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miRNeasy Micro Kit

用于从少量细胞核组织中纯化miRNA和总RNA
  • 从小样本中有效纯化miRNA和总RNA
  • 高纯度RNA,适用于多种下游应用
  • 简单、灵敏的操作流程
  • 自动化实验方案

miRNeasy Micro Kit用于从少量培养细胞、分选细胞、冰冻切片激光捕获显微切割(LCM)样本和动物及人体组织中纯化RNA,包括miRNA和其他小RNA分子。

Cat No./ID: 217084
miRNeasy Micro Kit (50)
For 50 total RNA preps: 50 RNeasy MinElute Spin Columns, Collection Tubes (1.5 ml and 2 ml), QIAzol Lysis Reagent, RNase-Free Reagents and Buffers

miRNeasy Micro Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


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从较少量的细胞中可靠回收miRNA。
使用miRNeasy Micro Kit从10倍梯度稀释的Jurkat细胞(106至10个细胞)中纯化总RNA。[A] 采用手动方法或 [B] 使用QIAcube全自动核酸纯化仪,从各洗脱液中纯化RNA,重复两次。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上,使用miScript PCR System及纯化的RNA检测miR-16。在低至10个细胞中亦可检测出miR-16,并获得一致且可重复的CT值。阴性对照中未检测到信号(蓝色和黄色曲线)。
Performance
miRNeasy Micro Kit可有效纯化来自少量组织和细胞样本的RNA(参见"High, reproducible recovery of miRNA from small cell numbers")。可纯化多种组织和细胞的RNA,包括难裂解组织。

miRNeasy Kits制备的RNA纯度高,可直接用于敏感的下游应用。miRNeasy操作流程将盐或苯酚污染的可能性降到最低,这些污染可能影响后续分析。与其他miRNA纯化(如使用苯酚抽提和沉淀)相比,miRNeasy Micro Kit除了纯度更高以外,还能获得更高产量。
Principle

miRNeasy Micro Kit可从少量培养细胞(至多1 x 106个细胞)和多种动物及人体组织(至多5 mg组织)中纯化总RNA,包括miRNA和其他小RNA分子。试剂盒整合了基于苯酚/胍的样本裂解方法和基于硅胶膜的总RNA纯化方法。

试剂盒中包括的QIAzol Lysis Reagent是苯酚和异硫氰酸胍的单相溶液,便于裂解组织,抑制RNases,并去除大部分有机抽提裂解液中的胞内DNA和蛋白。样本在QIAzol Lysis Reagent中匀浆后,加入氯仿并离心,RNA位于上层水相。抽提水相,在RNeasy MinElute离心柱上纯化RNA,污染物被洗去。独特设计的RNeasy MinElute离心柱可用少至10 µl洗脱体积浓缩RNA。

Procedure

miRNeasy Micro Kit纯化的总RNA包括18个核苷酸以上的RNA。富含miRNA的组分和总RNA(>200 nt)组分可分开纯化(参见"miRNeasy Procedures")。包括miRNA的总RNA非常适合通过real-time RT-PCR的miRNA定量分析。单独富含小RNA的组分更适用于某些mRNA和rRNA会导致更高背景的应用。

在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动纯化miRNA

在QIAcube全自动核酸纯化仪上可完全自动纯化包括miRNA的总RNA(参见"High, reproducible recovery of miRNA from small cell numbers")。新型QIAcube全自动核酸纯化仪采用先进技术处理QIAGEN离心柱,将自动化、低通量样品制备无缝整合到实验室工作流程中。使用QIAcube全自动核酸纯化仪的样品制备流程与手工操作相同(如裂解、结合、洗涤和洗脱),可使用miRNeasy Micro Kit进一步纯化高品质RNA。

Applications

miRNeasy Micro Kit可纯化包括miRNA的总RNA,用于多种应用,包括:

  • Northern印迹分析
  • 定量real-time RT-PCR(如使用miScript PCR System)
  • 芯片分析

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试剂盒操作手册 (1)
For purification of total RNA, including miRNA, from animal and human cells and tissues
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