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Allprotect Tissue Reagent

迅速稳定组织中的DNA、RNA和蛋白质

  • 无需液氮或干冰
  • 立即方便地稳定收集到的组织
  • 可长期储存组织,用于后续分析
  • 标准的样本制备流程,用于系统生物学研究

Allprotect Tissue Reagent可在室温下立即稳定组织样本中的DNA、RNA和蛋白质。这样可以稳定DNA、RNA和蛋白质,以保证可靠的下游分析。稳定后的组织可在15–25°C运输7天,2–8°C储存长达12个月,在–20°C或–80°C可储存更长时间。

Cat No./ID: 76405
Allprotect Tissue Reagent (100 ml)
100 ml Allprotect Tissue Reagent, Allprotect Reagent Pump

Allprotect Tissue Reagent适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


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保持蛋白活性。
大鼠肝脏储存在Allprotect Reagent中,然后使用Qproteome Mammalian Protein Prep Kit纯化总蛋白。酸性磷酸酶活性与储存于液氮中的肝脏(对照)相似。图中的柱为平行分析两种保存方法的肝脏组织的蛋白活性平均数值。
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防止基因诱导。
将大鼠肺储存在Allprotect Reagent或PBS中,按图中所示时间存放于25°C环境中。然后进行real-time RT-PCR,分析c-fos的基因表达。分别计算用液氮稳定的肺样本的转录水平。数据表明Allprotect Reagent能够防止c-fos基因诱导。
2
防止RNA降解。
将大鼠的小肠储存在Allprotect Reagent或PBS中,按图中所示时间存放于25°C环境中。然后进行real-time RT-PCR,分析Madh7的基因表达。分别计算用液氮稳定的小肠样本的转录水平。数据表明Allprotect Reagent能够防止RNA降解。
3
完整的蛋白可用于Western印迹。
将大鼠的多种组织储存在Allprotect Reagent中,在25°C环境中储存5天。然后对ERK2进行Western印迹分析。其印迹强度与液氮稳定的组织的印迹强度相当,表明没有出现蛋白质降解。
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防止蛋白质降解。
将人体肠道粘膜样品在Allprotect Reagent (4°C)或液氮中储存1天,然后进行质谱分析。对于[A] <10 kDa的蛋白和[B] 10–20 kDa的蛋白,Allprotect中样本的图形与液氮中样本图形类似,表明蛋白质已被稳定。图中数据为德国汉堡Indivumed GmbH提供。
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Allprotect稳定的机理。
每个Allprotector分子具有多个允许Allprotector分子包被并保护DNA、RNA和蛋白质的接触点。组织裂解时,Allprotector分子被稀释、分解,释放出DNA、RNA和蛋白质。
Performance
使用Allprotect Tissue Reagent即刻稳定采集的组织可保留DNA、RNA和蛋白质在体内的性质,保证了可靠的下游分析,稳定的组织可在室温(15–25°C)下储存长达7天(参见"Intact protein for western blotting"、"Prevention of protein degradation"和"Preservation of protein activity")。稳定RNA十分重要,因为转录水平会在组织采集后快速变化(参见"Prevention of gene induction"和"Prevention of RNA degradation")。使用Agilent 2100 Bioanalyzer分析Allprotect Tissue Reagent稳定组织得到的RNA,RIN值较高,表明RNA较完整。Allprotect Tissue Reagent还可稳定microRNA、甲基化的基因组DNA和磷酸化蛋白。
Principle

将刚采集的组织浸没在Allprotect Tissue Reagent中,可即刻稳定DNA、RNA和蛋白质,并保存其在体内的特性。Allprotect Tissue Reagent稳定的组织样本可长期储存,无需冷冻,在室温下可储存长达7天,或在2–8°C储存长达12个月。

该试剂是QIAGEN系统生物学样本制备技术产品线的一部分,可与AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit配合使用,从同一个珍贵的样本中同时纯化DNA、RNA和蛋白质。Allprotect稳定的组织可用QIAGEN的DNeasy、QIAamp、RNeasy和Qproteome等试剂盒纯化DNA、RNA或蛋白质。用于酶分析的功能性蛋白可使用Qproteome Mammalian Protein Prep Kit从Allprotect稳定的组织中纯化获得。无需在纯化前将样本分为3份,因此可最大程度的回收DNA、RNA和蛋白质。此外,纯化过程无需加入苯酚和丙酮等有机溶剂。DNA、RNA和蛋白质皆来自同一个样本,减少了从不同样本中制备这些待分析物可能带来的差异。

QIAGEN还提供分别纯化DNA、RNA和蛋白质的产品(见表)。包括Qproteome Mammalian Protein Prep Kit,可从Allprotect稳定的组织中纯化功能蛋白。使用Qproteome Mammalian Protein Prep Kit从Allprotect稳定的组织中纯化的蛋白质可用于多种下游应用。

可与Allprotect Tissue Reagent配合使用的QIAGEN试剂盒
待纯化的分析物推荐的试剂盒
基因组DNA、总RNA和总蛋白质 AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit
基因组DNA和总RNA AllPrep DNA/RNA Micro Kit
AllPrep DNA/RNA Mini Kit
基因组DNA DNeasy Blood & Tissue Kit
QIAamp DNA Mini Kit
总RNA RNeasy Plus Micro Kit*(适用于小的组织样本)RNeasy Mini Kit(适用于易裂解组织)
RNeasy Plus Mini Kit (适用于易裂解组织)
RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit* (适用于富含纤维的组织)
RNeasy Lipid Tissue Mini Kit(适用于富含脂肪的组织)
RNeasy Microarray Tissue Mini Kit(适用于微芯片分析中的组织样本)
总蛋白质 Qproteome Mammalian Protein Prep Kit
* 试剂盒中含有gDNA Eliminator柱。
Procedure

将刚采集的组织浸没在Allprotect Tissue Reagent中,以即刻稳定DNA、RNA和蛋白质(参见"Mechanism of Allprotect stabilization")。稳定过程在室温下即可进行,无需使用危险的液氮或干冰。使用Allprotect Tissue Reagent即刻稳定采集的组织可保留DNA、RNA和蛋白质在体内的性质,保证了可靠的下游分析。

Allprotect Tissue Reagent稳定的组织可在室温下储存长达7天,在2–8°C的条件下储存长达12个月, DNA、RNA和蛋白质不会降解。在–20°C或–80°C可储存更长时间。

Applications

使用AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit可从Allprotect稳定的组织中同时纯化DNA、RNA和蛋白质。将Allprotect和AllPrep样本制备技术配合,可标准化系统生物学研究中的样本制备流程。使用AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit纯化得到的基因组DNA和总RNA在real-time PCR和RT-PCR等下游应用中表现出色。使用该试剂盒纯化得到的总蛋白质适用于SDS-PAGE和Western印迹。

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试剂盒操作手册 (1)
For immediate stabilization of DNA, RNA, and proteins in animal and human tissues, and subsequent storage
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参考文献
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