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QIAamp DNA Blood Maxi Kit

从血液中纯化基因组DNA、线粒体DNA或病毒DNA,最高可达600 μg

  • 快速纯化高品质,即用型DNA
  • 无需有机提取或乙醇沉淀
  • 重复性好,产量高
  • 完全去除污染物和抑制剂

QIAamp DNA Blood Maxi Kit应用硅胶模技术,用于实验室从全血、血浆、血清和其它体液中纯化DNA。QIAamp DNA Blood Maxi Kit可处理3–10 ml新鲜或冷冻的人类全血。QIAamp Maxi离心柱可在离心机或真空装置上处理(使用真空装置需要额外的缓冲液AW1 [货号:19081]和AW2 [货号:19072] )。

Cat No./ID: 51192
QIAamp DNA Blood Maxi Kit (10)
For 10 DNA maxipreps: 10 QIAamp Maxi Spin Columns, QIAGEN Protease, Buffers, Collection Tubes (50 ml)
Cat No./ID: 51194
QIAamp DNA Blood Maxi Kit (50)
For 50 DNA maxipreps: 50 QIAamp Maxi Spin Columns, QIAGEN Protease, Buffers, Collection Tubes (50 ml)

QIAamp DNA Blood Maxi Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
QIAamp Spin Column实验流程。
采用优化的缓冲液裂解样本、稳定核酸并增强DNA在QIAamp膜上的选择性吸附。加入乙醇,并将裂解物上样于QIAamp离心柱。使用洗涤缓冲液去除杂质,然后用水或低盐缓冲液洗脱纯的即用型DNA。
1
储存的血液中的细胞凋亡带型。
将8个血液样本的基因组DNA置于4°C保存1周。使用QIAamp DNA Blood Mini Kit纯化DNA。当血液置于4°C保存时,由于细胞凋亡作用,DNA会迅速降解;在这些样本中可以清晰地观察到形成的凋亡带型。M1:lambda-HindIIIM2:100 bp分子量标准。
2
长片段PCR。
从血液中分离的基因组DNA中的人ALDH1基因的10 kb片段的扩增。使用传统方法(酚)或QIAamp DNA Blood Maxi Kit(QIAamp)纯化DNA。直接测序PCR产物。M:1 kb分子量标准。
3
采用RFLP分析进行亲子鉴定。
在三个亲子鉴定案例中,检测使用QIAamp DNA Blood Mini Kit从血液样本中纯化的DNA。1: 母亲;2:孩子;3:疑父;4:孩子+疑父。M:分子量标准。每个泳道上样3 µg DNA。结果:A:被排除的疑父;B & C:确认的疑父。(数据由美国田纳西州纳什维尔Gene Proof Technologies的J. James提供。)
Performance

QIAamp DNA Blood Kits根据样本存储条件和新鲜程度不同,可纯化获得200 bp–50 kb的DNA(参见"Apoptotic banding in stored blood")。纯化的DNA适用于长片段PCR扩增(参见"Long-range PCR")和RFLP分析等等,如亲子鉴定(参见"Paternity testing by RFLP analysis")。

使用QIAamp DNA Blood Maxi Kit获得DNA的回收率可高达95.8%,依初始细胞密度而定(见表)。

从不同细胞密度的人类全血中纯化的DNA产量
白细胞/ ml DNA产量(µg) DNA回收率(%)
2.5 x 105 15.8 95.8
1.0 x 106 60.4 91.5
5.0 x 106 312.0 94.5
1.0 x 107 624.6 94.6
使用QIAamp DNA Blood Maxi Kit,从10 ml人类全血中纯化得到基因组DNA,并用1 ml洗脱液洗脱。第一次的洗出液再次上样到离心柱并离心(即:再洗脱)。假设一个白细胞包含6.6 pgDNA,计算DNA回收率。
Principle

无需苯酚-氯仿抽提。DNA特异性结合到QIAamp硅胶膜上,让污染物流过。PCR抑制物,如:二价阳离子和蛋白,可通过两步有效的洗涤步骤被完全去除,结合在离心柱上的纯核酸可用水或试剂盒中的缓冲液洗脱。

Procedure

QIAamp DNA Blood Maxi Kit采用快速离心柱操作简化了从全血或相关体液中纯化DNA的流程(参见"procedure")。该试剂盒可处理带有EDTA、柠檬酸盐和肝素等常规抗凝剂的新鲜或冷冻的全血样本。QIAamp DNA Blood Maxi Kit可处理3–10 ml的样本,制备时间55分钟。可从10 ml健康全血中获得300–600 µg DNA,洗脱体积500–2000 µl。

QIAamp DNA Blood Kits提供全面的操作手册,包括从不同来源的样本中纯化DNA的操作流程。QIAamp样本制备技术已完全经过验证。

Applications

QIAamp DNA Blood Maxi Kit使用经验证的QIAamp技术,采用带有50 ml收集管的Maxi离心柱从不同来源的样本中纯化DNA。样本来源包括:

新鲜和冷冻的全血或白膜层
血浆或血清
骨髓
淋巴细胞
体液
Features
Specifications
应用 PCR, blotting
洗脱体积 500–2000 µl
规格 Spin column
主要样本类型 Whole blood, body fluids
处理 Manual (centrifugation or vacuum)
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 Genomic DNA, mitochondrial DNA, viral DNA
样本量 3–10 ml
技术 Silica technology
每次运行或制备时间 55 minutes
产量 300–600 µg

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试剂盒操作手册 (1)
For large-scale genomic and viral DNA purification from whole blood, plasma, serum, body fluids, lymphocytes
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参考文献
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