QIAquick PCR Purification Kit

最高10 µgまでのPCR産物(100 bp~10 kb)精製用
  • 即使用可能なDNAの回収率が最高95%
  • 簡単な3ステップで最大10 kbまでのDNAをクリーンアップ
  • ゲル解析をより簡便化するGel Loading Dye付き

QIAquick PCR Purification Kitは、スピンカラムとバッファー、コレクションチューブにより構成され、シリカメンブレンによりPCR産物(100 bp 以上)の精製を実現します。10 kbまでのDNAを簡便で迅速な結合・洗浄・溶出ステップおよび30~50 µlの溶出液により精製できます。オプションのpH指示薬により、DNAがスピンカラムに結合する最適なpHを簡単にチェックできます。本キットはQIAcubeで完全自動化が可能です。

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製品名 Cat. no. List price:
QIAquick PCR Purification Kit (50)
For purification of 50 PCR reactions: 50 QIAquick Spin Columns, Buffers, Collection Tubes (2 ml)
28104
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QIAquick PCR Purification Kit (250)
For purification of 250 PCR reactions: 250 QIAquick Spin Columns, Buffers, Collection Tubes (2 ml)
28106
¥58,000
QIAquick Spin Columns (100)
For DNA fragment purification from PCR, gel fragments and enzymatic reactions
28115
¥14,000
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QIAquick PCR Purification Kit  は分子生物学実験用です。疾病の診断、治療または予防の目的には使用することはできません。


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QIAquickおよびMinEluteの操作手順|PCR反応液からのプライマーの完全な除去|GelPilot Loading Dye|pH 指示薬|Spin Column操作オプション - D|Spin Column操作オプション - E|Spin Column操作オプション - C|Spin Column操作オプション - B|Spin Column操作オプション - A|
QIAquickシステムおよびMinEluteシステムでは、スピンカラムまたは吸引マニホールドによる結合─洗浄─溶出という簡単な操作だけでDNAのクリーンアップが可能。
|QIAquick PCR Purification Kit を用いてPCR反応液を精製する前(b)あるいは精製後(a)のPCR産物解析結果を示す。1% TAEアガロースゲルでサンプルを分析した。M:マーカー。|GelPilot Loading Dye に入っている3種類のマーカー色素によりDNA電気泳動の至適化が容易。

|溶解および結合溶液中のpH指示薬により、DNA吸着の至適pH(pH <7.5)かどうかを簡単に確認することができる。アガロースゲル電気泳動バッファーを繰り返し使用したり、間違って調製した場合に、結合溶液のpHは至適pHより高くなる。このような場合は、3M 酢酸ナトリウム、pH 5.0 を10 µl 添加してpHを簡単に調整することが可能。
|QIAvac 24 Plus|QIAcube
|ルアーコネクター付きマニホールド
|QIAvac 24
|マイクロ遠心機
|
パフォーマンス
QIAquick PCR精製法でDNAサンプルからプライマー、ヌクレオチド、酵素、ミネラルオイル、塩類などの夾雑物を除去することができます(図 “PCR反応液からのプライマーの完全な除去”)。マイクロ遠心機または吸引マニホールドを使用ることにより、100 bp~10 kbのDNAが精製されます。
原理

QIAquick Kitでは、高塩濃度バッファーによりDNAを結合し、低塩濃度バッファーあるいは水によりDNAを溶出するシリカゲルメンブレンを利用しています。この精製法でDNAサンプルからプライマー、ヌクレオチド、酵素、ミネラルオイル、塩、アガロース、臭化エチジウム、およびその他の夾雑物が除去できます(図 “PCR反応液からのプライマーの完全な除去”)。シリカメンブレンテクノロジーにより樹脂漏れ、および懸濁液関連の問題や不便さは解消されます。それぞれの用途に応じて至適化された結合バッファーにより、種々の大きさのDNAフラグメントを選択的に吸着します。

Gel Loading Dye

より迅速で簡便なサンプル処理と解析を実現するため、ゲル電気泳動用のローディング色素が付いています。GelPilot Loading Dye は3 種類のマーカー色素(xylene cyanol、bromophenol blueおよびorange G)が入っており、短いDNAフラグメントのゲルからの流出を回避でき、アガロースゲルの泳動時間の至適化が簡単に行なえます(図 "GelPilot Loading Dye")。

