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RNeasy Micro Kit

从细胞或组织样本中纯化至多45 μg的总RNA

  • 数分钟内快速纯化得到高品质总RNA
  • 即用型RNA在各种下游应用中表现良好
  • 微量起始样本, RNA产量稳定
  • 无需酚/氯仿抽提
  • 无需CsCl梯度离心,无需LiCl或乙醇沉淀
RNeasy Micro Kit专用于从微量细胞和组织样本中纯化至多45 μg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent方便的稳定组织样本,使用TissueRuptor或TissueLyser体系高效破碎样本。可在QIAcube全自动核酸分析仪上应用RNeasy Micro Kit实现RNA纯化全自动化。处理更大的样本,可使用RNeasy Mini Kit(离心柱结合能力为100 µg RNA)、RNeasy Midi Kit(离心柱结合能力为1 mg RNA)或RNeasy Maxi Kit(离心柱结合能力为6 mg)。
Cat No./ID: 74004
RNeasy Micro Kit (50)
50 RNeasy MinElute Spin Columns, Collection Tubes (1.5 ml and 2 ml), RNase-free DNase I, Carrier RNA, RNase-free Reagents and Buffers

RNeasy Micro Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
产量稳定,适用于敏感应用。
5位不同的用户使用RNeasy Micro Kit,从2 mg图示大鼠组织中分离总RNA,重复两次。在ABI Sequence Detection System上使用QuantiTect Probe RT-PCR Kit及c-jun特异性引物和探针进行定量real-time RT-PCR。
1
从活检针中纯化获得高品质总RNA。
使用19.5口径的活检针从兔肝脏中进行细针抽吸活检,样本立即置于RNAlater TissueProtect Tube内稳定。使用RNeasy Micro Kit分离总RNA。采用Agilent 2100 Bioanalyzer分析显示了高质量的RNA。
2
RNeasy Micro实验流程。
RNeasy Micro Kit可用于从较小样本中分离总RNA。优化的实验方案适用于显微切割组织、少量标准组织、富含纤维的组织及细胞的RNA分离。还可提供RNA回收和浓缩实验方案。
3
高效的柱上基因组DNA去除。
使用RNeasy Micro Kit从图示量的HeLa细胞中分离总RNA。在ABI Sequence Detection System上使用QuantiTect Probe PCR Kit及c-jun特异性引物和探针进行定量real-time PCR。在逆转录后(+RT)以及未经逆转录步骤直接(-RT)扩增各样本,以评估柱上DNA酶切效率。"-RT"样本中无信号表示未检测到DNA。在"-RT"结果中,仅有50,000个细胞数据点可见。
4
从单细胞中可靠纯化RNA。
使用RNeasy Micro Kit从图示量的HeLa细胞中分离总RNA。[A] 扩增曲线。[B] 交叉点(CP)值与细胞数的相关性。在LightCycler System上使用QuantiTect Probe RT-PCR Kit及β-actin特异性引物和探针进行real-time RT-PCR。
Performance
RNeasy Micro Kit可从微量样本中得到高产量总RNA,且重复性好。从少量细胞,包括单细胞以及微量标准组织样本中都能纯化得到总RNA(参见"Reliable RNA isolation from a single cell"、"Highly reproducible yields for sensitive applications"和"High-quality total RNA from fine needle aspirates")。RNeasy Micro Kit通过高效的柱上基因组DNA消化可使珍贵的样本在定量基因表达分析中得到最大的敏感度,如real-time RT-PCR(参见"Efficient on-column removal of genomic DNA")。
Principle

RNeasy Micro Kit专用于从微量样本中纯化总RNA,如显微切割组织、细针穿刺样本、微量纤维组织包括心脏和肌肉组织、微量细胞、甚至是单细胞(如FACS筛选细胞)。处理显微切割FFPE组织,我们推荐使用RNeasy FFPE Kit。RNeasy技术整合了苯酚/异硫氰酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度,简化了总RNA的纯化技术。RNeasy MinElute离心柱独特的设计可确保最小的洗脱体积,小至10 µl,实现RNA的高度浓缩。小洗脱体积意味着下游的反应可控制在小体积范围内,提高反应效率。高纯度确保全部样本可用于反转录等下游应用,无酶抑制。

Procedure

RNeasy Micro Kit专用于从微量样本中纯化总RNA。先对样本(<5 mg组织或<5 x 105个细胞)进行破碎和匀浆。在裂解物中加入乙醇以提供合适的结合条件。然后将裂解物上样至RNeasy MinElute离心柱,RNA(至多45 µg)结合到硅胶膜上。RNeasy Micro Kit包含RNase-free DNase,确保简单、高效的柱上基因组DNA消化,适用于敏感的应用。DNase和其他污染物被高效洗去后,10–14 µl水洗脱得到高浓度的纯化RNA。

Applications

RNeasy Micro Kit纯化得到小洗脱体积(10 µl)RNA,重复性好,适用于敏感的定量基因表达分析,包括以单细胞为起始样本的real-time RT-PCR。

Features
Specifications
应用 PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray
洗脱体积 10–14 µl
规格 Spin column
主要样本类型 Tissue, cells
处理 Manual
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 RNA
样本量 <5 mg
技术 Silica technology
每次运行或制备时间 30–40 minutes
产量 Varies

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试剂盒操作手册 (1)
For purification of total RNA from small samples, including
  • animal and human cells
  • animal and human tissues
  • fibrous tissues
  • microdissected cryosections
and for RNA cleanup and concentration
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