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Ni-NTA Fast Start Kit

纯化和检测大肠杆菌裂解液中的His-tagged蛋白

  • 适合蛋白研究领域的初学者
  • 包含纯化所需要的所有试剂
  • 操作流程简单
  • 90分钟内每个纯化柱可获得至多25 mg的蛋白
Ni-NTA Fast Start Kit提供从E.coli裂解液上清液中纯化Hi-tagged蛋白需要的所有组分,包括预装Ni-NTA的纯化柱。试剂盒中提供的缓冲液可以在天然或变性条件下纯化蛋白。该试剂盒还提供抗His抗体用于检测His-tagged蛋白。
Cat No./ID: 30600
Ni-NTA Fast Start Kit (6)
For purification and detection of six 6xHis-tagged protein preps: 6 x Fast Start Columns, Penta·His Antibody, Buffers and Reagents

Ni-NTA Fast Start Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
高纯度His-tagged蛋白。
1
在天然或变性条件下纯化高纯度蛋白。
考马斯亮蓝染色的SDS-PAGE胶在[A]变性条件下纯化6xHis-tagged的硫氧还蛋白,[B] 非变性条件下纯化6xHis-tagged绿色荧光蛋白(GFP)。M:标记;CL:细胞裂解物;FT:流出液;Wash:洗涤液;E1 & E2:洗脱液。 每种组分取5 µl上样。
Performance
Ni-NTA Fast Start Kit含有从E.coli裂解上清液中快速、高效纯化His-tagged蛋白所需的所有试剂。该试剂盒中的缓冲液可在天然或变性条件下纯化蛋白(参见High purity proteins under native or denaturing conditions)。Ni-NTA Fast Start Kit的实验流程简单、直观,所含试剂为即用型试剂,因此该试剂盒是刚步入蛋白表达研究领域的科研人员的理想选择。
Principle

Ni-NTA Fast Start Kit基于获得专利的Ni-NTA(氨基三乙酸镍)树脂,对含有6个或以上组氨酸残基(连续或交替)亲合标签的蛋白选择能力强。该技术可在天然或变性条件下,一步纯化几乎所有的His-tagged蛋白。NTA含有四个镍离子螯合位点,与镍的结合能力比其他仅有三个金属螯合位点的金属螯合纯化方法的结合能力强。多出的一个螯合位点可防止镍离子浸出,因此具有更强的结合能力,制备的蛋白纯度比金属螯合纯化方法的蛋白纯度高。His标签形成的表位可被该试剂盒中的Penta•His Antibody所识别。

Procedure
使用试剂盒中提供的裂解缓冲液裂解细胞,离心后得到裂解上清液。将裂解液上样至Fast Start Column,His-tagged蛋白高亲合性结合到柱上,非标记蛋白随流出液流出。洗涤后,使用含有咪唑的缓冲液(天然条件)或低pH值得缓冲液(变性条件)洗脱得到纯化的蛋白(参见Highly pure 6xHis-tagged protein)。纯化得到的蛋白可与Penta•His Antibody一同用于SDS-PAGE、Western印迹和免疫检测。
Applications

Ni-NTA Fast Start Kit可靠的一步纯化得到His-tagged蛋白,适合各种应用,包括:

  • 蛋白功能研究
  • 抗体制备
  • 蛋白与蛋白、蛋白与DNA相互作用研究
  • 蛋白结构研究
Features
Specifications
应用 Proteomics
结合能力 5–20 mg/ml
重力流或离心柱 Gravity flow
处理 Manual
特性 Ni-NTA technology
起始材料 Cell lysate
支持/基质 Ni-NTA matrix
标签 6xHis tag
产量 <10 mg protein per column

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