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Oligotex mRNA Mini Kit

从总RNA中纯化mRNA以及回收体外转录产物

  • 只需30分钟即可获得高产量纯mRNA
  • 无需使用oligo-dT纤维素或乙醇沉淀
  • 灵活性强,适合不同起始量的RNA样品
Oligotex mRNA Kits可从总RNA中纯化mRNA,回收poly A+体外转录子。每个Oligotex Kit包括用于结合poly A+ mRNA的Oligotex树脂和用于洗涤、洗脱结合的mRNA的离心柱。Oligotex Direct mRNA Kits可从细胞和组织中纯化mRNA。
Cat No./ID: 70022
Oligotex mRNA Mini Kit (12)
For 12 mRNA minipreps: 200 µl Oligotex Suspension, Small Spin Columns, Collection Tubes (1.5 ml), RNase-Free Reagents and Buffers

Oligotex mRNA Mini Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


Performance

Oligotex mRNA kits适用于从少于0.25 mg到1 mg总RNA起始材料中分离mRNA(见表)。

使用Oligotex树脂纯化的Poly A+ mRNA适用于RT-PCR(参见"RT-PCR of beta-actin mRNA"),使用Oligotex树脂从总RNA中纯化的poly A+ mRNA已被用于Northern 印记、点印记或狭缝印记(参见"Isolation of mRNA from total RNA")。

表. Oligotex mRNA kits的规格
每次实验起始材料量(总RNA) 每个Oligotex mRNA Mini Kit*最多制备次数 每个Oligotex mRNA Midi Kit*最多制备次数
≤0.25 mg 12 (13) 12 (28)
0.25—0.5 mg 6 12 (14)
0.5—0.75 mg 4 12 (14)
0.75—1 mg 3 12

* 使用离心管操作流程。批量实验流程可选。 
 购买额外的离心柱后,每个试剂盒的最多制备次数。可能需要额外的1.5 ml微离心管。

Principle

Oligotex mRNA Kits含有离心柱和各种必需的试剂,用于从总RNA样品中纯化poly A+ mRNA或回收体外转录产物。Oligotex树脂由大小均一(直径1.1 µm )的聚苯乙烯-橡胶颗粒组成,为完美的球状(参见"Oligotex particles and oligo-dT cellulose"),含有与表面共价结合的dC10T30寡核苷酸。Oligotex颗粒的大小、成分和表面结构经优化,均匀分散并需要最少的离心时间。颗粒形成稳定的悬浮液,为快速和高效结合多聚腺苷酸提供较大的表面积。

高效率、高精确度的杂交确保通过快速、高效的杂交获得高纯度的poly A+ mRNA。mRNA回收率通常都高于90%。Oligotex纯化过程将poly A+ RNA流失降至最低,避免RNase降解风险,手动操作时间最少化。这些都使得该产品是同步处理多个样品的理想选择。Poly A+ mRNA适用于各种标准应用,也适用于敏感应用,如表达分析、差异显示、cDNA文库构建、显微注射和SAGE技术。Oligotex Suspension也可单独购买。

Procedure

经优化的Oligotex纯化流程方便简单(参见"Oligotex mRNA procedure"),将总RNA与Oligotex树脂共同孵育,简单离心收集Oligotex:mRNA复合物。试剂盒中提供的离心柱提供最方便的操作,同时为某些应用提供可选的批量操作流程。洗涤之后,用小体积量的Tris缓冲夜或水洗脱mRNA。无需乙醇沉淀。

Applications

使用Oligotex树脂纯化的Poly A+ mRNA适用于多种下游应用,包括:

  • RT-PCR
  • cDNA合成
  • cDNA库的构建
  • 消减杂交
  • 体外翻译
Features
Specifications
应用 PCR, real-time PCR, microarray, transfection..
洗脱体积 20–100 µl
规格 Spin column
主要样本类型 Total RNA
处理 Manual (centrifugation)
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 Poly A+ mRNA
样本量 <250 µg
稳定 Yes
技术 Polystyrene-latex particles
每次运行或制备时间 33–50 minutes
产量 >90% recovery

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试剂盒操作手册 (1)
For Purification of poly A+ RNA from total RNA, purification of poly A+ RNA directly, from cultured cells or tissues, and purification of polyadenylated in vitro transcripts 
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用户开发的实验方案 (1)
The procedure has been used successfully by customers for regeneration of Oligotex resin from spin columns following elution of poly A+ mRNA.
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