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RNeasy Maxi Kit

从细胞、组织或酵母中纯化多至6 mg的总RNA

  • 数分钟内快速纯化得到高品质总RNA
  • 即用型RNA在各种下游应用中表现良好
  • 大量起始样本,RNA产量稳定
  • 无需酚/氯仿抽提
  • 无需CsCl梯度离心,无LiCl或者乙醇沉淀
RNeasy Maxi Kit可从细胞、组织或酵母中快速纯化高品质RNA,使用的硅胶膜RNeasy离心柱的结合能力达6 mg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent方便的稳定组织样本,使用TissueRuptor或TissueLyser体系有效的破碎组织。处理更小的样本,可使用RNeasy Micro Kit(离心柱结合能力为45 µg RNA)、RNeasy Mini Kit(离心柱结合能力为100 µg RNA)或RNeasy Midi Kit(离心柱结合能力为1 mg)。
Cat No./ID: 75162
RNeasy Maxi Kit (12)
12 RNeasy Maxi Spin Columns, Collection Tubes (50 ml), RNase-free Reagents and Buffers

RNeasy Maxi Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
RNeasy Maxi实验流程。
RNeasy Kit可提供高质量的RNA,且几乎不含DNA。从真核细胞中分离细胞质RNA需要额外的缓冲液(提供组分)。不提供溶壁酶、酵母裂解酶或玻璃珠(酵母样本需要)。因样本来源的发育阶段、种属和生长条件的不同,从样本中分离的RNA量也各异。由于RNeasy步骤富集的RNA种属>200 nt,因此RNA产量不包括5S rRNA、tRNA或其他低分子量RNA。
1
从多种样本中纯化高品质RNA。
使用RNeasy Maxi Kit纯化的总RNA的甲醛琼脂糖凝胶电泳和northern印迹。从各种来源的样本中分离总RNA(10 µg)上样至各泳道。所有组织均来源于小鼠。酵母:Saccharomyces cerevisiaeE. coli菌株:HB101。32P标记的探针识别的(G)GAPDH;(E)翻译延长因子EF-1α;和(O)外膜蛋白A序列。(E和O分别由瑞士巴塞尔大学的P. Philippsen和德国蒂宾根马克斯-普朗克生物学研究所的U. Henning提供。)B. subtilis未采用探针检测。M:0.24–9.5 kb RNA分子量标准。胚胎、Huh7和HeLa细胞泳道中的7.5 kb条带(图示)为核前体RNA。
2
RNeasy Maxi离心柱。
RNeasy Maxi Kit中提供RNeasy Maxi离心柱。
Performance

使用RNeasy Maxi Kit纯化的高品质总RNA适用于多种下游应用(参见"High-quality RNA from a variety of samples")。RNeasy Maxi Kit可从大量的起始样本中高效纯化总RNA,包括动物或人类细胞、动物或人类组织以及酵母(参见下表)。

RNeasy Maxi Kit纯化得到的总RNA产量
来源 起始材料 平均产量 (mg)
动物细胞
LMH 
HeLa
COS-7
淋巴细胞 (未受激)

5 x 108
4 x 108
1.8 x 108
5 x 108
5.7
6.0
5.8
0.3
小鼠组织
肝 (1 g)
肺 (0.5 g)
脾 (1 g)

1 g
0.5 g
1 g

3.6
0.6
3.2
酵母细胞
S. cerevisiae 

1 x 109

2.4
 
Principle

RNeasy Maxi Kit可从大量的起始样本中高效纯化总RNA。RNeasy技术整合了苯酚/异硫氰酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度,简化了总RNA的纯化流程。可从动物或人类细胞、动物或人类组织以及酵母中简单的纯化总RNA。实验方案包括回收部分纯化的RNA、体外转录产物和酶反应中的RNA。RNeasy纯化得到的核酸适用于各种分子分析或其他下游应用。

Procedure
RNeasy技术简化了总RNA的纯化过程。先对样本(至多5 x 108个动物或人类细胞、2.5 x 109个酵母细胞或150 mg–1 g组织)进行破碎和匀浆。在裂解物中加入乙醇以提供合适的结合条件。然后将裂解物上样至RNeasy硅胶膜(参见"RNeasy Maxi spin column")。RNA(至多6 mg)结合到膜上,污染物被高效洗去。可进行方便的柱上DNase处理,去除残留的DNA。之后用800–2400 µl水洗脱得到高浓度的RNA(参见"RNeasy Maxi procedure")。还有许多特殊应用的实验方案可供选择。
Applications

RNeasy技术纯化得到的RNA的A260/280比为1.9–2.1(10 mM Tris·Cl、pH 7.5的溶液中),适用于多种下游应用,包括:

Northern印迹、点印迹和狭缝印迹
终点式RT-PCR
real-time RT-PCR
芯片分析 
Poly A+ RNA筛选
Features
Specifications
应用 PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray
洗脱体积 800–2400 µl
规格 Spin column
主要样本类型 Tissue, cells
处理 Manual
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 RNA
样本量 150 mg – 1 g
技术 Silica technology
每次运行或制备时间 1 hour
产量 Varies

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