励起光源/検出フィルターの組み合わせをカスタムで作製できるので、特殊な波長の色素にもRotor-Gene Q は対応可能です。
| 蛍光検出用チャンネルチャンネル励起波長 (nm) | 検出波長 (nm) | 検出可能な蛍光色素の例 | | Blue | 365 ± 20 | 460 ± 20 | Marina Blue、Edans、Bothell Blue、 | Alexa Fluor 350、AMCA-X | | Green | 470 ± 10 | 510 ± 5 | FAM、SYBR® Green I、Fluorescein、 | EvaGreen、Alexa Fluor 488 | | Yellow | 530 ± 5 | 557 ± 5 | JOE、VIC、HEX、TET、MAX、CAL Fluor Gold 540、Yakima Yellow | | Orange | 585 ± 5 | 610 ± 5 | ROX、CAL Fluor Red 610、Cy 3.5、 | Texas Red、Alexa Fluor 568 | | Red | 625 ± 5 | 660 ± 10 | Cyanine 670、Quasar 670、LightCycler | Red640、Alexa Fluor 633 | | Crimson | 680 ± 5 | 712 高域 | Quasar 705、LightCycler Red705、 | Alexa Fluor 680 | | HRM | 460 ± 20 | 510 ± 5 | SYBR® Green I、SYTO9、LC Green、 | LC Green Plus+、EvaGreen |
HRM 解析によるPCR 産物の識別High Resolution Melt(HRM)解析とは、融解曲線解析を極めて精度の高い温度分解能を利用して、わずかなTm 値の差を検出することができる技術です。HRM法は、二本鎖PCR産物を解離(融解)性に基づいて解析します。古典的な融解曲線解析に類似していますが、幅広いアプリケーション用にさらに多くの情報が得られます。PCR産物は、その塩基組成(GC 含量)、配列、長さなどに依存した産物特有の解離温度(Tm 値)を有します。Rotor-Gene Q の温度分解能は±0.02 ℃であるため、PCR 産物中に1塩基の違いがあっても、高感度に検出することができます。Rotor-Gene Q の遠心エアコントロール方式による卓越した温度均一性と光学的均一性はHRM に最適です。 Rotor-Gene Q のHRM 機能の特長: 専用のHRM 励起チャンネルを搭載 ±0.02 ℃の超高温度分解能による厳密な識別 高速データ収集 自動ジェノタイピング機能を搭載したソフトウェア 最小限のメンテナンスで最大の簡便さRotor-Gene Q は、日常のメンテナンスが必要なく、使いやすい設計になっています。そのため、装置本体のメンテナンスにかける時間を低減し、研究に集中することが可能です。 Rotor-Gene Q の特長: 非常に安定したLED使用のため、高価なランプやレーザーの交換が不要で、光源性能が徐々に低下することが少ない 設置時や機器移動時に必要とされる光学的補正は不要 ブロック型のような清掃が不要 回転により反応中の結露や気泡が発生しない 小さくて軽い装置なので使いやすく、ラボのどこにでも設置可能
操作手順
スループットに応じて変更できる多様なフォーマットRotor-Gene Q は多様なニーズに対応するため、様々なPCR チューブフォーマットを使用できます(図 "多様なフォーマット")。チューブを搭載するローターを取り替えるだけでフォーマットをわずか数秒で変更できます。よりスループットの高い実験系には、Rotor-Disc が使用できます。Rotor-Disc は、円周上にサンプルウェルが配置された円形プレートです。Rotor-Disc 100を用いることで、96サンプルプレート処理と同等のスループットを実現することができ、残りの4ウェルはコントロール反応などに使用することができます。余ったウェルは、追加の反応や追加コントロールに便利に使用することができます。72ウェルのRotor-Disc 72 もあります。Rotor-Disc は、Rotor-Disc Heat Sealer を用いてプラスチックフィルムで簡単かつ迅速にシールできます。Rotor-Disc を使用する反応で必要なものは全て Rotor-Disc 100 Starter Kit あるいはRotor-Disc 72 Starter Kit に入っています。 マニュアルで反応セットアップを行なうことも、QIAGENの自動化ソリューションであるQIAgiliyを利用して迅速かつ高精度のPCRセットアップを行なうこともできます。また、QIAsymphony ASは、日常的にルーチンのPCRテストを行なうラボに最適です。どちらの装置もRotor-Gene フォーマットの自動反応セットアップを行なうことができ、サンプルリストの直接転送が可能で、リアルタイムPCRマスターミックス用の検証済みプロトコールが付属しています。 装置の定期的なバリデーションも実施可能検査機関や診断を目的とした研究施設では、使用しているサーマルサイクラーの温度精度のバリデーションを定期的に実施することを求められる場合があります。Rotor-Gene Q では、温度精度の自動キャリブレーションを行なう専用ローター"Rotor-Disc OTV(Optical Temperature Verification)Kit"をセットしてランニングするだけで、自動的に装置の温度キャリブレーションを実施することができます。全操作は、わずか数分なので、ほかの装置のようなサービスエンジニアの出向も要請する必要もなく、費用対効果も高く効率的です。
アプリケーション
数々のRotor-Gene Q用QIAGEN キットは、反応条件やサイクル条件の至適化の必要がなく、リアルタイムPCR アプリケーションにおいて信頼できる定量を実現します。以下の分野におけるリアルタイムPCR およびHRMに特化したキットを販売しています。 -
遺伝子発現解析 -
病原体検出 -
DNA メチル化解析 -
ジェノタイピングおよび遺伝子スキャニング -
miRNA 研究
ソフトウェア
定量化を可能にし、データの信頼性を向上するソフトウェアこの包括的なRotor-Gene Q software packageは、基本的から高度なアルゴリズムを搭載しており現在最高水準のリアルタイムPCR解析手順をサポートします。これにより、お客様の価値ある実験データ解析の自由度と結果に対する信頼性が増します。データはランを開始してから結果を出力するまでの全てのプロセスのステップをトラッキングできることで確実になります。 HRM解析を用いたジェノタイピングおよび変異検出用の優れたソフトウェアRotor-Gene ScreenClust HRM SoftwareはRotor-Gene operating softwareの拡張版です。このソフトウェアはRotor-Gene QまたはRotor-Gene 6000サイクラーから得られたHRMデータの解析のために現在使用されている最も強力なツールです。サンプルをクラスタごとに分類することで、Rotor-Gene ScreenClust HRM Softwareはジェノタイピングおよび変異スクリーニングのようなアプリケーション用のHRM解析の新しい局面を展開します。
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Feature
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Specifications
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Altitude
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Up to 2000 m (6500 ft.)
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Dimensions
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Width, 37 cm (14.6 in.); Height, 28.6 cm (11.3 in.); Depth (without cables), 42 cm (16.5 in.); Depth (door open), 53.8 cm (21.2 in.)
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Features
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Dynamic range, 10 orders of magnitude
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Heat dissipation/thermal load
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Average, 0.183 kW (632 BTU/hour); Peak, 0.458 kW (1578 BTU/hour)
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Humidity
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10–75% (noncondensing)
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Kits designed for this instrument
