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GeneRead Pure mRNA Kit

为NGS应用高度选择性、高效纯化mRNA
  • 高效去除几乎所有rRNA(>99%)
  • 不会错误去除poly A+ mRNAs
  • 起始材料仅需100 ng – 5 μg总RNA
  • 便利性极高,手动操作时间短
  • 可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动操作
GeneRead Pure mRNA Kit基于polyA尾巴与oligo-dT高度特异性纯化原理,能够为二代测序应用制备即用型mRNA。本试剂盒通过高效去除多种真核生物中rRNA、非腺苷化RNA、非编码RNA以及其他调控性RNA来实现对于mRNA的富集,进而确保宝贵的测序资源可以得到最佳的利用。GeneRead Pure mRNA Kit的样本制备所需时间不到45分钟,还可借助方便的自动化设备,最大限度地缩短纯化mRNA所需的手工操作时间,具有无可比拟的便捷性。
Cat No./ID: 180244
GeneRead Pure mRNA Kit
For 48 reactions: Pure mRNA Beads, buffers, RNase-Free Water, Small Spin Columns, and Collection Tubes

GeneRead Pure mRNA Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
GeneRead Pure mRNA Kit性能优于其他供应商同类mRNA纯化试剂盒。
以0.5ug总RNA作为起始样本,通过与其他供应商的同类mRNA纯化试剂盒比较可以发现,GeneRead Pure mRNA Kit尽管只有一轮纯化操作,却仍能获得了优异的mRNA富集效果。而使用其他供应商的产品制备的样本中,仍能清晰看到两条rRNA的残留条带。
1
特异性的高效mRNA富集。
进行分析时, 将来自Jurkat细胞的5ug总RNA使用GeneRead Pure mRNA Kit处理后,使用相同的方法来对富集后的样品及总RNA进行文库制备,并同时用于MiSeq系统进行多重的illumina测序。将所获得的序列结果与Biomart数据库对比,并利用每个文库中比对结果中不同生物分子的读段百分比作散点图。rRNA通常显示为低质量的未匹配读段,而rRNA转录物的注释状态通常也是不理想的。
2
便利高效的实验流程。
Performance
卓越的便利性和性价比
GeneRead Pure mRNA Kit包含离心柱和所需的全部试剂及缓冲溶液,能够在45分钟之内从总RNA制备产物中分离出纯polyA+ mRNA。GeneRead Pure mRNA技术结合了磁珠法的操作便利性和oligo-dT杂交法的特异性。高效的实验方案,仅需简短的预处理步骤。而其他供应商的产品操作步骤更为耗时,且通常需要第二轮纯化操作才能获得NGS应用所需的mRNA纯度,因此导致资源消耗和成本的增加。GeneRead Pure mRNA Kit仅以一次纯化即可获得最高纯度的mRNA,是目前市售产品中唯一达到此种标准的试剂盒。使用GeneRead Pure mRNA技术纯化得到的Poly A + mRNA无需进一步纯化操作,即可直接用于NGS等下游应用。

高效去除核糖体RNA
GeneRead Pure mRNA Kit是唯一一款可去除rRNA的mRNA纯化试剂盒,能够以近乎100%的效率去除包括线粒体rRNA在内的rRNA成分。由于本试剂盒具有严格的操作流程,因此能够确保得到高纯度的mRNA产物,从而在比较敏感的下游应用如NGS中增强检测的可靠性和可重复性。此外,本产品所需的起始样本量最少只需100 ng。

去除rRNA
核糖体RNA 去除率 (%)
28S 99.99
18S 99.99
5.8S 99.99
5S 99.99
16S mt 99.09
12S mt 99.78
将来自Jurkat细胞的5ug总RNA使用GeneRead Pure mRNA Kit处理。通过定量RT-PCR确定不同类型rRNA的去除效率。

Principle
GeneRead Pure mRNA技术结合了磁珠法的操作便利性和oligo-dT杂交法的特异性。实验方案需要简短的预处理步骤。Oligo-dT探针共价结合于Pure mRNA Bead(微珠)的表面。在缓冲体系mRBB存在的条件下,产物中的mRNA能够快速高效地与Pure mRNA Bead上的oligo-dT探针实现结合。这样,结合在磁珠上的mRNA就可以被有效地漂洗,而两步漂洗步骤则可以显著提升mRNA产物的纯度。使用试剂盒附带的洗脱缓冲液Buffer OEB将高纯度的mRNA产物洗脱下来。mRNA的产率取决于输入样本和样本的储存过程。
Procedure
GeneRead Pure mRNA Kit仅需一轮纯化即可获得最高纯度的mRNA。整个操作流程所需时间不到45分钟。

最短的手动操作时间
GeneRead Pure mRNA操作流程的主要步骤——从杂交捕获到RNA纯化——都能够在QIAcube全自动核酸纯化仪上实现完全地自动化,为实验者提供了最大的便利性和更高的操作灵活性,并最大限速缩短了手工操作时间。
Applications
使用GeneRead Pure mRNA Kit获取的RNA产物广泛适用于多种下游应用,例如:
  • 二代测序
  • 实时定量PCR
  • 微阵列分析

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