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RNeasy Mini Kit

从细胞、组织或酵母中纯化至多100 μg的总RNA

  • 数分钟内快速纯化得到高品质总RNA
  • 即用型RNA在各种下游应用中表现良好
  • 少量起始样本,RNA产量稳定
  • 无需酚/ 氯仿抽提,无需氯化铯梯度离心,无氯化锂或者乙醇沉淀步骤
RNeasy Mini Kit可从细胞、组织或酵母中快速纯化高品质RNA,硅胶膜RNeasy离心柱的结合能力达100 μg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent可方便的稳定组织样本,使用TissueRuptor或TissueLyser体系可有效的破碎组织。可在QIAcube全自动核酸纯化仪上应用RNeasy Mini Kit实现RNA纯化自动化。处理更小或更大的样本,可使用RNeasy Micro Kit(离心柱结合能力为45 µg RNA)、RNeasy Midi Kit(离心柱结合能力为1 mg RNA)和RNeasy Maxi Kit(离心柱结合能力为6 mg RNA)。
Cat No./ID: 74104
RNeasy Mini Kit (50)
50 RNeasy Mini Spin Columns, Collection Tubes (1.5 ml and 2 ml), RNase-free Reagents and Buffers
Cat No./ID: 74106
RNeasy Mini Kit (250)
250 RNeasy Mini Spin Columns, Collection Tubes (1.5 ml and 2 ml), RNase-free Reagents and Buffers

RNeasy Mini Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
RNeasy Mini实验方案。
使用RNeasy Mini Kit纯化的总RNA具有高质量,适用于多种下游操作。实验方案还包括部分纯化的RNA、体外转录本和酶反应RNA的回收。不提供溶壁酶、酵母裂解酶或玻璃珠(酵母样本需要)。因样本来源的发育阶段、种属和生长条件的不同,从样本中分离的RNA量也各异。由于RNA酶步骤富集的RNA种属>200 nt,因此RNA产量不包括5S rRNA、tRNA或其他低分子量RNA。
2
对少至100个细胞的RNA进行RT-PCR。
使用RNeasy Mini Kit从图示数目的HeLa细胞中分离的总RNA的RT-PCR。使用不含RNA酶的DNA酶酶切10 µl(1/5)洗脱液,并使用oligo-dT引物进行逆转录。使用2.5 µl(1/20)的cDNA混合物进行50 µl PCR。扩增452 bp的GAPDH片段。C-:阴性对照;C+:阳性对照;M:100 bp分子量标准。
3
RNeasy Mini离心柱。
RNeasy Mini Kit中提供RNeasy Mini离心柱。
Performance

RNeasy Mini Kit可从至多30 mg动物或人类组织样本,或从100–1 x 107个动物或人类细胞样本或酵母中纯化总RNA(参见"RT-PCR of RNA from as few as 100 cells"和"High-quality RNA from a variety of samples")。

RNeasy Mini Kit纯化得到的总RNA产量
样本来源 起始材料 平均产量(µg)
动物细胞
LMH
HeLa
COS-7
淋巴细胞(未受激)

1 x 106
1 x 106
1 x 106
1 x 106

12
15
35
0.5
小鼠组织



10 mg
10 mg
10 mg

40
10
35
真菌细胞
S. cerevisiae

1 x 107

25
 
Principle

RNeasy Mini Kit可从少量的样本中高效纯化总RNA。RNeasy纯化技术整合了苯酚/异硫氰酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度,简化了总RNA纯化技术。纯化得到高品质的RNA,并且DNA残留水平达到最低。

Procedure
RNeasy Mini Kit可从10–1 x 107个动物或人类细胞中、0.5–30 mg动物或人类组织中或小于5 x 107个酵母细胞中方便的纯化总RNA。先对样本进行破碎和匀浆。在裂解物中加入乙醇以提供合适的结合条件。然后将裂解物上样至RNeasy硅胶膜(参见"RNeasy Mini spin column")。RNA结合到膜上(最多可结合100 µg),污染物被高效洗去。对于某些对少量DNA十分敏感的RNA应用,可在RNeasy操作过程中进行柱上DNA酶处理,去除DNA残留。之后可在30–100 µl的纯水洗脱液中得到高浓度的纯化RNA(参见"RNeasy Mini procedure")。还有各种特殊应用的实验方案可供选择。
Applications

使用RNeasy技术纯化得到的RNA的A260/280比为1.9–2.1(10 mM Tris­·Cl、pH 7.5的溶液中),适用于多种下游应用,包括:

  • Northern印迹、点印迹和狭缝印迹
  • 终点式RT-PCR
  • 定量real-time RT-PCR
  • 芯片分析
  • Poly A+ RNA筛选
Features
Specifications
应用 PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray
洗脱体积 30–100 µl
规格 Spin column
主要样本类型 Tissue, cells
处理 Manual (centrifugation)
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 Total RNA
样本量 0.5–30 mg
技术 Silica technology
每次运行或制备时间 20 minutes
产量 Varies

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试剂盒操作手册 (1)
RNeasy Mini Kit - For purification of total RNA from animal cells, animal tissues, bacteria, and yeast, and for RNA cleanup; RNeasy Protect Mini Kit - For immediate stabilization of RNA in harvested animal tissues and subsequent total RNA purification; RNeasy Plant Mini Kit - For purification of total RNA from plants and filamentous fungi
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补充实验方案 (4)

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Up to 1 x 109 bacteria are disrupted and homogenized by bead-milling in a guanidine-thiocyanate-containing lysis buffer. After addition of ethanol, the sample is loaded onto an RNeasy Mini spin column. Total RNA binds to the RNeasy silica-membrane, contaminants are efficiently washed away, and high-quality RNA is eluted in RNase-free water.
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用户开发的实验方案 (1)
One milliliter of milk contains approximately 50,000-200,000 leukocytes (with an average of approximately 100,000 leukocytes). In a BVDV-infected animal up to 1-30% of the leukocytes may be infected with the virus. Each infected leukocyte typically contains 10-10,000 BVDV entities.
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参考文献
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