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artus QS-RGQ Kits (not available in all countries), RG SYBR Green PCR Kits; RG SYBR Green RT-PCR Kit; RG Probe PCR Kits; RG Probe RT-PCR Kit; RG Multiplex PCR Kit
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Operating temperature
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18-30ºC (64-86ºF)
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Optical System
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Up to 6 channels spanning UV to infra-red wavelengths; Excitation sources: High energy light-emitting diodes; Detector: Photomultiplier; Acquisition time: 4 s. The software allows to create new excitation/detection wavelength combinations
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Overvoltage category
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II
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Place of operation
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For indoor use only
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Pollution level
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2; Environmental class 3K2 (IEC 60721-3-3)
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Power
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100–240 V AC, 50–60 Hz, <520 VA (peak); Power consumption <60 VA (standby); Mains supply voltage fluctuations are not to exceed 10% of the nominal supply voltages; F5a 250 V fuse
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Protocols/main application on this instrument
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Gene expression analysis, microRNA detection, Virus detection, SNP genotyping, SNP genotyping, High Resolution Melt analysis (HRM)
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Samples per run (throughput)
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Tubes 0.2 ml; Strip Tubes 0.1 ml (4 tubes); Rotor-Disc 72; Rotor-Disc 100; Up to 100 samples per run using a Rotor-Disc 100
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Software
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Rotor-Gene Q software, supplied on the installation CD provided
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Storage conditions
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15ºC to 30ºC (59ºF to 86ºF) in manufacturer’s package; Max. 75% relative humidity (noncondensing); Environmental class 1K2 (IEC 60721-3-1)
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Technology
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Real-time PCR cycler
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Thermal performance
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Temperature range, 35 to 99ºC; Temperature accuracy, ±0.5ºC (type, measured 30 seconds after clock start); Temperature resolution, ±0.02ºC (smallest programmable increment); Temperature uniformity, ±0.02ºC; Ramp rate (peak ramp rates, air), >15ºC/s heating, >20ºC/s cooling
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Transportation conditions
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–25ºC to 60ºC (–13ºF to 140ºF) in manufacturer’s package; Max. 75% relative humidity (noncondensing); Environmental class 2K2 (IEC 60721-3-2)
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Typical run time
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40 cycles in 45 min with the QIAGEN RG Kits (assay dependent)
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Warranty
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1 year on instrument; lifetime guarantee on excitation LEDs
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Weight
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12.5 kg (27.6 lb.), standard configuration
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FAQ ID -1141
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FAQ ID -1430
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FAQ ID -1519
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FAQ ID -2079
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FAQ ID -2080
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FAQ ID -2081
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FAQ ID -2082
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FAQ ID -2083
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FAQ ID -2085
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FAQ ID -2087
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FAQ ID -2088
