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PAXgene 96 Blood RNA Kit

高通量纯化全血样品胞内RNA

  • 同步纯化96个样品中的RNA
  • 标准化样品处理过程
  • 无需有机提取或沉淀
  • 纯化获得高品质胞内RNA

PAXgene 96 Blood RNA Kit可手工操作高通量纯化胞内RNA。配合PAXgene Blood RNA Tubes(由BD提供,货号762165),系统提供了一个样本分析前处理的标准方案,包括从收集、稳定到RNA纯化的全过程,适用于高通量的临床试验和其他大规模研究课题。

Cat No./ID: 762331
PAXgene 96 Blood RNA Kit (4)
4 PAXgene 96 RNA Plates, 4 PAXgene 96 Filter Plates, Buffers, Proteinase K, RNase-free DNase Sets, AirPore Tape Sheets, Collection Vessels. To be used in conjunction with PAXgene Blood RNA Tubes.
Cat No./ID: 9238279
PAXgene 96 Incubator Block
Block for denaturation of eluates in PAXgene 96 procedures

仅限于科研应用,不适用于诊断,不为疾病的诊断、预防或治疗提供参考信息。


0
用标准方案从血液中分离RNA。
收集血液并使用标准方案抽提RNA(收集血液于EDTA管中;无需稳定;使用基于胍基的方法抽提RNA)。图上显示使用real-time RT-PCR检测的收集血液中12种基因的表达变化。(数据由Source Precision Medicine, Boulder, Colorado, USA友情提供。)
1
稳定样本用于基因表达分析。
收集血液并使用PAXgene Blood RNA System抽提RNA(可稳定和抽提RNA)。图上显示使用real-time RT-PCR检测的收集血液中12种基因的表达变化。(数据由Source Precision Medicine, Boulder, Colorado, USA友情提供。)
2
PAXgene 96 Blood RNA实验流程。
抽提RNA,首先离心收集核酸于PAXgene Blood RNA Tube中。洗涤收集物并加入蛋白酶K消化蛋白。加入乙醇调节结合条件。裂解物放入PAXgene 96 Filter Plate,离心去除细胞碎片。随后裂解物放入PAXgene 96 RNA Plate。残留的DNA用DNase I消化去除。在洗脱纯RNA前,三次有效地洗涤步骤去除依然存在的污染物。
3
血液经过储存后,检测其酪氨酸酶。
血液样品来自6个捐献者,加入表达酪氨酸酶的肿瘤细胞,在室温放置10天。RT-PCR用于检测酪氨酸酶的水平。[A]每2.5 ml血液1个细胞;[B] 每2.5 ml血液10个细胞。WB:将从全血中抽提并储存在的EDTA管中的RNA样本进行酪氨酸酶检测。PAX:将使用PAXgene Blood RNA System进行样本收集并稳定及抽提而获得RNA样本进行酪氨酸酶检测。(数据由LMO, Munich, Germany友情提供。)
Performance
PAXgene 96 Blood RNA Kit可高通量纯化人全血中的总RNA。配合PAXgene Blood RNA Tubes(BD提供,货号762165),提供从收集、稳定到纯化高品质RNA的完整分析前解决方案。灵敏的PAXgene 96 Blood RNA操作流程重复性好,2.5 ml人全血的一般产量为4–20 µg,将样本间的交叉污染风险降到最低。PAXgene Blood RNA Tubes提供的专有试剂可快速稳定RNA。这种试剂可阻止收集血液后在体外通常会发生的胞内RNA表达谱的剧烈变化(参见"RNA isolation from blood using standard methods"、"Stabilization of gene expression"和"Detection of tyrosinase following blood storage")。高通量步骤简单、快速、高效,平行处理96个样品可为您在临床实验研究中节约大量时间。
Principle

在PAXgene 96 Blood RNA System中,血液被直接收集到PAXgene Blood RNA Tubes中,使用PAXgene 96 Blood RNA Kit纯化RNA。PAXgene Blood RNA Tubes的专有试剂,可快速稳定RNA。血液样本在PAXgene Blood RNA Tubes中可室温保存5天。然后使用PAXgene 96 Blood RNA Kit提供的硅胶膜技术纯化RNA。得到的RNA可准确代表体内表达谱,适用于多种下游应用。

Procedure
血液样本(2.5 ml)收集在PAXgene Blood RNA Tubes(BD提供,货号762165)中,可在室温下保存或转移。在PAXgene 96 Blood RNA操作流程中,RNA的纯化开始于在PAXgene Blood RNA Tube中离心沉淀核酸。沉淀洗涤后加入蛋白酶K消化蛋白。加入乙醇调节结合条件。裂解液加入到PAXgene 96 Filter Plate中,离心去除细胞碎片。裂解液再加入到PAXgene 96 RNA Plate中(参见"PAXgene 96 Blood RNA procedure")。残留的DNA通过DNase I消化去除。剩余的污染物在3次有效的漂洗步骤中被去除,之后洗脱得到纯化的RNA。
Applications

从人全血中纯化的RNA可即用于一系列下游应用,包括:

  • 核酸扩增技术,如RT-PCR和NASBA
  • Expression-array和expression-chip分析
  • 定量RT-PCR,包括TaqMan技术
  • cDNA合成
  • RNase和S1核酸酶保护
  • Northern印记、点印记和狭缝印记分析
  • 引物延伸
Features
Specifications
应用 PCR, real-time PCR, qPCR, NASBA, cDNA synthesis
符合CE/FDA/IVD Research use only
洗脱体积 45–60 µl
规格 96-well plate
主要样本类型 Whole blood
处理 Manual (centrifugation or vacuum)
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 Cellular RNA
样本量 2.5 ml
稳定 Yes
技术 Silica technology
每次运行或制备时间 <1.5 hours
产量 4–20 µg
fragment fix placeholder