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cador Pathogen 96 QIAcube HT Kit

用于从动物样本自动、高通量分离病毒RNA、DNA和细菌DNA
  • 简便可靠的自动化处理,省时且经济
  • 同时兼容病毒RNA、DNA和细菌DNA样本的通用型仪器实验方案 
  • 适于包括全血、血清和组织的多种样本类型
  • 能够高效去除抑制剂和污染物
  • 核酸纯化产物可直接用于real-time PCR或RT-PCR分析
在QIAcube HT仪器上使用cador Pathogen 96 QIAcube HT Kit,可从大量的动物样本中方便地自动分离病毒RNA、DNA和细菌DNA。其采用成熟的QIAamp硅胶膜技术,以96孔板的形式方便地去除污染物和抑制剂,获得可直接用于下游分析的优质病原体核酸。
Cat No./ID: 54161
cador Pathogen 96 QIAcube HT Kit (5)
For 480 preps: QIAamp 96 plates, QIAGEN Proteinase K, Carrier RNA, buffers
Cat No./ID: 950067
QIAcube HT Plasticware
Plasticware for 480 typical preps on QIAcube HT:
5 S-Blocks, 5 Elution Microtubes RS (EMTR), 120 x 8-Well Strip Caps for EMTR, 9 x 96 Filter-Tips OnCor C, TapePad
科研使用,不可用于兽医学诊断,不为兽类疾病的诊断、预防或治疗提供信息。
0
病毒RNA和细菌DNA共纯化。
在多种动物样本中同时加入BVDV病毒和沙门氏菌属细胞。在QIAcube HT仪器上使用cador Pathogen 96 QIAcube HT Kit自动纯化,或使用QIAamp cador Pathogen Mini Kit手动处理样本。使用实验室内部研发试剂检测共纯化的病毒RNA和细菌DNA。图示为CT平均值,[A] 为BVDV,[B]为沙门氏菌属细胞。小误差条表示两种纯化方式都十分准确。
1
高度可重复的分离病毒RNA。
在不同物种的血液样本中加入BVDV,在–20°C冻存。每个样本在QIAcube HT上使用cador Pathogen 96 QIAcube HT Kit进行4次重复纯化,后三次在不同日子进行。[A] 使用实验室内部检测方法检测病毒RNA,包含[B] 扩增内参。误差条显示三次重复的标准差为±1。每组样本BVDV的CT值平均相对标准偏差为0.67 ± 0.43%,每个样本后续三次实验的批间CV在0.14至0.89%之间(平均值0.45%),表明在QIAcube HT上纯化病毒RNA具有高度可重复性。
2
高性能实验方案。
在多种动物样本中同时加入BVDV病毒和沙门氏菌属细胞。在QIAcube HT仪器上使用cador Pathogen 96 QIAcube HT Kit自动纯化,或使用另一供应商的同类试剂盒。使用实验室内部研发试剂检测共纯化的病毒RNA和细菌DNA。图示为CT平均值,[A] 为BVDV,[B]为沙门氏菌属细胞。小误差条标准差为±1。在QIAcube HT上纯化的样本无论起始材料如何,其细菌DNA和病毒DNA的CT值较低,
Performance
cador Pathogen 96 QIAcube HT Kit能从包括全血、血清、血浆、体液、拭子、洗液、组织和粪便等在内的不同的动物样本中快速、可靠地自动纯化病毒RNA、DNA和细菌DNA。其所获得的优质核酸可以直接用于多种敏感的下游应用。

该试剂盒可从未经稀释的动物全血样本简便、快速地纯化核酸,同时能最大限度控制硅胶膜堵塞的风险。其以96孔板形式进行自动样本处理,精确度佳且不同工作日、不同纯化操作之间具有良好的可重复性,不仅使用方便,而且令人放心(参见Highly repeatable viral RNA isolation)。

QIAcube HT仪器与cador Pathogen QIAcube HT Kit配合使用,能够用同通用实验方案,同时从大量样本中纯化不同核酸产物。病毒RNA与细菌DNA的共纯化步骤简单可靠,能够获得与QIAamp cador Pathogen Mini Kit手动纯化操作同等质量的核酸(参见Co-isolation of viral RNA and bacterial DNA)。与其他供应商的试剂盒相比,cador Pathogen 96 QIAcube HT Kit性能十分突出,甚至在其它试剂盒无法克服的困难条件下也能成功进行分离操作(参见High performance protocol)。
Principle
cador Pathogen 96 QIAcube HT Kit能够自动纯化病原体核酸(病毒RNA、DNA和细菌DNA),在使用QIAcube HT仪器时至多可处理200 μl的动物全血、血清、血浆、拭子或洗液。通过应用cador Pathogen 96 QIAcube HT手册所述的预处理方法,该试剂盒也可用于组织和粪便样本。此操作能够制备优质的DNA和RNA样本,可用于下游的PCR、RT-PCR及其它应用。

cador Pathogen 96 QIAcube HT Kit整合了硅胶膜的选择性结合能力与96孔板的高通量处理能力,更具备全自动设计,能同时在QIAcube HT仪器上处理24–96个样本。