操作手順

QIAquickシステムでは結合─洗浄─溶出という簡単な操作だけでDNAのクリーンアップが可能です(フローチャート"QIAquickおよびMinEluteの操作手順"参照)。結合バッファーをPCRサンプルあるいは他の酵素反応液に直接添加し、混合液をQIAquick Spin Column にアプライします。ゲル切片をpH指示薬を含んだバッファーに溶解させると、DNA 結合の至適pH を容易に決めることができます(図 “pH指示薬”)。DNAは添付のバッファー中の高塩濃度の条件下でシリカゲルメンブレンに吸着します。不純物は洗い流され、純粋なDNAを添付の低塩濃度溶出バッファー、あるいは水で溶出します。 得られたDNAは、幅広いアプリケーションに即使用可能です。

操作法

QIAquick Spin Column は2つの簡便な操作法オプションのためにデザインされました。スピンカラムは簡便な卓上型マイクロ遠心機あるいはQIAvac 24 Plus のようなルアーコネクター付き吸引装置で使用できます。QIAquick PCR Purification Kitは他のQIAGENスピンカラムを利用したキット同様にQIAcubeでの完全自動化が可能で、標準化された再現性の高い結果が得られます(図 "Spin Column操作オプションABCD、およびE")。

アプリケーション

QIAquickシステムで精製したDNAフラグメントは、シークエンシング、マイクロアレイ解析、ライゲーション、トランスフォーメーション、制限酵素解析、標識反応、マイクロインジェクション、PCR、in vitro転写反応などのアプリケーションに即使用可能です。

Feature
Specifications
Binding capacity 10 µg
Elution volume > 30 µl
Format Tube
Fragment size 100 bp – 10 kb
Fragments removed < 40mers
Processing Manual
Sample type: applications ssDNA or dsDNA from PCR and other enzymatic reactions
Technology Silica technology
Type(s) of DNA recovered ss DNA and dsDNA

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FAQ
19
FAQ ID -130
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FAQ ID -148
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FAQ ID -305
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FAQ ID -311
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FAQ ID -2460
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User-Developed Protocols
1
The protocol has been used successfully for Cy3-, Cy5-, and biotin-labeling of cDNA from <50 ng of total RNA or poly A+ mRNA.
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キットハンドブック
3
QIAquick PCR Purification Kit
PCR産物(100 bp~ 10 kb)の精製用

QIAquick Nucleotide Removal Kit
酵素反応液からのヌクレオチド(17~40mer)およびDNA(40 bp~ 10 kb)クリーンアップ用

QIAquick Gel Extraction Kit
ゲル抽出あるいは酵素反応液からのDNA(70 bp~ 10 kb)クリーンアップ用
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References
0
画像
QIAquick 96 on QIAvac 96/BioRobot systems
QIAquickおよびMinEluteの操作手順
QIAquickシステムおよびMinEluteシステムでは、スピンカラムまたは吸引マニホールドによる結合─洗浄─溶出という簡単な操作だけでDNAのクリーンアップが可能。
Complete primer removal after PCR
PCR反応液からのプライマーの完全な除去
QIAquick PCR Purification Kit を用いてPCR反応液を精製する前(b)あるいは精製後(a)のPCR産物解析結果を示す。1% TAEアガロースゲルでサンプルを分析した。M:マーカー。
GelPilot Loading Buffer
GelPilot Loading Dye
GelPilot Loading Dye に入っている3種類のマーカー色素によりDNA電気泳動の至適化が容易。

ILLU_0104_MinElute
pH 指示薬
溶解および結合溶液中のpH指示薬により、DNA吸着の至適pH(pH <7.5)かどうかを簡単に確認することができる。アガロースゲル電気泳動バッファーを繰り返し使用したり、間違って調製した場合に、結合溶液のpHは至適pHより高くなる。このような場合は、3M 酢酸ナトリウム、pH 5.0 を10 µl 添加してpHを簡単に調整することが可能。
Spin Column操作オプション - D
QIAvac 24 Plus
Spin Column操作オプション - E
QIAcube
QIAprep Spin Column handling options
Spin Column操作オプション - C
ルアーコネクター付きマニホールド
QIAprep Spin Column handling options
Spin Column操作オプション - B
QIAvac 24
QIAprep Spin Column handling options
Spin Column操作オプション - A
マイクロ遠心機