text.skipToContent text.skipToNavigation

FastLane Cell cDNA Kit

快速制备用于定量RT-PCR的cDNA,无需RNA纯化

  • 由细胞制备cDNA只需四个步骤,45分钟内即可完成
  • 高灵敏度检测低丰度转录产物
  • 易于同时处理多个样本
  • 整合的gDNA去除步骤确保只检测RNA
  • 无需设计RNA特异性引物或探针

FastLane Cell cDNA Kit提供由培养细胞直接制备cDNA的方法,操作快速简单,无需纯化RNA。试剂盒提供洗涤和裂解缓冲液,以获得含有RNA的裂解液,同时应用gDNA Wipeput Buffer可去除基因组DNA污染,同时提供用于快速、高效合成cDNA的所有反应组分。该试剂盒适用于需要快速、高通量进行基因表达分析的实验。

Cat No./ID: 215011
FastLane Cell cDNA Kit (50)
Buffer FCW, Buffer FCP, and components for 50 x 20 µl reverse-transcription reactions (gDNA Wipeout Buffer, Quantiscript Reverse Transcriptase, Quantiscript RT Buffer, RT Primer Mix, and RNase-Free Water)

FastLane Cell cDNA Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
出色的灵敏度适用于癌症研究。
在HeLa细胞中对重要的癌症研究基因进行两步法real-time RT-PCR分析时,使用FastLane Kit制备cDNA获得的CT值低于使用Supplier AIV的同类试剂盒制备cDNA获得的CT值。
1
成功分析CDC2敲除。
使用不同的CDC2 siRNA(、S2S3)或非沉默siRNA(NS)转染MCF-7细胞。48小时后,使用FastLane Kit制备cDNA。利用两步法real-time RT-PCR分析CDC2(胞周期蛋白)相对于GAPDH(内源性对照)的表达。将未处理细胞(UT)中CDC2的相对表达水平设置为100%。
2
高效去除基因组DNA。
使用FastLane Cell cDNA Kit,加入(+RT)或不加入(–RT)逆转录酶,制备cDNA。使用针对β-actin的基因表达分析定量cDNA。-RT曲线显示未检测到基因组DNA。
3
高度可重复性的制备cDNA。
使用FastLane Kit,在包含HeLa细胞的48孔板中制备cDNA。利用两步法real-time RT-PCR分析微管蛋白B(结构蛋白)的表达。
Performance
FastLane Cell cDNA Kit制备的cDNA可以使两步法定量PCR得到高灵敏度、高重现性的检测结果(参见"Superior sensitivity in cancer research"和"Highly reproducible cDNA preparation")。高品质的cDNA同样可用于对大于105个细胞到单个细胞进行检测。
Principle

FastLane Cell cDNA Kit使用FastLane技术可在45分钟内直接由培养细胞制备得到cDNA。为确保real-time RT-PCR只检测到RNA,可使用创新的gDNA Wipeout Buffer去除基因组DNA(参见"Effective elimination of genomic DNA contamination")。无需设计RNA特异性引物或探针,节约时间和精力。

FastLane Cell cDNA Kit配合优化的QuantiTect、QuantiFast或Rotor-Gene Kits进行real-time RT-PCR,可在数小时内轻松处理并分析细胞样本。由此可对实验的若干转录产物进行快速检测,例如验证siRNA介导的基因沉默效果(参见"Successful analysis of CDC2 knockdown")。

FastLane Cell cDNA Kit是FastLane Kits的一部分,可加快并实现无缝的基因表达分析流程。 

Procedure

FastLane Cell cDNA Kit直接由培养细胞制备cDNA,只需4个步骤即可在45分钟内获得cDNA:细胞洗涤、细胞裂解并稳定RNA、基因组DNA去除和合成cDNA。制备的cDNA可直接用于两步法real-time RT-PCR。

该试剂盒提供足量用于24孔细胞培养板或48孔细胞培养板制备cDNA的试剂,如果应用96孔细胞培养板,需要额外购买QuantiTect Reverse Transcription Kit(50)。

FastLane Cell cDNA Kit制备的cDNA,可使用下列QuantiTect Kits中的一种通过两步法real-time RT-PCR进行分析:

  • SYBR® Green检测:QuantiTect SYBR® Green PCR Kit
  • 探针:QuantiTect Probe PCR Kit
  • 多重探针检测:QuantiTect Multiplex PCR Kits

FastLane Cell cDNA Kit配合QuantiFast Kit使用可进行快速的两步法real-time RT-PCR:

  • SYBR® Green检测:QuantiFast SYBR® Green PCR Kit
  • 探针检测:QuantiFast Probe PCR Kits
  • 多重探针检测:QuantiFast Multiplex PCR Kits

使用Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪对FastLane Cell cDNA Kit制备的cDNA进行分析时,应用如下Rotor-Gene Kits可进行超快速的两步法real-time RT-PCR:

  • SYBR® Green检测:Rotor-Gene SYBR® Green PCR Kit
  • 探针检测:Rotor-Gene Probe PCR Kit
  • 多重探针检测:Rotor-Gene Multiplex PCR Kits 

QuantiTect及QuantiFast Kits与多种real-time热循环仪兼容,包括Applied Biosystems提供的仪器。

Applications

FastLane Cell cDNA Kit适用于需要对在各转录本水平进行快速检测的实验,包括:

  • 验证siRNA介导的基因沉默效果
  • 评估药物效果 
  • 基因调控检测
Features
Specifications
应用 Real-time, two-step RT-PCR, gene expression analysis directly from cells
酶活 Reverse transcription
预混液 No
反应类型 cDNA production, DNA digestion
real-time或终点法PCR Real-time, two-step RT-PCR
样本/目标类型 Cultured cells
单一或多重 Single
有/无热启动酶 Without hotstart

您无权限查看此资源

试剂盒操作手册 (1)
For high-speed preparation of first-strand cDNA directly from cultured cells without RNA purification. For use in real-time, two-step RT-PCR
显示更多
fragment fix placeholder