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RNeasy Protect Animal Blood System

用于采集并稳定动物血液,纯化RNA或包含miRNA的总RNA

  • 对动物血液进行可靠的基因表达分析
  • 方便采集并保存小体积量血液
  • 快速纯化高品质的总RNA
  • 高效回收miRNA(需单独购买缓冲液)

RNeasy Protect Animal Blood System提供完整的方案,用于从动物血液中纯化高品质RNA。可将小鼠、大鼠或其他小动物的血液简单地收集在RNAprotect Animal Blood Tubes中,该收集管中装有的试剂可迅速稳定细胞RNA。然后应用RNeasy Protect Animal Blood Kit纯化总RNA。

Cat No./ID: 73224
RNeasy Protect Animal Blood Kit (50)
For 50 preps: RNeasy MinElute Spin Columns, QIAshredder Spin Columns, Collections Tubes, Proteinase K, RNase-Free DNase, and RNase-Free Reagents and Buffers; to be used with RNAprotect Animal Blood Tubes
Cat No./ID: 76544
RNAprotect Animal Blood Tubes (50 x 100 µl)
50 tubes for collection, storage, and transport of 100 µl animal blood samples with RNA stabilization; to be used with the RNeasy Protect Animal Blood Kit
Cat No./ID: 76554
RNAprotect Animal Blood Tubes (50 x 500 µl)
50 tubes for collection, storage, and transport of 500 µl animal blood samples with RNA stabilization; to be used with the RNeasy Protect Animal Blood Kit

RNeasy Protect Animal Blood System适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
高效稳定转录本。
将从同一只大鼠中获得的血液样本(500 μl)采集于RNAprotect Animal Blood Tubes或含有EDTA的管内。样本置于15–25°C保存0分钟(t=0)至6小时。使用RNeasy Protect Animal Blood Kit纯化RNA,利用real-time RT-PCR分析FOS表达,重复两次。Y轴上的ΔCT显示了从t=0样本的CT值中减去后的CT值。在RNAprotect稳定的样本中,FOS的表达保持稳定,但在EDTA处理的样本中会随时间的变化而变化(其他大鼠亦可观察到相同的结果;数据未显示)。
1
RNA产量具有可重复性。
将4只大鼠的血液采集于RNAprotect Animal Blood Tubes中(每只大鼠采集4个样本,各500 μl),使用RNeasy Protect Animal Blood Kit纯化RNA。使用NanoDrop spectrophotometer对RNA进行定量。同一只大鼠的血液样本的RNA产量差异(%CV)为2.4至5.9%;不同大鼠之间的差异为15%。
2
RNeasy Protect Animal Blood实验流程。
RNeasy Protect Animal Blood System提供了一套完整的解决方案,可从动物血液中制备高质量的RNA。可以方便地将小鼠、大鼠及其他小动物的血液采集于RNAprotect Animal Blood Tubes内,RNAprotect Animal Blood Tubes中包含一种可立即稳定细胞RNA的试剂。然后使用RNeasy Protect Animal Blood Kit纯化总RNA。还可将RNeasy Protect Animal Blood Kit与Buffer RWT结合使用,获取包括miRNA在内的总RNA。
3
高度完整的RNA。
采集小鼠血液(100 μl)于RNAprotect Animal Blood Tubes中,置于4°C保存 [A] 2小时或 [B] 2周。使用RNeasy Protect Animal Blood Kit纯化RNA,并在Agilent 2100 Bioanalyzer上分析。RIN值几乎相同,说明RNA的完整性得到了保护。
Performance
RNAprotect Animal Blood Tubes收集的血液样本可在室温下方便的运输或在冰箱中简单的储存。样本可在15–25°C条件下保存48小时,2–8°C条件下保存两周,或在–20°C条件下保存至少三个月,不会出现明显的RNA降解(参见"Highly intact RNA")。动物血液收集在RNAprotect Animal Blood Tubes中可避免转录水平的变化,确保诸如real-time RT-PCR和生物芯片分析等应用中可靠的基因表达分析(参见"Effective transcript stabilization")。使用RNeasy Protect Animal Blood Kit纯化的RNA产量重复性好,只需不到30分钟的操作时间(参见"Reproducible RNA yields")。经验证的RNeasy技术纯化的RNA纯度高,没有基因组DNA污染。
Principle
采集血样的时候,基因表达谱可在几分钟内发生明显的变化。EDTA等抗凝血剂可避免血液凝固,但不能避免mRNA诱导的转录或调控引起的基因表达变化。将动物血液收集在RNAprotect Animal Blood Tubes中可避免转录水平的变化。对稳定的血液进行消化和匀浆后,使用RNeasy硅胶膜技术从样本中纯化RNA(参见"RNeasy Protect Animal Blood flowchart")。
Procedure

血液样本收集在RNAprotect Animal Blood Tubes中。收集管中的试剂可裂解血液细胞并稳定细胞内的RNA。将RNAprotect Animal Blood Tubes离心使样本沉淀,沉淀水洗后重悬在Buffer RSB中。样本在Buffer RBT中被蛋白酶K消化后,样本离心通过QIAshredder离心柱后实现匀浆。在样本中加入乙醇后,离心通过RNeasy MinElute离心柱。使用DNase消化总DNA,并依次用Buffer RW1和Buffer RPE漂洗。用Buffer REB洗脱获得纯化的RNA。使用RNeasy Protect Animal Blood Kit纯化RNA可在QIAcube全自动核酸纯化仪上实现完全自动化。使用单独的实验方案可纯化包含miRNA的总RNA,并需使用漂洗液Buffer RWT(需单独订购;货号:1067933)。从分开的两部分样本中纯化小RNA(包含miRNA)和大RNA需使用RNeasy MinElute Cleanup Kit。

Applications

运用RNeasy Protect Animal Blood System纯化的总RNA和miRNA适用于多种下游应用,包括:

基因表达分析
RT-PCR
定量real-time RT-PCR
差异显示
cDNA合成
Features
Specifications
应用 PCR, qPCR, real-time PCR
洗脱体积 45–70 µl
规格 96-well plate
主要样本类型 Tissue samples
处理 Manual (centrifugation or vacuum)
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 RNA
样本量 25–100 mg
技术 Silica technology
产量 Varies

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试剂盒操作手册 (3)
For collection and RNA stabilization of animal blood
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RNeasy Protect Animal Blood Kit For purification of total RNA, or total RNA including miRNA, from animal blood stabilized in RNAprotect Animal Blood Tubes
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