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FAQ ID -2089
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FAQ ID -2091
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FAQ ID -2092
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FAQ ID -2093
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FAQ ID -2104
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FAQ ID -2105
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FAQ ID -2116
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FAQ ID -2117
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FAQ ID -2118
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FAQ ID -2119
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FAQ ID -2121
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FAQ ID -2122
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FAQ ID -2123
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FAQ ID -2124
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FAQ ID -2125
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FAQ ID -2126
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FAQ ID -2128
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FAQ ID -2131
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FAQ ID -2142
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FAQ ID -2150
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FAQ ID -2153
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FAQ ID -2455
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FAQ ID -2459
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FAQ ID -2566
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FAQ ID -2567
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FAQ ID -2568
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FAQ ID -2607
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FAQ ID -2670
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FAQ ID -2714
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FAQ ID -2198
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FAQ ID -2199
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FAQ ID -2200
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FAQ ID -2201
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FAQ ID -2202
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FAQ ID -2203
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FAQ ID -2204
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FAQ ID -2205
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For verification of thermal accuracy of Rotor-Gene real-time cyclers
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For use with Rotor-Gene Q Software version 2.3.4
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For Rotor-Gene Q instruments using Rotor-Gene Q Software version 2.3.4
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Guideline for ISO 20836:2020
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For use with Rotor-Gene Q instruments and Q-Rex Software version 1.0
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Alternative options for the optical drive (DVD-ROM drive) on the Rotor-Gene Q Notebook, Part Number 9026760
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Fast and Integrated Screening Workflow to Assess Gene Expression of Individual Pathways
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For use with the Q-Rex Software v1.0 or higher to calculate absolute concentration of targets by PCR. The plug-in is dedicated to our customers
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For use with the Q-Rex Software v1.0 to calculate absolute concentration of targets by PCR
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For use with the Q-Rex Software v.1.0 or higher to visualize fluorescence data and determine quantification cycle values based on an automatic user independent threshold algorithm.
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For use with the Q-Rex Software v1.0 to classify the genotypes of
unknown samples.
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New Gene Expression Analysis Plug-in for the Q-Rex Software
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For use with the Q-Rex Software v1.0 for determination of genotypes using High-Resolution Melting analysis.
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For use with the Q-Rex Software v1.0 or higher for determination of genotypes using Melt Curve Analysis.
