text.skipToContent text.skipToNavigation

N-Terminus pQE Vector Set

高水平表达N端标记6xHis-tagged蛋白

  • pQE-30载体在三个阅读框都有多克隆位点,用于快速克隆
  • pQE-40载体适用于低表达蛋白或短肽
  • pQE-40载体表达DHFR融合蛋白,提高稳定性和抗原性

此系统提供5种质粒(pQE-9、pQE-30、pQE-31、pQE-32和pQE-40),用于表达N端带有His标签的蛋白。pQE-30、pQE-31和pQE-32在全部三个阅读框都有多克隆位点(MCS),而pQE-9含有另一种较短的多克隆位点。pQE-40用于表达DHFR融合蛋白,适用于表达低表达蛋白或易水解的短肽,DHFR可提高稳定性和抗原性。由于DHFR自身在小鼠和大鼠中几乎没有免疫原性,DHFR融合蛋白非常适合表位筛选。

Cat No./ID: 32915
N-Terminus pQE Vector Set
25 µg each: pQE-9, pQE-30, pQE-31, pQE-32, pQE-40

N-Terminus pQE Vector Set适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


1
QIAexpress pQE Vectors。
PT5: T5启动子;lac O: lac操纵子;RBS: 核糖体结合位点;ATG:起始密码子;6xHis: 6xHis标签序列;MCS: 多克隆位点;Stop Codons:在所有3个读码框中;Col E1: COL E1复制起点;Ampicillin:苄青霉素抗性基因。
Principle

QIAexpress pQE载体含有一个强大的噬菌体T5启动子(被E. coli RNA聚合酶识别),并含有两个lac操纵子遏制模块,用于在E. coli中严谨调控、高水平表达融合蛋白(参见"QIAexpress pQE vector")。在高水平lac遏制子存在的情况下,蛋白合成被有效断,细胞毒素载体的稳定性增强。pQE载体(参见pQE Vectors)可在重组蛋白的N端或C端带上6xHis标签。

QIAexpress pQE载体的元件
元件 描述
优化的启动子/操纵子元件 由噬菌体T5启动子和两个lac操纵子序列组成,提高lac遏制子结合的可能性,确保高效遏制T5启动子
合成核糖体结合位点RBSII 用于高效翻译
6xHis标签编码序列 在多克隆区域的5'或3'端
翻译终止密码 在所有阅读框都含有,方便构建表达载体
两个强大的翻译终止子 来自噬菌体ambda的t0和来自E. coli操纵子rrnB的T1,避免通读转录,确保表达载体稳定性
ColE1复制起始位点 来自pBR322
Beta-lactamase基因(bla) 赋予氨苄青霉素抗性
Procedure

编码目的蛋白的片段被克隆到合适的载体(详细信息可参见The QIAexpressionist Handbook)并转化至合适的E. coli表达菌株。加入IPTG诱导表达。Vector pQE-TriSystem载体可转化至E. coli,作为穿梭载体在昆虫细胞中表达重组蛋白,或转染至哺乳动物细胞。

Applications

QIAexpress Expression系统提供高水平蛋白表达,适用于多种应用,包括:

  • 纯化功能、构象有活性的蛋白 
  • 变性条件纯化,用于抗体制备
  • 结晶,用于确定三维结构
  • 蛋白间和蛋白与DNA间相互作用分析
Features
Specifications
三个阅读框 Yes
表达 In vivo
表达物种 E. coli
需要框内克隆 Yes
N或C末端标签 N-terminal tag
标签 6xHis tag
标签去除序列 No

您无权限查看此资源

试剂盒操作手册 (1)
A handbook for high-level expression and purification of 6xHis-tagged proteins
显示更多
参考文献
0
fragment fix placeholder