QuantiTect Primer Assays

For SYBR® Green-based expression analysis of individual genes using bioinformatically-verified assays
  • Guaranteed results with genomewide, predesigned primers
  • ~100% PCR efficiencies for reliable relative quantification
  • High sensitivity and specificity
  • Accurate quantification over a wide linear range
  • Time and cost savings with SYBR Green detection

QuantiTect Primer Assays are genomewide, bioinformatically validated primer sets for use in SYBR Green-based real-time RT-PCR on any cycler. Assays are available for all genes from human, rat, mouse, and many other species. Each assay for a specific gene is supplied as a lyophilized mix of forward and reverse primers that can be easily reconstituted to obtain a 10x assay solution (reaction components for real-time RT-PCR need to be ordered separately). When used in combination with QuantiFast, QuantiTect, Rotor-Gene, or FastLane Kits for SYBR Green detection, QuantiTect Primer Assays guarantee highly specific and sensitive results in real-time RT-PCR that are comparable to probe-based detection.

製品名 Cat. no. List price:
QuantiTect Primer Assay (200)
For 200 x 50 µl reactions or 400 x 25 µl reactions: 10x QuantiTect Primer Assay (lyophilized) supplied in single tube
Varies
¥20,500
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QuantiTect Primer Assays は分子生物学実験用です。疾病の診断、治療または予防の目的には使用することはできません。


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卓越した感度のリアルタイムRT-PCR|再現性のあるリアルタイムRT-PCR|リアルタイムRT-PCR アッセイの開発に必要な時間を節約|
[A] QuantiTect Primer Assay とQuantiTect SYBR® Green PCR Kit を用いて、あるいは [B] AII社のプローブを用いたアッセイとリアルタイムPCR キットを用いて、ヒト白血球cDNA(1 ng)のMAPK1(プロテインキナーゼ)およびIL6(サイトカイン)をduplicate で定量した。QuantiTect Primer Assay はプローブを用いたアッセイよりもCT 値が低いことから感度の高いことが、また融解曲線解析でシングルピークが得られることから特異性の高いことが示された。|[A] IL8(ケモカイン)用のQuantiTect Primer Assay とQuantiFast SYBR® Green PCR Kit を用いて、様々な量の白血球cDNA をduplicate で解析した。テンプレートなしのコントロール(NTC)も行なった(上昇していない曲線)。[B] 融解曲線解析は高いPCR 特異性を証明している。|QuantiTect Primer Assaysはホームメードの方法に比べて大幅に時間を節約する。|
パフォーマンス

QuantiTect Primer Assays enable reproducible quantification of RNA transcripts over a range of template amounts (see part [A] of figure "Reproducible real-time RT-PCR"). Accurate quantification is guaranteed when the assays are run using QuantiFast SYBR Green Kits or other SYBR Green kits from QIAGEN. The kits prevent the formation of PCR artifacts (see part [B] of figure "Reproducible real-time RT-PCR").

When used with QuantiFast, QuantiTect, Rotor-Gene, or FastLane SYBR Green Kits (master mixes for two-step or one-step RT-PCR), the assays may even give lower CT values compared with probe-based assays (see figure "Superior sensitivity in real-time RT-PCR"). This is due to the high PCR specificity of the kits and multiple binding of SYBR Green dye to each PCR product. Highly sensitive quantification is possible even with low-abundance transcripts.

原理
QuantiTect Primer Assays eliminate the need to develop and validate real-time RT-PCR assays (see figure "Time savings in development of real-time RT-PCR assays"). They can be used in both one-step and two-step qRT-PCR. Simply visit QIAGEN's GeneGlobe Web portal, and select and order an assay for any gene from human, rat, mouse, Drosophila, Arabidopsis, and other species. QuantiTect Primer Assays provide guaranteed results when used with QuantiFast, QuantiTect, Rotor-Gene, or FastLane SYBR Green Kits (master mixes for two-step or one-step RT-PCR).
操作手順

Each QuantiTect Primer Assay is supplied as a lyophilized mix of forward and reverse primers for a specific gene. The primers are reconstituted in TE, pH 8.0 to give a 10x primer solution, which is then added to the master mix supplied with a QuantiFast, QuantiTect, Rotor-Gene, or FastLane Kit for SYBR Green detection. The master mix with primers is aliquoted into PCR tubes or wells, and the individual template samples are then added.

QuantiTect Primer Assays provide guaranteed results in gene expression analysis when used in combination with one of the following kits shown in the table.

Two-step and one-step qRT-PCR kits for use with QuantiTect Primer Assays
Two-step qRT-PCROne-step qRT-PCR
QuantiFast SYBR Green PCR Kit QuantiFast SYBR Green RT-PCR Kit
Rotor-Gene SYBR Green PCR Kit Rotor-Gene SYBR Green RT-PCR Kit
QuantiTect SYBR Green PCR Kit QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit

QuantiTect Primer Assays are designed to detect RNA only where possible. For assays where detection of genomic DNA cannot be avoided, cDNA can be prepared using the QuantiTect Reverse Transcription Kit or the FastLane Cell cDNA Kit. Both kits provide cDNA synthesis with integrated removal of genomic DNA contamination.

Naming

Each QuantiTect Primer Assay available for a particular gene is given a number that appears in the product name after the gene symbol. Read more in the GeneGlobe FAQs.

アプリケーション

QuantiTect Primer Assays are for gene expression analysis using one-step and two-step qRT-PCR with SYBR Green detection. They are highly suited for applications such as:

  • Validation of siRNA-mediated gene knockdown
  • Validation of microarray results
  • High-throughput Screening

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FAQ
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FAQ ID -1065
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キットハンドブック
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For genomewide, ready-to-use real-time RT-PCR assays using SYBR Green detection
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ゲノムワイドで即使用可能なリアルタイムRT-PCRアッセイ(SYBR Green検出)用
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技術情報
1
QuantiTect Primer Assays for housekeeping genes can be used as endogenous controls in qRT-PCR.
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MSDS
1
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
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安全データシート
1

画像
Superior sensitivity in real-time RT-PCR on the StepOnePlus.
卓越した感度のリアルタイムRT-PCR
[A] QuantiTect Primer Assay とQuantiTect SYBR® Green PCR Kit を用いて、あるいは [B] AII社のプローブを用いたアッセイとリアルタイムPCR キットを用いて、ヒト白血球cDNA(1 ng)のMAPK1(プロテインキナーゼ)およびIL6(サイトカイン)をduplicate で定量した。QuantiTect Primer Assay はプローブを用いたアッセイよりもCT 値が低いことから感度の高いことが、また融解曲線解析でシングルピークが得られることから特異性の高いことが示された。
Reproducible real-time RT-PCR on the iCycler iQ.
再現性のあるリアルタイムRT-PCR
[A] IL8(ケモカイン)用のQuantiTect Primer Assay とQuantiFast SYBR® Green PCR Kit を用いて、様々な量の白血球cDNA をduplicate で解析した。テンプレートなしのコントロール(NTC)も行なった(上昇していない曲線)。[B] 融解曲線解析は高いPCR 特異性を証明している。
Time savings in development of real-time RT-PCR assays.
リアルタイムRT-PCR アッセイの開発に必要な時間を節約

QuantiTect Primer Assaysはホームメードの方法に比べて大幅に時間を節約する。