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RNeasy Plus 96 Kit

96孔板纯化细胞中的总RNA,配有gDNA Eliminator板

  • 去除基因组DNA
  • 无需DNase消化
  • 快速方便的样本处理
  • 从多达2,000,000个细胞中纯化RNA,产量重复性好
  • 高度标准化的操作过程

应用RNeasy Plus 96 Kit可在96孔板中从培养细胞中高通量纯化总RNA。该试剂盒将新型的gDNA Eliminator 96孔板与RNeasy 96孔板相结合,确保纯化的RNA不受病毒和基因组DNA污染。这个快速的高标准化的纯化流程可获得高品质的RNA,且产量重复性好,也可保证在real-time RT-PCR、微阵列分析和其他下游应用中获得可靠的结果。

Cat No./ID: 74192
RNeasy Plus 96 Kit (12)
For 12 x 96 total RNA preps: 12 RNeasy 96 Plates, 12 gDNA Eliminator 96 Plates, Elution Microtubes CL, Caps, S-Blocks, AirPore Tape Sheets, RNase-Free Reagents and Buffers

RNeasy Plus 96 Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
RNeasy Plus 96实验流程。
1
高效去除基因组DNA。
使用RNeasy Plus 96 Kit从Jurkat细胞(105、104、103和102)中纯化总RNA。采用可同时扩增并检测mRNA和基因组DNA序列的引物-探针组对β-actin转录本进行real-time RT-PCR分析。无RT对照(–RT)的平直扩增曲线说明无基因组DNA存在。
2
高品质RNA。
使用RNeasy Plus 96 Kit从图示细胞系中纯化总RNA,并在Agilent 2100 Bioanalyzer上进行分析。RIN值接近10,说明纯化RNA具有高完整性。
3
可靠的RNA纯化。
使用RNeasy Plus 96 Kit从10倍梯度稀释的Jurkat细胞(106至102个细胞)中纯化总RNA。对β-actin转录本进行real-time RT-PCR分析。CT值与细胞稀释度之间的线性图说明,在较宽的起始材料数量范围内可实现可靠的RNA纯化(R2 = 0.9985)。
Performance

RNeasy Plus 96 Kit适用于多种细胞系,纯化的高品质RNA的Agilent RIN值接近10(参见"High-quality RNA")。此试剂盒可完全去除基因组DNA(参见"Effective genomic DNA removal"),在高度敏感的应用中可进行特定转录体的检测,如低丰度靶标的定量real-time RT-PCR分析。此外,从102–106个细胞中纯化的RNA可用于大范围的real-time RT-PCR定量分析(参见"Reliable RNA purification")。

Principle

细胞首先在含异硫氰酸胍的强变性缓冲液中裂解和匀质化,RNases立即失活以保证完整RNA的分离。裂解液再通过gDNA Eliminator 96孔板。96孔板与高盐缓冲液结合,能选择性、高效地去除基因组DNA。加入乙醇为RNA的结合提供合适的条件,样本加入到RNeasy 96孔板。特制的96孔板每个孔都含有硅胶膜,可特异性地结合裂解细胞中的RNA。

Procedure
使用RNeasy 96孔板可实现高通量RNA纯化。应用RNeasy 96孔板之前,细胞裂解液首先通过gDNA Eliminator 96孔板(参见"RNeasy Plus 96 procedure")。gDNA Eliminator 96孔板可在离心机(Centrifuge 4-16)上方便的操作。使用RNeasy 96孔板纯化RNA的过程是手动的,包含3个简单步骤:结合、洗涤和洗脱。板可在离心机(Centrifuge 4-16和Plate Rotor 2 x 96)或真空装置(QIAvac 96)和离心机上快速、方便的操作。在离心机上操作时最多可用2 x 106个细胞作为起始样本,在真空装置和离心机上最多可用1 x 106个细胞作为起始样本。操作流程可富集mRNA,不包括大部分小于200 nt的RNA(如rRNAs和tRNAs)。RNeasy Plus操作流程稍作修改后可从培养细胞中纯化包含miRNA等小RNA的总RNA。
Applications

纯化得到的总RNA代表了细胞的转录状态,非常适用于对少量DNA污染敏感的下游应用,如定量real-time RT-PCR。纯化得到的RNA也能用于其他应用,包括RT-PCR、cDNA合成、Northern印迹、点印迹、狭缝印迹、引物延伸、poly A+ RNA筛选、RNase/S1核酸保护和微阵列。

96孔板规格纯化RNA十分方便,此试剂盒适用于高通量基因表达分析,如在以下领域: 
药物开发
生物医药研究
Features
Specifications
应用 PCR, qPCR, real-time PCR
洗脱体积 45–70 µl
规格 96-well plate
主要样本类型 Tissue samples
处理 Manual (centrifugation or vacuum)
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 RNA
样本量 25–100 mg
技术 Silica technology
产量 Varies

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试剂盒操作手册 (1)
For purification of total RNA from animal and human cells in 96-well format using gDNA Eliminator 96 plates
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