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QIAEX II Suspension

从琼脂糖凝胶/溶液中批量纯化DNA片段(40 bp–50 kb)

  • 高效回收40 bp–50 kb的DNA
  • 从琼脂糖凝胶和聚丙乙烯酰胺凝胶中回收DNA
  • 无碘化钠,避免干扰后续反应
  • 避免DNA大片段的剪切

QIAEX II Suspension是硅胶颗粒悬浮液,在离液盐存在的条件下,DNA片段结合到硅胶颗粒上。QIAEX II Suspension添加到溶液或溶解的琼脂糖凝胶中结合DNA。通过简单的离心操作收集硅胶颗粒,洗涤后用Tris缓冲液或水洗脱得到40 bp–50 kb的DNA。

Cat No./ID: 20902
QIAEX II Suspension (1.5 ml)
1.5 ml suspension

QIAEX II Suspension适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


Performance
QIAEX II Suspension可高效回收获得10 ng–10 µg DNA(参见"Consistent recovery")。使用30 µl QIAEX II悬浮液,多功能的批处理流程使硅胶颗粒能结合多达15 µg的DNA。

QIAEX II Suspension应用硅胶颗粒DNA片段(40 bp–50 kb),回收率可达60–95%。10 µl体积的QIAEX II可结合至多5 µg DNA,后续洗脱液只需20 µl。

根据片段大小回收
DNA大小 回收率,百分比*
44 bp 75
75 bp 75
500 bp 95
7.5 kb 85
23.5 kb 75
48.5 kb 60
* 从上样2 µg的1% TAE琼脂糖凝胶中回收
Principle

使用QIAEX II体系纯化DNA片段的基本条件是,在离液盐存在的情况下,琼脂糖处于溶解状态,并且核酸可选择性的吸附到QIAEX II硅胶颗粒上。QIAEX II从盐、琼脂糖、聚丙烯酰胺、染料、蛋白质和核酸中纯化DNA,无需苯酚提取或乙醇沉淀。QIAEX II对TAE和TBE缓冲液中的多种琼脂糖都有效。

QIAEX II颗粒确保高效回收DNA,且不被剪切,大片段的DNA也不例外。碘化钠是一种不容易从DNA样本中去除,还会影响后续反应的物质,优化的缓冲液可使回收的DNA中不含碘化钠。

QIAEX II体系使用的溶解和结合缓冲液包含一种特殊的pH指示剂。简单的颜色变化即可指示结合混合液的最佳pH值,确保DNA有效吸附到QIAEX II硅胶颗粒(参见"pH indicator dye")。有色染料也容易辨别结合混合液中未溶解的琼脂糖,确保完全溶解,获得最大的DNA产量。

溶解和结合缓冲液中的pH指示剂染料很容易辨别得到DNA吸附的最佳pH值(pH≤7.5)。如果琼脂糖凝胶电泳缓冲液频繁使用或者制备方法不正确,结合混合液pH值将不正确。这种情况下,加入10 µl pH 5.0的3 M醋酸钠,即可调整为合适的pH值。

Procedure

QIAEX II硅胶颗粒加入到溶解的凝胶碎片中,颗粒通过简单的离心操作收集。洗涤后,纯DNA用20 µl Tris缓冲液或水洗脱。

配有从琼脂糖凝胶、溶液和聚丙烯酰胺凝胶中纯化DNA的实验方案。

Applications

QIAEX II体系纯化得到的DNA可即用于多种应用,包括:

限制性酶切
标记
连接
PCR
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