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miRCURY LNA Custom PCR Panel (8)
Cat. No. / ID: 339330
8 identische, gebrauchsfertige 96- oder 384-Well-Platten; jedes Well enthält ausreichend Primer für eine 10-µl-Reaktion; für den SYBR® Green basierten Nachweis
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Panel
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Additional Plate
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Features
- Vorgefertigte und benutzerdefinierte LNA PCR-Assays kombiniert in gebrauchsfertigen Einweg-Platten
- Anpassung an Ihre bevorzugte Wahl von Plattentyp, Layout, PCR-Gerät und Chargengröße
- Ideal für sensitives, spezifisches und reproduzierbares miRNA-Profiling in mittlerem bis großem Probenaufkommen
- Verwenden Sie unser neues benutzerfreundliches Online-Design-Tool
Product Details
miRCURY LNA miRNA Custom Panels sind gebrauchsfertige 96- und 384-Well-Platten mit einzelnen miRCURY LNA miRNA PCR Assays, die an Ihre speziellen Anforderungen angepasst sind. Sowohl Vorwärts- als auch Rückwärtsprimer für die PCR-Amplifikation sind miRNA-spezifisch und werden mit der LNA-Technologie optimiert, wodurch eine äußerst sensitive und spezifische miRNA-Quantifizierung mit dem miRCURY LNA miRNA PCR System ermöglicht wird. Jedes Well enthält ein Primerset, das für eine 10-µl-Reaktion ausreichend ist.
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Performance
Spitzenleistung in puncto Spezifität
Das miRCURY LNA miRNA PCR System ist die einzige miRNA-Quantifizierungsplattform mit absoluter Spezifität (siehe die in Nature Methods veröffentlichte miRQC-Studie). In Spezifitätstest übertraf es eine andere sondenbasierte miRNA qPCR-Plattform (siehe Abbildung Spezifitätstest im Vergleich mit sondenbasiertem miRNA qPCR-System eines Wettbewerbers). Dies schließt falsch-positive Ergebnisse aus und gewährleistet nur robuste und zuverlässige miRNA-Signale.
Das benutzerfreundliche, 3-stündige Protokoll spart Ihnen Zeit und Aufwand im Labor. Verdünnen Sie einfach die synthetisierte cDNA, kombinieren Sie sie mit dem miRCURY LNA SYBR Green Master Mix und aliquotieren Sie die Mischung auf die PCR-Platte. Sie ist damit fertig für den Lauf in Ihrem Real-time PCR-Gerät. Die Anzahl der Pipettierschritte und damit die technische Variation werden auf ein Minimum reduziert. Dadurch können Sie eine extrem hohe Reproduzierbarkeit von Tag zu Tag und sogar von Standort zu Standort erzielen (siehe Abbildungen Ausgezeichnete Tag-zu-Tag-Reproduzierbarkeit und Ausgezeichnete Korrelation zwischen Standorten). Eine hohe Reproduzierbarkeit ist sogar beim Profiling schwieriger Proben möglich, wie etwa bei aus Serum aufgereinigter RNA (siehe Abbildung Ausgezeichnete Reproduzierbarkeit zwischen RT-Reaktionen mit Gesamt-RNA aus Serum).
See figures
Principle
Designen Sie Ihre eigenen 96- bzw. 384-Well miRNA qPCR-Platten basierend auf einem voll flexiblen Layout und mehreren bequem vordefinierten Layouts. Platzieren Sie vorgefertigte miRCURY LNA miRNA PCR Assays oder Ihre eigenen Custom miRCURY PCR Assays mit einem intuitiven, benutzerfreundlichen Online-Plattenkonfigurator im Panel. Die Panels werden gebrauchsfertig mit einem Assay pro Well für ein Reaktionsvolumen von 10 µl geliefert. Geben Sie einfach cDNA und miRCURY LNA SYBR Green Master Mix hinzu.
Benutzerdefinierte miRNA PCR Panels werden mit einem vorpositionierten Interplate-Kalibrator (IPC) in Replikaten geliefert, die eine optimale Kalibrierung und Bewertung in Studien mit mehreren Platten ermöglichen. Der IPC ist obligatorisch, kann aber zur Anpassung an Ihr bevorzugtes Plattenlayout umpositioniert werden. Außerdem wird das Panel mit einer oder mehreren vorab positionierten UniSp6 RNA Spike-in Controls (CP) angezeigt. RNA-Spike-in-Kontrollen können zur Überwachung der cDNA-Synthese oder der RNA-Aufreinigung verwendet werden. Der UniSp6 CP Assay kann entfernt und durch ein oder mehrere miRNA-Primersets oder andere RNA-Spike-in-Kontrollassays ersetzt werden. Als alternative RNA-Spike-in-Kontrollen stehen UniSp2, UniSp4, UniSp5 oder cel-miR-39-3p zur Verfügung.
