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RNeasy Lipid Tissue Mini Kit

从富含脂肪的组织和其他类型组织中纯化至多100 µg的总RNA

  • 优化的裂解条件,用于富含脂肪的组织和其他组织
  • 高产量总RNA,无苯酚污染
  • 获得高品质RNA,适合多种下游应用
RNeasy Lipid Tissue Mini Kit包含QIAzol Lysis Reagent和RNeasy离心柱,前者用于裂解脂肪和其他类型组织样本,后者用于纯化至多100 µg高品质RNA。该试剂盒可在QIAcube全自动核酸纯化仪上全自动化完成。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent(仅适用非脂肪组织)或Allprotect Tissue Reagent可方便的稳定组织样本,使用TissueRuptor或TissueLyser体系可有效地破碎样本。处理更大的样本可使用RNeasy Lipid Tissue Midi Kit(离心柱的结合能力为1 mg RNA)。
Cat No./ID: 74804
RNeasy Lipid Tissue Mini Kit (50)
50 RNeasy Mini Spin Columns, Collection Tubes (1.5 ml and 2 ml), QIAzol Lysis Reagent, RNase-free Reagents and Buffers

RNeasy Lipid Tissue Mini Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
RNA产量高,且无苯酚残留。
使用RNeasy Lipid Tissue Mini Kit(RNeasy Lipid)、标准硅胶膜步骤(Std. silica)或酚/胍基试剂(PhOH/Gdn),遵循供应商的说明,从10 mg大鼠脑部组织中分离RNA。[A] 甲醛琼脂糖凝胶分析显示,使用RNeasy Lipid Tissue Mini Kit可获得较高的RNA产量。使用RNeasy及其他基于硅胶的方法,选择性地排除小RNA(如5.8S rRNA、5S rRNA和tRNA)。[B] 吸收光谱显示了使用酚/胍基试剂时的污染物和酚。
1
RNeasy Lipid Tissue Mini实验流程。
便捷的RNeasy Lipid Tissue实验方案将QIAzol酚/胍基试剂裂解与硅胶膜RNeasy RNA分离相结合,可获得高产量的总RNA。QIAzol Lysis Reagent利用有机萃取结合高渗破裂法,能够获得高裂解效率,从而可以增加RNeasy步骤中的脂肪组织量。RNA存在于上层的水相中,DNA存在于水相和有机相的交界面中,蛋白质存在于下层的有机相或者水相和有机相的交界面中。在水相中加入乙醇,将样本上样至RNeasy离心柱。
2
对高品质RNA进行real-time RT-PCR分析。
使用RNeasy Lipid Tissue Mini Kit从100 mg大鼠脑或脂肪组织中分离总RNA。使用QuantiTect Probe RT-PCR Kit及图示量的总RNA(两次重复)和c-jun或α-actin基因特异性的引物和探针,进行定量real-time RT-PCR。
Performance
RNeasy Lipid Tissue操作流程将QIAzol裂解方法与RNeasy RNA分离方法结合,能从富含脂肪的组织中得到高产量总RNA,10 mg脑组织RNA的平均产量为10 µg、10 mg动物脂肪组织RNA的平均产量为2.4 µg。RNeasy Lipid Tissue Kits可有效的纯化高品质总RNA,无苯酚残留(参见"High-quality RNA" 和 "High yields of RNA without phenol carryover")。从从脂肪组织得到的RNA适用于包括real-time RT-PCR(参见"Real-time analysis" )等下游应用。
Principle

RNeasy Lipid Tissue Kits适用于富含脂肪的组织,如脑和脂肪组织。方便RNeasy Lipid Tissue实验方案结合了优化的苯酚/胍的裂解方法以及经验证的RNeasy硅胶膜纯化方法,能纯化得到高品质的总RNA。QIAzol Lysis Reagent结合了有机提取与离液破碎的方法,具有很高的裂解效率。RNeasy技术适用于大于200 nt RNA,因此RNA产物不包括5S rRNA、tRNA或其他小分子量RNAs,产物占细胞内总RNA的15–20%。

Procedure
10–100 mg组织样本在QIAzol Lysis Reagent中均质化。加入氯仿,匀浆离心后分为水相和有机相。吸取上层水相后加入乙醇以提供合适的结合条件。然后将样品加入RNeasy离心柱,至多100 µg的总RNA与硅胶膜结合,苯酚和其他污染物被高效洗去。使用30–100 µl不含RNase的纯水即可洗脱得到高品质RNA(参见"RNeasy Lipid Tissue Mini procedure)。
Applications

RNeasy Lipid Tissue Kits可简单有效的纯化高品质RNA,得到的RNA适用于多种下游应用,包括芯片分析和real-time RT-PCR。

Features
Specifications
应用 PCR, real-time PCR, microarray
洗脱体积 30–100 µl
规格 Spin column
主要样本类型 Fatty tissue samples
处理 Manual
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 RNA
样本量 10–100 mg
技术 Silica technology
每次运行或制备时间 45 minutes
产量 2.4–10 mg

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试剂盒操作手册 (1)
For purification of total RNA from fatty tissues and all other types of tissue
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