从血液和培养细胞中纯化500 µg的高分子量DNA
Blood & Cell Culture DNA Kit提供重力流阴离子交换柱和缓冲液,从多种生物样本中高效纯化基因组DNA 。纯化得到的DNA片段长达150 kb,片段平均长度为50–100 kb。
QIAGEN Genomic-tip分离过程非常温和,导致的DNA剪切可以忽略。纯化得到的DNA可长达150 kb,平均长度为50–100 kb(参见"Genomic DNA of up to 150 kb")。纯化得到的DNA不含RNA、蛋白质和代谢物等污染物,A260/A280值为1.7–1.9。
纯化得到的DNA片段长度较长,尤其适用于构建高品质DNA文库以用于不同平台的二代测序,因此受到多家核心机构的推荐。
Blood & Cell Culture DNA Kit中的QIAGEN Genomic-tip利用QIAGEN独有的阴离子交换技术,从多种生物样本中纯化高分子量DNA,而无需苯酚或氯仿抽提。裂解缓冲液针对不同类型样本进行优化,使得核酸酶、组蛋白和DNA结合蛋白等蛋白质以及潜在的传染性病毒等快速变性。在该缓冲液的pH值以及低盐环境中,DNA与QIAGEN交换柱上的树脂结合,蛋白质、碳水化合物和代谢物等细胞组分会随流出液流出。在高盐的洗脱液中可获得纯化的DNA。Genomic-tip基于重力流技术,无需专人照看。该操作最大程度节约了手动操作时间,是对多个样本进行同时处理的理想选择。
首先裂解样本(组织样本需要机械破碎),蛋白质在适宜的裂解缓冲液中变性(参见"QIAGEN Genomic-tip procedure")。然后加入QIAGEN Protease或蛋白酶K,温育后,将裂解产物上样到QIAGEN Genomic-tip。DNA吸附到交换柱上,其他细胞组分随流出液流出。随后进行洗涤,将残留的污染物洗去。最后洗脱得到纯化的高分子量DNA,在异丙醇中沉淀。针对血液和培养细胞的完整流程中手动操作仅需30分钟。
Blood & Cell Culture DNA Kits是即用型试剂盒,含有从全血和培养细胞中纯化高分子量DNA所需的全部组分。
Blood & Cell Culture DNA Maxi Kit纯化得到的DNA非常适用于以下应用:
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