Abdeckung
Benutzerdefinierte miRNA PCR Panels sind in 2 verschiedenen Formaten verfügbar:- 96-Well, gebrauchsfertig: Designen Sie Ihre Panels auf der Grundlage eines von drei verfügbaren Layouts. Wählen Sie aus unserer riesigen Auswahl an experimentell validierten LNA miRNA PCR Primersets und Referenzgen-Primersets für die Quantifizierung von miRNA aus Mensch, Maus und Ratte.
- 384-Well, gebrauchsfertig: Designen Sie Ihre Panels auf der Grundlage eines von vier verfügbaren Layouts. Wählen Sie aus unserer riesigen Auswahl an experimentell validierten LNA miRNA PCR Primersets und Referenzgen-Primersets für die Quantifizierung von miRNA aus Mensch, Maus und Ratte.
Benutzerdefinierte miRNA PCR Panels werden mit einem vorpositionierten Interplate-Kalibrator (IPC) in Replikaten geliefert, die eine optimale Kalibrierung und Bewertung in Studien mit mehreren Platten ermöglichen. Der IPC ist obligatorisch, kann aber zur Anpassung an Ihr bevorzugtes Plattenlayout umpositioniert werden. Außerdem wird das Panel mit einer oder mehreren vorab positionierten UniSp6 RNA Spike-in Controls (CP) angezeigt. RNA-Spike-in-Kontrollen können zur Überwachung der cDNA-Synthese oder der RNA-Aufreinigung verwendet werden. Der UniSp6 CP Assay kann entfernt und durch ein oder mehrere miRNA-Primersets oder andere RNA-Spike-in-Kontrollassays ersetzt werden. Als alternative RNA-Spike-in-Kontrollen stehen UniSp2, UniSp4, UniSp5 oder cel-miR-39-3p zur Verfügung.
Hinzufügen von benutzerdefinierten Assays
Es ist jetzt möglich, benutzerdefinierte Assays in Ihre benutzerdefinierte Platte aufzunehmen. Assays können über eines unserer Design-Tools für benutzerdefinierte Assays entwickelt werden. Designen Sie LNA-optimierte PCR-Primer für Sequenzen, die in unseren vordefinierten Assays nicht enthalten sind, wie etwa für mit Next-Generation-Sequencing identifizierte neuartige miRNAs.Procedure
Das Erstellen von miRNA-Expressionsprofilen mit miRCURY LNA miRNA PCR Panels ist unkompliziert und robust. Im ersten Schritt generieren Sie cDNA mit dem miRCURY LNA RT Kit. Im zweiten Schritt geben Sie einen Prämix aus cDNA, miRCURY LNA SYBR Green PCR Master Mix und RNase-freiem Wasser auf ein miRCURY miRNA PCR Panel. Im dritten Schritt führen Sie die Reaktion in einem Real-time-PCR-Thermocycler aus.
Applications
Als Bestandteil des miRCURY LNA miRNA PCR Systems werden miRCURY LNA Custom PCR Panels für folgende Applikationen verwendet:
- Signalweg- und krankheitsfokussiertes miRNA-Profiling
- Entdeckung von Biomarkern
Supporting data and figures
Ausgezeichnete Korrelation zwischen Standorten
Von Aliquoten der gleichen Herz- und Leber-Gesamt-RNA wurden an unterschiedlichen Standorten (an unterschiedlichen Tagen und durch verschiedene Anwender) mit miRCURY LNA miRNA PCR Panels und unterschiedlichen Roche LightCycler 480 Real-Time PCR-Geräten Expressionsprofile erstellt. Dargestellt ist die Korrelation zwischen den Cq-Durchschnittswerten (drei RT-Reaktionen) von allen miRNAs mit einem Signalwert von weniger als 35 Cq (insgesamt 297 Datenpunkte).
Resources
Safety Data Sheets (2)
Quick-Start Protocols (2)
Scientific Posters (1)
Brochures & Guides (2)
Kit Handbooks (2)
Supplementary Protocols (1)
Certificates of Analysis (1)