Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit

用于在Rotor-Gene PCR仪上使用序列特异性探针超快速进行一步法qRT-PCR

  • Rotor-Gene PCR仪上超快速、可靠的结果
  • 灵敏检测低拷贝数基因
  • 大范围模板量内确保准确的检测
  • 专用的即用型预混液确保快速循环

Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit专用于Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪和其他Rotor-Gene PCR仪,使用序列特异性探针采用定量一步法RT-PCR可超快速、高度灵敏的定量RNA靶分子。特殊优化的预混液配合独特的Rotor-Gene PCR仪,表现卓越。预混液可贮存在2–8°C,方便使用。

产品 货号 目录价:
Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit (400)
For 400 x 25 µl reactions: 3 x 1.7 ml 2x Rotor-Gene Probe RT-PCR Master Mix, 100 µl Rotor-Gene RT Mix, 2 x 2 ml RNase-Free Water
204574
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Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


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使用序列特异性探针进行灵敏的检测。|Specific primer annealing.|Fast primer annealing.|
10倍稀释的人白细胞RNA(100 ng到1 ng)作为模板进行一步法real-time RT-PCR。使用TaqMan Gene Expression Assay对IL12RB1(白细胞介素-12受体β1)进行分析,重复三次实验。与[B]供应商AII提供的仪器和试剂盒相比,使用[A] Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪和Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit灵敏度更高(如较低的CT值)。|Cations in the Rotor-Gene Q PCR buffer increase specific primer annealing. K+ binds to phosphate groups on double-stranded DNA, stabilizing primer annealing. NH4+ destabilizes weak hydrogen bonds between mismatched bases.|[A] Q-Bond in Rotor-Gene Probe RT-PCR Master Mix increases the affinity of DNA polymerase for short single-stranded DNA, reducing primer annealing time to a few seconds. In addition, the unique buffer composition supports the melting of DNA, reducing denaturation and extension times. [B] Without Q-Bond, the primer and polymerase bind sequentially to the template, increasing primer annealing time.|
性能
Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit对于低丰度的转录子也可进行可靠的定量分析(参见"Sensitive detection using a sequence-specific probe")。
原理

Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit专用于配合Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪,进行高度可靠的RNA模板定量分析,无需优化反应或扩增条件。该试剂盒专用于水解型探针(如TaqMan探针)。反应以RNA为模板,在同一个反应管中进行逆转录和PCR。由于无需将RT反应产物转移到另一个PCR反应管中,real-time RT-PCR是流水线式的,支持高通量分析。

含有K+和NH4+平衡组合的预混液促进高特异性引物退火 ,确保PCR的高度灵敏和特异性扩增(参见"Specific primer annealing")。新颖的PCR添加剂Q-Bond缩短了循环时间,而不影响表现(参见"Fast primer annealing")。

2x Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit*的组分
组分 特性 优势
HotStarTaq Plus DNA聚合酶 95ºC条件下5分钟激活 在室温下建立qPCR反应体系
Rotor-Gene Probe RT-PCR缓冲液 NH4+和K+平衡组合预混液 特异性引物退火 ,确保可靠的qPCR结果
独特的Q-Bond添加剂 更快速的PCR循环,快速获得结果,一天可进行更多的反应。
Rotor-Gene RT Mix   特殊混合的反转录酶,对RNA亲和力高。 RNA可在10分钟内完成逆转录,即使是复杂的二级结构。
*包含dNTP混合液(dATP、dCTP、dGTP和dTTP)。
操作流程

即用型Rotor-Gene Probe RT-PCR Master Mix无需优化反应和扩增条件。只需在预混液中添加模板RNA、引物、探针和提供的逆转录酶混合液,然后设置PCR仪即可开始实验。试剂盒中提供的操作手册有使用说明。

水解探针(如TaqMan探针)与Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit配合使用,在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上快速、灵敏的定量,只需将引物探针混合物和模板加入预混液即可。

应用

Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit专用于Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪,使用序列特异性探针采用定量一步法RT-PCR可快速定量RNA靶分子。该试剂盒也与Rotor-Gene 3000和Rotor-Gene 6000兼容。

特点
参数
应用 Real-time quantification of RNA targets
描述 For ultrafast quantitative real-time one-step RT-PCR using sequence-specific probes
反应类型 Real-time one-step RT-PCR
real-time或终点法PCR Real-time
样本/目标类型 RNA
单一或多重 Single
SYBR Green I或序列特异性探针 Sequence-specific probes
热循环仪 Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000
有/无ROX Without ROX dye

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产品介绍与指南
1
试剂盒操作手册
1
For fast real-time PCR, two-step RT-PCR, and one-step RT-PCR using sequence-specific probes on Rotor-gene cyclers.
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安全数据表
1
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Sensitive detection using sequence-specific probe
使用序列特异性探针进行灵敏的检测。
10倍稀释的人白细胞RNA(100 ng到1 ng)作为模板进行一步法real-time RT-PCR。使用TaqMan Gene Expression Assay对IL12RB1(白细胞介素-12受体β1)进行分析,重复三次实验。与[B]供应商AII提供的仪器和试剂盒相比,使用[A] Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪和Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit灵敏度更高(如较低的CT值)。
Specific primer annealing using a balanced combination of K+ and NH4+ ions
Specific primer annealing.
Cations in the Rotor-Gene Q PCR buffer increase specific primer annealing. K+ binds to phosphate groups on double-stranded DNA, stabilizing primer annealing. NH4+ destabilizes weak hydrogen bonds between mismatched bases.
Fast primer annealing with Q-Bond
Fast primer annealing.
[A] Q-Bond in Rotor-Gene Probe RT-PCR Master Mix increases the affinity of DNA polymerase for short single-stranded DNA, reducing primer annealing time to a few seconds. In addition, the unique buffer composition supports the melting of DNA, reducing denaturation and extension times. [B] Without Q-Bond, the primer and polymerase bind sequentially to the template, increasing primer annealing time.