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Penta·His HRP Conjugate Kit
Cat. No. / ID: 34460
125 μl Penta·His HRP-Konjugat, 5 g Blockierungsreagenz, 50 ml Blockierungsreagenz-Puffer (Konzentrat 10x)
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Kit
Penta·His HRP
RGS·His HRP
Anti·His HRP Conjugate Kits sind für molekularbiologische Anwendungen vorgesehen. Diese Produkte sind nicht zur Diagnose, Prävention oder Behandlung einer Erkrankung vorgesehen.
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Features
- Hochsensitiver und schneller Nachweis von Proteinen mit His-tag, auch mit RGS·His-Epitopen
- Kein sekundärer Antikörper erforderlich
- Optimiertes Blockierungsreagenz enthalten
Product Details
Anti·His HRP Conjugate Kits, einschließlich des RGS·His HRP Conjugate Kits (His-tag-Konjugate) und des Penta·His HRP Conjugate Kits (6xHis-tag-Konjugate), sind für den sensitiven Nachweis von rekombinanten Proteinen mit His-tag vorgesehen. Sekundäre Antikörper sind dabei nicht erforderlich. Sie bestehen aus Anti·His-Antikörpern, die mit Meerrettichperoxidase (HRP) konjugiert sind. Bei den Nachweisverfahren bindet der Anti·His-Antikörper an den His-tag eines Proteins, und der Komplex wird mit chemilumineszenten oder chromogenen Substraten, die mit HRP reagieren, lokalisiert.
Performance
| Eigenschaften | RGS·His HRP Conjugate Kit | Penta·His HRP Conjugate Kit |
|---|---|---|
| Nachweis | N-terminale, C-terminale und interne His-tags (die das Epitop RGSHHHH enthalten) | N-terminale, C-terminale und interne 6xHis-tags |
| Sensitivität bei Dot-Blots* | 10 pg | 10 pg |
| Sensitivität bei Western-Blots* | 50 pg | 50 pg |
| Antikörper-Isotyp | Maus-IgG1 | Maus-IgG1 |
| Kreuzreaktivität | Vernachlässigbar bei E. coli-Rohlysaten, Hefe-, Säuger- oder Insektenzelllysaten | Vernachlässigbar bei E. coli-Rohlysaten, Hefe-, Säuger- oder Insektenzelllysaten |
| Form | Stabilisierte Stammlösung | Stabilisierte Stammlösung |
| Arbeitslösung | 125–250 ml | 125–250 ml |
Principle
Anti·His HRP Conjugate Kits bestehen aus QIAexpress Anti·His-Antikörpern, die chemisch an das Reporterenzym Meerrettichperoxidase (HRP) gekoppelt sind. Sie können für den hochspezifischen und hochsensitiven Direktnachweis jedes rekombinanten Proteins mit einem zugänglichen His-tag verwendet werden. Sie machen den Einsatz von Sekundärantikörpern überflüssig und sparen so Zeit bei Immunnachweisverfahren. Anti·His HRP Conjugate Kits können mit chemilumineszenten oder chromogenen Nachweissubstraten verwendet werden.
Procedure
Das QIAexpress Nachweis- und Assayhandbuch, das mit allen QIAexpress Nachweis- und Assayprodukten geliefert wird, enthält detaillierte Beispielprotokolle und Leitfäden für die Entwicklung und Durchführung von Assays.
Applications
Anti·His HRP Conjugate Kits, einschließlich des RGS·His HRP Conjugate Kits (His-tag-Konjugat) und des Penta·His HRP Conjugate Kits (6xHis-tag-Konjugat), erkennen die gleichen Epitope wie die entsprechenden Antikörper und können für den direkten Chemilumineszenz- oder chromogenen Nachweis von Proteinen mit His-tag bei folgenden Verfahren verwendet werden:
- Western-, Dot- und Kolonie-Blotting-Verfahren
- ELISA und andere Immunassay-Verfahren
Vergleich des RGS·His HRP Conjugate Kits und Penta·His HRP Conjugate Kits
| Eigenschaften | RGS·His HRP Conjugate Kit | Penta·His HRP Conjugate Kit |
|---|---|---|
| Konjugiertes Enzym | HRP | HRP |
| Nachweis | Sekundärer Antikörper erforderlich | Sekundärer Antikörper erforderlich |
| Epitopnachweis | RGSHHHH | HHHHH |
| Substrat für Blot-Nachweis | Biotech ECL | 4C1N |
| Substrate für Assayverfahren | OPD | OPD |
| Tag | His-tag | His-tag |
Anti·His HRP Conjugate Kits sind für molekularbiologische Anwendungen vorgesehen. Diese Produkte sind nicht zur Diagnose, Prävention oder Behandlung einer Erkrankung vorgesehen.
Resources
Safety Data Sheets (2)
Quick-Start Protocols (1)
Kit Handbooks (1)
Supplementary Protocols (1)
Certificates of Analysis (1)
FAQ
What epitopes do the Anti-His Conjugates and Anti-His Antibodies recognize?
Which Anti-His Antibody is the most sensitive for my protein of interest?
Penta-His and Tetra-His Antibody bind to proteins that have 6xHis tags regardless of the surrounding amino-acids, even when the tag is partially hidden. Subtle differences in the antigen recognition sites of these antibodies mean that some 6xHis-tagged proteins are detected with higher sensitivity by one Anti-His Antibody than by the others (see figure below). Therefore, to achieve optimum results, we recommend comparison of these antibodies in parallel for new applications and proteins. QIAGEN offers the Anti-His Antibody Selector Kit for this purpose.
Sensitivity of QIAexpress Anti·His Antibodies
Note: RGS His Antibody regonizes the RGS(His)4 epitope that is found on proteins endcoded by most pQE vectors as well as several pRSETan pBlue BacHis -vectors from Invitrogen.
FAQ ID -172
How can I avoid poor immunolocalization morphology with Anti-His Antibodies?
Can the Blocking Reagent supplied with the Penta-His HRP Conjugate be used with other antibodies?