text.skipToContent text.skipToNavigation

Cignal Finder Lenti Reporter Arrays

用于灵敏检测各种哺乳动物细胞的信号活性

  • 一次实验可分析多条通路
  • 可即用于转导的慢病毒,无需额外制备过程
  • 可用于各种哺乳动物细胞的转导
  • 可转导未分化细胞、干细胞和分化细胞
  • 用于瞬转实验或研发稳定细胞株的报告基因

Cignal Finder Lenti Reporter Arrays是可即用于转导的慢病毒,可检测各种哺乳动物细胞的信号活性。Cignal Finder Lenti Reporter Arrays可对10条信号通路进行全面的分析。通过同时筛选通路活性,可快速找到相关的通路用于进一步研究。Cignal Finder Lenti Reporter Arrays可快速定位特定基因或药物影响的通路。

产品 Product no. 货号 目录价:
 
 
Show details
    varies
Can't order online?
To place an order via phone, email or for requesting a quote, please provide the product’s name, number and catalog number.
Available Products
2
产品 Product no. 货号 目录价:
Cignal Finder Lenti Reporter Array
show details
336831 CLA-002L 询价
Cignal Finder Lenti Reporter Array
show details
336831 CLA-003L 询价
Configure
产品 Product no. 货号 目录价:
 
 
Show details
    varies
Can't order online?
To place an order via phone, email or for requesting a quote, please provide the product’s name, number and catalog number.

Cignal Finder Lenti Reporter Arrays适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
Cignal Lenti Reporter实验流程。
1
Cignal Lenti Reporter Assay.
2
Cignal Finder Lenti Reporter Arrays.
Principle

每个芯片采用转导即用型管规格,含有10个Cignal Lenti Reporter Assays和2个对照。Cignal Finder Lenti Reporter Arrays独特的整合了转录因子报告基因技术和慢病毒技术。

Cignal Finder Lenti Reporter Arrays含有多拷贝的特定转录因子结合部位和基本的启动子元件,可表达报告基因(萤火虫荧光素酶)。

慢病毒是将含报告基因的载体转入大部分哺乳动物细胞(包括未分化细胞)的有效工具。转导的慢病毒报告基因载体与细胞基因组DNA整合,可稳定、长期表达报告基因。

这些报告基因是功能基因组学和药物研发的有力工具,可检测通路活性。当候选药物、基因敲除(使用siRNA)、过表达(使用表达载体)或多肽激活或抑制通路时,荧光素酶或报告基因的活性被调控,并能被快速、定量检测。

安全性 

Cignal Lenti Reporter Assays是转导即用型、不能复制的、基于HIV的VSV-G假型慢病毒颗粒(参见"Cignal Lenti Reporter Assay")。Cignal慢病毒颗粒使用安全。推荐按照Risk Group Level 2 (RGL-2)生物进行处理。遵守所有发行的RGL-2准则进行操作和废物净化。建造BSL-2工作条件的详细要求可参见U.S. Department of Health and Human Services出版的Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories,第4版。

这些载体经设计改造后具有以下生物安全特征:

3' LTR U3部分的启动子/增强子区域被去除,保证慢病毒载体转导并与目标细胞的基因组DNA整合后自我失活
Cignal Lenti Reporter Assay和质粒表达的包装蛋白无明显的同源区,减少重组的可能性
没有任何HIV-1基因(gag、pol和rev)可在转导细胞中表达,因为它们是由不含包装信号的包装质粒表达的。因此,慢病毒颗粒无法复制
Cignal Lenti Reporter Assay不含病毒性基因(vpr、vif、vpu和nef)
Cignal Lenti Reporter Assays的特征
特征 功能
RSV-5' LTR:融合肉瘤病毒(RSV)增强子/启动子-U5长末端重复 包装病毒和反转录病毒mRNA
Psi:包装信号 允许病毒包装
RRE:病毒响应元素 参与病毒转录物包装
Cppt:中心聚嘌呤区 参与核转移和整合转导的病毒基因
报告基因(萤火虫荧光素酶或GFP) 能够定量转录
hPGK:人磷酸甘油酸激酶真核细胞启动子 可高水平表达哺乳动物筛选标记(嘌呤霉素)
PuroR:嘌呤霉素抗性基因 用于哺乳动物筛选
SIN/3' LTR:3'自动失活长末端重复 经修饰的3' LTR可包装病毒,但自动失活5' LTR,确保生物安全;该元素也包含一个多聚腺苷酸化信号,用于有效终止转录
f1 ori:f1复制起点 在真核细胞中游离复制质粒
AmpR:氨苄青霉素抗性基因 E. coli中筛选质粒
TRE:转录响应元素 通过特有的转录因子调控报告基因的表达
TATA阅读框 较小的启动子
Procedure

Cignal Finder Lenti Reporter Arrays可直接转导,无需构建或扩增慢病毒。这些载体非常适合对难转染细胞瞬时转导或制备通路传感细胞株(参见"Cignal Lenti Reporter procedure")。

操作流程包括3个简单的步骤:

转导Cignal Finder Reporter Assays,检测核酸进入细胞
使用siRNA、蛋白、多肽或目标小分子进行处理
使用荧光素酶活性检测对报告基因定量分析
难转染细胞株的瞬时通路调控研究

使用Cignal Lenti Reporter Assay转导目标细胞。细胞通常培养24–48小时,以确保慢病毒整合。再用相应的生物试剂处理(siRNA、shRNA、化合物、病毒表达载体、蛋白或多肽)。根据处理条件,处理后18–36小时进行报告基因检测(萤火虫荧光素酶或GFP)。

制备稳定的通路传感细胞株 

使用Cignal Lenti Reporter Assay转导目标细胞。转导后,细胞用嘌呤霉素筛选,形成转导细胞的纯细胞群落。如果必要,可挑选单细胞克隆,进而分离通路传感细胞株。这些通路传感细胞株可作为有用的细胞分析平台,用于后续筛选和机理研究。

Applications

Cignal Finder Lenti Reporter Arrays适用于功能基因组学和药物研发,可检测各种哺乳动物细胞的信号活性。非常适合检测siRNAs、蛋白和小分子化合物的生物效应。

您无权限查看此资源

产品介绍与指南 (1)
For measurement of signaling pathways in any mammalian cell
显示更多
试剂盒操作手册 (1)
For lentiviral-based cell signaling activity assays
显示更多
fragment fix placeholder