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Qproteome Nuclear Protein Kit

核蛋白分离和分类抽提

  • 制备不含胞浆蛋白的核蛋白
  • 极大降低了样本复杂性
  • 高度重复性的核蛋白分离制备
  • 同样适用于组织样本

Qproteome Nuclear Protein Kit专为哺乳动物培养细胞的核蛋白制备而设计。

Cat No./ID: 37582
Qproteome Nuclear Protein Kit
For 12 nuclear protein preparations: Buffers, Reagents, Protease Inhibitor Solution, Benzonase

Qproteome Nuclear Protein Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


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分离激活的转录因子。
包含特定转录因子结合序列的生物素化DNA寡核苷酸固定于链霉亲和素包被的96孔板上。加入NX1抽提缓冲液 (空白)或10 µg核酸结合蛋白组分,洗涤,并使用转录因子特异性抗体,利用ELISA步骤进行比色法检测。加入10x过量的非生物素化寡核苷酸替代转录因子,证明结合的特异性。
1
核蛋白质分离流程。
2
高效、可重复的分离标记蛋白。
使用Qproteome Nuclear Protein Kit同时处理3种细胞裂解制备物。采用SDS-PAGE分离各组分。在Western印迹步骤中,使用蛋白特异性抗体检测组分特异性标记物(GAPDH,胞浆组分;转录因子SP1,核酸结合蛋白组分 [NABP];核孔蛋白,不可溶组分)。
Performance
Qproteome Nuclear Protein Kit提供高效和可重复的核蛋白质分离,使用特定的标志蛋白(参见"Reproducible, efficient separation of marker proteins"),保持功能活跃(参见"Isolation of an active transcription factor")。
Principle

Qproteome Nuclear Protein Kit用于从培养的哺乳细胞中抽提核蛋白。通过裂解和离心,使胞浆(上清)和细胞核(沉淀)分离。高盐缓冲液使得核结合蛋白(如转录因子)溶解,从细胞核上分离。

Procedure
裂解细胞并离心,以分离细胞核。洗涤沉淀,加入提取液从DNA和RNA中提取核酸结合蛋白。再次离心得到可溶性组分,在沉淀中的蛋白质加入第二种提取液进行进一步提取(参见"Nuclear protein fractionation procedure")。
Applications

Qproteome Nuclear Protein Kit可制备核酸结合蛋白,适合广泛的蛋白活性分析。

Features
Specifications
应用 SDS-PAGE, mass spectrometry
结合能力/产量 200–300 µg
糖蛋白:哪种类型糖蛋白 n.d
分离组分 Three fractions
样本大小 5 x 10e6 cells
物种 Mammal
起始材料 Cell cultures
fragment fix placeholder