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AllPrep RNA/Protein Kit

从细胞中同时纯化RNA和蛋白质

  • 从同一样本中纯化获得高品质RNA和蛋白质
  • 采用离心柱法快速纯化
  • 采用较少的细胞高效的进行样本制备
  • 获得高品质的RNA和天然蛋白

AllPrep RNA/Protein Kit可以从同一个细胞培养样本中同时纯化总RNA和天然蛋白。

Cat No./ID: 80404
AllPrep RNA/Protein Kit (50)
50 AllPrep Mini Spin Columns, 50 RNeasy Mini Spin Columns, 50 Protein Cleanup Mini Spin Columns, Collection Tubes, RNase-Free Reagents and Buffers

AllPrep RNA/Protein Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


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从同一细胞样本中纯化完整的RNA和高品质蛋白质。
在Agilent 2100 Bioanalyzer分析从HeLa细胞中纯化的总RNA。rRNA比例(28S/18S)为2.04。从HeLa细胞中纯化获得总蛋白质,通过Western印迹分析。用Lamin和TIM23的抗体分析两份蛋白质样本,结果表明总蛋白中含有亚细胞区室中的蛋白质。
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AllPrep RNA/Protein纯化步骤。
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纯化功能性蛋白。
用β-半乳糖苷酶报告质粒转染96孔板中的HeLa细胞。48小时后纯化蛋白,分析β-半乳糖苷酶的活性(黄色表示酶活性)。使用AllPrep RNA/Protein Kit (AllPrep)或RNeasy Mini Kit(将细胞裂解液通过RNeasy离心柱,流出液中的蛋白被沉淀出来)(Other)纯化蛋白。每一列的孔表示同一细胞样本的三个结果。
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real-time RT-PCR的灵敏度。
使用AllPrep RNA/Protein Kit从HeLa细胞中纯化RNA,然后进行逆转录。通过real-time RT-PCR分析人类GSF3B(糖原合酶激酶3 beta)的cDNA梯度稀释液,相当于100 pg至100 ng的总RNA。一式两份平行进行反应。使用RNeasy Mini Kit纯化的RNA的CT值和可重复性(数据未显示)与AllPrep试剂盒相当。NTC:无模板对照。
Performance
AllPrep RNA/Protein Kit适用于从同一个细胞培养样本中同时纯化总RNA和天然蛋白。使用Agilent 2100 Bioanalyzer对纯化的RNA进行分析通常获得的RIN值为10,表明RNA十分完整。纯化的天然蛋白包含所有细胞蛋白(参见"Highly intact RNA and high-quality protein from the same cell sample")。AllPrep RNA/Protein Kit纯化得到的RNA适用于real-time RT-PCR(参见"Sensitivity in real-time RT-PCR"),纯化得到的细胞蛋白质可用于酶分析(参见"Purification of functional protein")。
Principle

AllPrep RNA/Protein Kit适用于从同一个细胞培养样本中同时纯化总RNA和天然蛋白。该试剂盒可进行高效的样本制备,使用较少量的细胞即可进行纯化,因此适用于在mRNA和蛋白质水平评估siRNA引起的基因敲除。此外,因为RNA和蛋白质来自同一样本,所以基因敲除分析更加可靠。AllPrep RNA/Protein Kit是QIAGEN RNAi和基因表达分析产品线的一部分,可获得具有高度可重复性且灵敏的结果。该试剂盒包含优化的PCR预混液、即用型试剂、siRNA和转染试剂。该产品使RNAi和基因表达分析工作流程标准化,在生物医学研究的各个领域取得了成功。

Procedure
该试剂盒利用离心柱法,可在40分钟内从同一个细胞样本中纯化RNA和蛋白质(参见"AllPrep RNA/Protein procedure")。AllPrep DNA/RNA/Protein Kit可从培养细胞和组织中同时纯化DNA、RNA和蛋白质(适用于Western印迹,不适用于酶分析)。
Applications

AllPrep RNA/Protein Kit适用于从同一个细胞培养样本中同时纯化总RNA和天然蛋白。纯化得到的RNA和蛋白质在下游应用中表现出色,如real-time RT-PCR、Western印迹和酶分析。(注:待测蛋白的功能需要根据其特性进行检测)。

Features
Specifications
应用 PCR, real-time PCR, blotting, microarray
洗脱体积 30–50 µl
规格 Spin column
主要样本类型 Cultured cells
处理 Manual (centrifugation)
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 RNA, native protein
样本量 700 µl
技术 Silica technology
每次运行或制备时间 40 minutes