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RNeasy Plus Universal Kits

从各种类型组织中纯化总RNA,配有gDNA Eliminator Solution
  • 适用于所有组织溶液类型
  • 整合RNeasy和QIAzol技术,节省时间
  • 不使用酶,快速去除基因组DNA
  • RNA纯度高,适用于下游应用

RNeasy Plus Universal Kits可快速、方便的纯化RNA,同时有效地去除基因组DNA。优化的实验方案可从各种组织类型,包括难裂解组织中纯化高品质RNA。该试剂盒含有QIAzol Lysis Reagent和RNeasy离心柱,前者用于裂解脂肪组织和其他组织类型,后者用于纯化高品质RNA。该试剂盒有两种规格:RNeasy Plus Universal Mini Kit可从至多50 mg组织中纯化RNA,RNeasy Plus Universal Midi Kit可从至多250 mg组织中纯化RNA。RNeasy Plus Universal Mini Kit可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动化进行纯化。

Cat No./ID: 73404
RNeasy Plus Universal Mini Kit (50)
For 50 RNA minipreps: RNeasy Mini Spin Columns, gDNA Eliminator Solution, Collection Tubes, RNase-Free Water and Buffers
Cat No./ID: 73442
RNeasy Plus Universal Midi Kit (10)
For 10 RNA midipreps: RNeasy Midi Spin Columns, gDNA Eliminator Solution, Collection Tubes, RNase-Free Water and Buffers

RNeasy Plus Universal Kits适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
高效去除基因组DNA。
使用RNeasy Plus Universal Mini Kit从图示量的RNAlater稳定的大鼠肾脏中分离RNA,或者使用Supplier AII的沉淀试剂进行沉淀。使用QuantiFast Probe RT-PCR Kit和Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪对RNA洗脱液进行real-time RT-PCR分析,包括或不包括逆转录步骤。
1
高品质RNA。
使用RNeasy Plus Universal Mini Kit,从加入或者不加入gDNA Eliminator Solution的大鼠组织中纯化RNA。[A] 使用从25 mg冷冻的肝脏组织中分离的RNA进行real-time RT-PCR分析。所有样本的CT值相当。如果未使用gDNA Eliminator Solution,则在–RT对照中可检测到DNA污染,而使用gDNA Eliminator Solution分离的样本中则几乎无DNA污染。[B] 从25 mg稳定的心脏组织中纯化RNA。使用QIAxcel系统获取的数据证明,无论是否使用gDNA Eliminator Solution分离RNA,RNA均具有极佳的完整性。
2
RNeasy Plus Universal Mini和Midi实验流程。
Performance

RNeasy Plus Universal操作流程可从各种类型的组织中得到高品质RNA,重复性好,适用组织包括脂肪组织和不易裂解的组织(参见下表)。不同物种和不同发育阶段的组织的纯化产量不同,尤其是脂肪组织。

RNeasy Plus Universal Kits纯化得到总RNA的产量
大鼠/小鼠组织(10 mg) 总RNA产量 (µg)
脂肪组织  0.5–2.5
5–20
心脏 5–25
10–60
5–40
15–80
5–15
肌肉 5–35
皮肤 2–5
15–100

使用real-time RT-PCR和QIAxcel体系分析纯化得到的RNA,表明这些RNA具有较好的完整性(参见"High-quality RNA")。gDNA Eliminator Solution和RNeasy技术可高效去除大部分基因组DNA污染,无需进行DNase处理(参见"Effective removal of genomic DNA")。

Principle

RNeasy Plus Universal操作流程可从各种类型组织中纯化RNA,包括脂肪或不易裂解的组织。RNeasy Plus Universal Kits整合了苯酚/胍裂解技术和硅胶膜总RNA纯化技术。试剂盒中的QIAzol Lysis Reagent是一种由苯酚和硫氰酸胍组成的单相溶液,专为方便的裂解各种组织设计,并能抑制RNases的活性。高效的裂解以及通过有机抽提去除污染物,使RNeasy离心柱可用于处理更大量的组织。gDNA Eliminator溶液能有效去除基因组DNA污染,非常有助于DNA分离到中间相。

Procedure

RNeasy Plus Universal操作流程易于进行,与苯酚/氯仿处理后回收相比,此方法更快、更有效,能得到更高纯度和产量的RNA(参见"RNeasy Plus Universal Mini and Midi procedures")。RNeasy Plus Universal Mini Kit可从50 mg组织中纯化RNA;RNeasy Plus Universal Midi Kit可从250 mg组织中纯化RNA。

可使用TissueRuptor、TissueLyser LT或TissueLyser II在QIAzol Lysis Reagent中进行样本匀浆。加入gDNA Eliminator Solution和氯仿后,匀浆离心分为水相和有机相。收集含有RNA的上层水相,加入乙醇,使用RNeasy离心柱纯化RNA。总RNA结合到离心柱膜上,苯酚和其他污染物被高效洗去。获得的高品质RNA可用RNase-free水洗脱下来。

该实验方案适用于富集mRNA,不包括大部分小于200 nt的RNAs(如rRNAs和tRNAs)。RNeasy Plus Universal操作流程稍作修改后可从培养细胞中纯化包含miRNA等小RNAs的总RNA。

Applications

RNeasy Plus Universal Kits纯化得到的RNA非常适用于对少量DNA敏感的下游应用,如定量real-time RT-PCR。纯化得到的RNA还可以用于其他应用。

Features
Specifications
应用 PCR, real-time PCR, microarray
洗脱体积 Mini: 30µl; Midi:150µl
自动化处理 Mini format can be automated on the QIAcube
规格 Mini and Midi Format
整合基因组DNA去除步骤 Yes
主要样本类型 Tissue samples including difficult-to-lyse and demanding tissues
处理 Manual (centrifugation), automated (QIAcube)
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 RNA
样本量 Mini: 5-50 mg; Midi: 50-250 mg
技术 QIAzol/Spin column technology

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