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For use with the Q-Rex Software v1.0 or higher to detect targets
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For use with Q-Rex Software version 1.0 to perform relative quantitation analyses
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For use with the Q-Rex Software v1.0 for determination of genotypes using Melt Curve Analysis. This user manual provides information about the functions and features of the Q-Rex Melt Curve Analysis
plug-in.
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For use with the Q-Rex Software version 1.1 to detect targets by PCR
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For use on the Rotor-Gene Q. Rotor-Gene Q software 2.3.5 is compatible with Windows 7 and Windows 10 operating systems.
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For operating and data acquisition with Rotor-Gene Q. Q-Rex Software 1.1.0 is compatible with Windows 7 and 10 operating systems. Additional plug-ins are available to further analysis needs
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For use with the Q-Rex Software v1.0 or higher to create new experiments quickly and easily based on existing QIAGEN kit templates.
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For use with Q-Rex Software to import sample information from QIAgility instruments
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For use with Q-Rex Software version 1.0 to calculate absolute concentration of targets by PCR. This user manual provides information about the functions and features of the Q-Rex Absolute Quantification
HID plug-in.
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For use with Q-Rex Software version 1.0 to calculate absolute concentration of targets by PCR
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For use with the Q-Rex Software v1.0 to determine quantification cycle values
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For use with the Q-Rex Software v1.0 to classify the genotypes of
unknown samples. This user manual provides information about the functions and features of the Q-Rex End-Point Analysis plug-in.
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For use with the Q-Rex Software v1.0 for determination of genotypes
using High-Resolution Melting analysis. This user manual provides information about the functions and features of the Q-Rex HRM Analysis plug-in.
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For use with Rotor-Gene Q instruments and Q-Rex Software version 1.1
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Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
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画像
クラス IV SNPの検出
野生型(青)、ホモ変異体(緑)、ヘテロ接合体(赤)サンプル由来のゲノムDNAを用いてヒトAHRR7遺伝子のA/T SNPを解析した。Type-it HRM PCR Kit とHRMチャンネル搭載のRotor-Gene Q サイクラーを用いて実験を行なった。データ解析はRotor-Gene ScreenClust HRM Software のカスタマイズモードで行なった。AA とTT の多型(クラス IV SNP)はホモ接合体間の融解温度の差異が非常に少ないため(本実験では0.1℃以下)、識別が最も困難である。[A] HRMの生データ、 [B] cluster plot。全サンプルとも遺伝子型に従って正確にクラスタリングされた。
正確なリアルタイムPCR解析
[A] ヒトゲノムDNAの2 倍段階希釈液(30 ng ~ 0.060 ng、10,000 コピー~ 20 コピー)をテンプレートとしてリアルタイムPCRを行なった。各希釈液について5反応(replicate)をIL1R2について自己設計TaqManアッセイおよび Rotor-Gene Probe PCR Kit を用いてRotor-Gene Q上で行なった。全希釈液サンプル間のCT 値の差の平均は、1.07 サイクルであった。[B] BCL2用にデザインしたTaqManアッセイ、Rotor-Gene Probe PCR Kit、Rotor-Gene Qを用いて、ROX 補正なしにヒトゲノムDNA のリアルタイムPCRを72 replicate で行なった。平均CT 値は24.94 で、標準偏差は0.05、CV 値は0.2 %であった。
メチル化DNAの高感度な検出
メチル化DNA と非メチル化DNA を異なる割合で混合した溶液(EpiTect Control DNA)をテンプレートとして用いた。APC 遺伝子のプロモーター領域にあるCpG アイランドを増幅し、メチル化の程度をEpiTect HRM PCR Kit を用いてRotor-Gene QでのHRM メチル化解析により測定した。[A] HRM 解析融解曲線、および[B] 50 %メチル化サンプルを基準として表示したDifference Plot。
Rotor-Gene Qの断面図
遠心エアコントロールによりエアチャンバー内の迅速な加熱/冷却を実現する。チューブは遠心により150 ミリ秒ごとに励起/検出の光路を通過するため、高速なデータ収集が可能である。6 種類のLED 光源は、6 種類の異なる検出フィルターおよび高感度な光電子倍増管検出器(PMT)と組み合わせて使用できる。
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