Ni-NTA Superflow Cartridges

• Robuste Ein-Schritt-Aufreinigung unter verschiedensten Bedingungen
• Hohe Ausbeuten an hochreinem Protein von bis zu 50 mg/ml
• Schnelle, einfache und reproduzierbare Verarbeitung auf jedem LC-System

Ni-NTA Superflow, das am meisten zitierte Harz bei der Aufreinigung von Proteinen mit His-tag, ist in vorgefüllten 1-ml- und 5-ml-Kartuschen für die automatisierte Aufreinigung auf Flüssigchromatographiesystemen wie FPLC, ÄkTA und BioLogic oder die manuelle Aufreinigung mit einer Spritze verfügbar.

Verglichen mit anderen Harzen überzeugt Ni-NTA durch eine überragende Leistung mit hohen Ausbeuten an hochreinem Protein (siehe Abbildung  Ni-NTA übertrifft andere Harze und liefert hohe Ausbeuten an hochreinen Proteinen). Ein unabhängiger Vergleich mit anderen handelsüblichen Nickel-Harzen zeigte, dass bei Ni-NTA Superflow die Nickelauswaschung (Leaching) am geringsten ausfiel (siehe Abbildung  Eine unabhängige Studie zeigt, dass Ni-NTA weniger Nickel verliert als jedes andere getestete Harz). Dies ist wichtig, da bei Auswaschung von Nickel aus dem Harz die verbleibenden geladenen Liganden als Ionenaustauscher agieren und auch Proteine ohne Tag binden, welche dann die Elutionsfraktionen kontaminieren. Die höhere Stabilität von Ni-NTA bedeutet, dass es selbst in Gegenwart von 10 mM DTT genutzt werden kann, um vollständig aktive, hochreine Proteine zu erhalten (siehe Abbildung  Die zusätzliche Koordinationsstelle von Ni-NTA bindet das Nickelion fester als IDA).

Wie in der Tabelle dargestellt, ist die Reinheit über alle Aufreinigungsmaßstäbe hinweg gleichbleibend hoch. Ni-NTA Superflow Cartridges sind ein Element der umfassenden und komplementären Lösungen, die QIAGEN für Proteine mit His-tag anbietet (siehe Abbildung  Skalierbare Aufreinigung von Proteinen mit His-tag in Nanogramm- bis Gramm-Mengen).

Ni-NTA-Matrizes sind die Affinitätschromatographielösung der Wahl für die Aufreinigung von Proteinen mit His-tag (siehe Abbildung  Effiziente Ein-Schritt-Aufreinigung von Proteinen mit His-tag). Dank ihrer Stabilität sind sie kompatibel mit einem breiten Spektrum an Pufferkomponenten, einschließlich stark denaturierender Agenzien, Detergenzien und sogar reduzierender Agenzien (siehe Tabelle Mit der His/Ni-NTA-Interaktion kompatible Reagenzien). Diese Flexibilität ermöglicht es Forschenden, optimale Aufreinigungsschemata zu entwickeln und gleichzeitig von den ausgezeichneten Trenneigenschaften von Ni-NTA zu profitieren, so dass ein zweiter Chromatographieschritt oft überflüssig wird.

Ni-NTA-Matrizes können verwendet werden, um die Aufreinigung von Proteinen mit His-tag für Strukturuntersuchungen (z. B. durch Proteinkristallographie oder NMR) aufzuskalieren oder Gramm-Mengen für die Produktion von Biopharmazeutika herzustellen.