试剂盒规格
规格 描述
样本数量 24–96个样本(处理数目以8为单位递增)
起始样本体积 至多200 μl
洗脱体积 150 μl
时长 96份样本需90分钟左右*
24份样本需60分钟左右*
每增加8个样本则需增加处理时间5分钟
* 标准实验方案的时间,未含任何的样本预处理步骤。
Procedure
样本在室温、存在蛋白酶K和VXL缓冲液的高度变性条件下裂解,共同确保了核酸酶的失活。加入缓冲液ACB以调整DNA与RNA共纯化的结合条件。之后将裂解产物转移至QIAamp 96孔板中。抽真空的同时,DNA会选择性地与QIAamp膜相结合,而杂质则被洗去。通过三次高效的洗涤步骤能够去除残存的污染物和酶抑制剂,最后在AVE缓冲液中洗脱核酸。

主实验方案包括了裂解、结合、漂洗和洗脱等步骤,多数常见的液体样本可直接使用主实验方案处理。不过,根据起始材料和靶标病原物,有时需要增加一步预处理步骤(参见下表)。预处理后的下游处理步骤与其它液体样本一致,并可在QIAcube HT上实现同时自动化处理。

cador Pathogen 96 QIAcube HT Kit操作流程中的预处理方法
名称 应用
预处理方案B1 全血或经预处理组织中的难裂解细菌*
预处理方案B2 无细胞液体样本中的难裂解细菌*
预处理方案T1 机械破碎组织,用于提取病毒RNA和DNA
预处理方案T2 酶消化组织,用于提取病毒和细菌DNA
预处理方案F1 从粪便样本中分离病毒RNA和DNA
预处理方案F2 从粪便样本中分离细菌RNA和DNA 
* 革兰氏阳性细菌由于具有坚硬的细胞壁而难于裂解。不过,一些革兰氏阴性菌同样也难于裂解,具体操作可参考B1或B2预处理方法进行。
Applications
cador Pathogen 96 QIAcube HT Kit能够纯化适于广泛下游应用的高纯度、优质病毒RNA、病毒DNA和细菌DNA,包括以下应用中的real-time PCR和RT-PCR应用:
  • 动物病原体鉴定
  • 动物病原体基因分型检测
  • 流行病学
  • 传染病相关研究
 

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产品介绍与指南 (1)
For fast and reliable automated 96-well nucleic acid purification
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实验方案软件 (4)
Q Protocol notes for purification of pathogen nucleic acids from fluid samples on the QIAcube HT using the cador Pathogen 96 QIAcube HT Kit; use with the cador Pathogen 96 QIAcube HT V3.qsp run file. For use with QIAcube HT Operating Software 4.17; not for use with QIAcube HT Prep Manager Software.
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Installation file (.msi) for installing the Q Protocol run file (.qsp) in the QIAcube HT software. For use with QIAcube HT Operating Software 4.17; not for use with QIAcube HT Prep Manager Software.
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Procedure for installing Q Protocols for QIAcube HT Kits on the QIAcube HT and the QIAxtractor. For use with QIAcube HT Operating Software 4.17; not for use with QIAcube HT Prep Manager Software.
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These Q Protocols and installation files can only be used with QIAcube HT Operating software version 4.17 and are not compatible with the new QIAcube HT Prep Manager software.

QIAcube HT Prep Manager Software already includes all standard protocols. Additional protocols and kit configurations can be easily installed. Check for available updates under the "Operating Software" section of the "Product Resources" tab.
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用户使用手册 (2)
Instrument user manual for automated mid- to high-throughput nucleic acid purification in 96-well format using silica membrane technology; for use with QIAcube HT Operating Software 4.17; not for use with QIAcube HT Prep Manager Software
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Instrument user manual for automated mid- to high-throughput nucleic acid purification in 96-well format using silica membrane technology; for use with QIAcube HT Prep Manager Software.
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快速启动实验方案 (3)
For use with QIAcube HT Operating Software 4.17; not for use with QIAcube HT Prep Manager Software
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For use with QIAcube HT Operating Software 4.17; not for use with QIAcube HT Prep Manager Software
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For use with QIAcube HT Prep Manager Software; not compatible with QIAcube HT Operating Software 4.17
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试剂盒操作手册 (2)
For use with QIAcube HT Prep Manager Software; not compatible with QIAcube HT Operating Software 4.17
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Handbook for purification of pathogen nucleic acids from fluid samples on the QIAcube HT using the cador Pathogen 96 QIAcube HT Kit. For use with QIAcube HT Operating Software 4.17; not compatible with QIAcube HT Prep Manager Software.
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