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pQE-TriSystem Vector

E. coli、哺乳动物细胞和杆状病毒感染的昆虫细胞中平行表达C端带有6xHis标签的重组蛋白
  • 无需进行费时的亚克隆步骤
  • 在昆虫细胞或哺乳动物细胞中获得翻译后修饰
  • 一个质粒能在三种表达系统中高效表达
pQE TriSystem Vector可在三种不同表达系统中通过一种质粒高水平表达His-tagged蛋白。T5启动子/lac操纵子转录翻译系统在E. coli中表达,p10启动子在昆虫细胞中进行基于杆状病毒的表达,CAG(CMV/肌动蛋白/球蛋白)启动子可在哺乳动物细胞中表达。
Cat No./ID: 33903
pQE-TriSystem Vector
25 μg pQE-TriSystem Vector DNA

pQE-TriSystem Vector适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
pQE Vectors。

Numbered elements listed in table.

1
pQE TriSystem.
Performance
pQE-TriSystem载体含有的CAG、T5和p10启动子可分别在哺乳动物细胞、E. coli和杆状病毒感染的昆虫细胞中表达6xHis-tagged蛋白(参见pQE TriSystem)。初步研究可在细菌表达系统中进行,使用的T5启动子能被E. coli聚合酶有效识别,在E. coli菌株中高效表达蛋白。如果需要在哺乳动物细胞或昆虫细胞中表达,如需获得翻译后修饰,可使用相同载体,无需费时的亚克隆步骤。
Principle

QIAexpress pQE载体含有一个强大的噬菌体T5启动子(被E. coli RNA聚合酶识别),并含有两个lac操纵子遏制模块,用于在E. coli中严谨调控、高水平表达融合蛋白。在高水平lac遏制子存在的情况下,蛋白合成被有效断,细胞毒素载体的稳定性增强。pQE载体(参见pQE Vectors)可在重组蛋白的N端或C端带上6xHis标签。

QIAexpress pQE载体的元件
元件 描述
优化的启动子/操纵子元件 由噬菌体T5启动子和两个lac操纵子序列组成,提高lac遏制子结合的可能性,确保高效遏制T5启动子
合成核糖体结合位点RBSII 用于高效翻译
6xHis标签编码序列 在多克隆区域的5'或3'端
翻译终止密码 在所有阅读框都含有,方便构建表达载体
两个强大的翻译终止子 来自噬菌体ambda的t0和来自E. coli操纵子rrnB的T1,避免通读转录,确保表达载体稳定性
ColE1复制起始位点 来自pBR322
Beta-lactamase基因(bla) 赋予氨苄青霉素抗性
Procedure

编码目的蛋白的片段被克隆到合适的载体(详细信息可参见The QIAexpressionist Handbook)并转化至合适的E. coli表达菌株。加入IPTG诱导表达。Vector pQE-TriSystem载体可转化至E. coli,作为穿梭载体在昆虫细胞中表达重组蛋白,或转染至哺乳动物细胞。

Applications

QIAexpress Expression系统提供高水平蛋白表达,适用于多种应用,包括:

  • 纯化功能、构象有活性的蛋白 
  • 变性条件纯化,用于抗体制备
  • 结晶,用于确定三维结构
  • 蛋白间和蛋白与DNA间相互作用分析
Features
Specifications
三个阅读框 No
表达 In vivo
表达物种 E.coli, mammalian & insect cells
需要框内克隆 Yes
N或C末端标签 C-terminal tag
标签 6xHis tag
标签去除序列 No
fragment fix placeholder